【摘要】：采用免疫熒光法,使用角蛋白鑒定奶牛輸卵管上皮細胞;采用熒光定量PCR法檢測奶牛輸卵管上皮細胞輸卵管蛋白mRNA的表達;采用Wsetern blot法檢測了奶牛輸卵管上皮細胞輸卵管蛋白的表達。結(jié)果顯示:加入butaprost(EP2受體激動劑,10~(-6) mol/L)能促進輸卵管蛋白的表達,加入fluprostenol(FP受體激動劑,10~(-6) mol/L)能抑制輸卵管蛋白的表達。結(jié)果表明:PGE2在奶牛輸卵管上通過激活EP2受體上調(diào)輸卵管蛋白的表達,PGF2α通過激活FP受體下調(diào)輸卵管蛋白的表達。
【圖文】：

胞中相對表達量計算。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ條帶采用ｉｍａｇｅＪ軟件分析，ＧｒａｐｈＰａｄ軟件進行數(shù)據(jù)分析。試驗數(shù)據(jù)均采用平均值和標準誤差（ＳＥＭ）表示，應用Ｔｕｋｅｙｔｅｓｔ檢驗進行分析，Ｐ＜０．０５表示差異顯著（＊／＃），Ｐ＜０．０１表示差異極顯著（＊＊／＃＃）。２結(jié)果２．１奶牛輸卵管上皮細胞的培養(yǎng)鑒定培養(yǎng)得到的第４代上皮細胞呈橢圓形，邊緣清晰，排列緊密，放射狀生長，，匯合度達到９０％以上，少有纖維細胞（圖１）。圖１奶牛輸卵管上皮細胞免疫熒光鑒定２．２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對奶牛輸卵管上皮細胞輸卵管蛋白表達的影響與０ｈ相比，各個時間點輸卵管蛋白的表達量幾乎無明顯差異（圖２）。因此，在后續(xù)試驗中，采用０ｈ作為空白對照組。圖２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對輸卵管蛋白的影響（＊示Ｐ＜０．０５，＊＊示Ｐ＜０．０１。下同）Ａ．ｍＲＮＡ相對表達量柱狀圖；Ｂ．輸卵管蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ圖；Ｃ．輸卵管蛋白相對表達量柱狀圖１３９６中國獸醫(yī)學報２０１７年７月第３７卷第７期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪｕｌ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．７

胞中相對表達量計算。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ條帶采用ｉｍａｇｅＪ軟件分析，ＧｒａｐｈＰａｄ軟件進行數(shù)據(jù)分析。試驗數(shù)據(jù)均采用平均值和標準誤差（ＳＥＭ）表示，應用Ｔｕｋｅｙｔｅｓｔ檢驗進行分析，Ｐ＜０．０５表示差異顯著（＊／＃），Ｐ＜０．０１表示差異極顯著（＊＊／＃＃）。２結(jié)果２．１奶牛輸卵管上皮細胞的培養(yǎng)鑒定培養(yǎng)得到的第４代上皮細胞呈橢圓形，邊緣清晰，排列緊密，放射狀生長，匯合度達到９０％以上，少有纖維細胞（圖１）。圖１奶牛輸卵管上皮細胞免疫熒光鑒定２．２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對奶牛輸卵管上皮細胞輸卵管蛋白表達的影響與０ｈ相比，各個時間點輸卵管蛋白的表達量幾乎無明顯差異（圖２）。因此，在后續(xù)試驗中，采用０ｈ作為空白對照組。圖２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對輸卵管蛋白的影響（＊示Ｐ＜０．０５，＊＊示Ｐ＜０．０１。下同）Ａ．ｍＲＮＡ相對表達量柱狀圖；Ｂ．輸卵管蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ圖；Ｃ．輸卵管蛋白相對表達量柱狀圖１３９６中國獸醫(yī)學報２０１７年７月第３７卷第７期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪｕｌ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．７


本文編號：2573721