【摘要】：采用免疫熒光法,使用角蛋白鑒定奶牛輸卵管上皮細(xì)胞;采用熒光定量PCR法檢測(cè)奶牛輸卵管上皮細(xì)胞輸卵管蛋白mRNA的表達(dá);采用Wsetern blot法檢測(cè)了奶牛輸卵管上皮細(xì)胞輸卵管蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示:加入butaprost(EP2受體激動(dòng)劑,10~(-6) mol/L)能促進(jìn)輸卵管蛋白的表達(dá),加入fluprostenol(FP受體激動(dòng)劑,10~(-6) mol/L)能抑制輸卵管蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明:PGE2在奶牛輸卵管上通過(guò)激活EP2受體上調(diào)輸卵管蛋白的表達(dá),PGF2α通過(guò)激活FP受體下調(diào)輸卵管蛋白的表達(dá)。
【圖文】：

胞中相對(duì)表達(dá)量計(jì)算。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ條帶采用ｉｍａｇｅＪ軟件分析，ＧｒａｐｈＰａｄ軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤差（ＳＥＭ）表示，應(yīng)用Ｔｕｋｅｙｔｅｓｔ檢驗(yàn)進(jìn)行分析，Ｐ＜０．０５表示差異顯著（＊／＃），Ｐ＜０．０１表示差異極顯著（＊＊／＃＃）。２結(jié)果２．１奶牛輸卵管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)鑒定培養(yǎng)得到的第４代上皮細(xì)胞呈橢圓形，邊緣清晰，排列緊密，放射狀生長(zhǎng)，，匯合度達(dá)到９０％以上，少有纖維細(xì)胞（圖１）。圖１奶牛輸卵管上皮細(xì)胞免疫熒光鑒定２．２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對(duì)奶牛輸卵管上皮細(xì)胞輸卵管蛋白表達(dá)的影響與０ｈ相比，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)輸卵管蛋白的表達(dá)量幾乎無(wú)明顯差異（圖２）。因此，在后續(xù)試驗(yàn)中，采用０ｈ作為空白對(duì)照組。圖２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對(duì)輸卵管蛋白的影響（＊示Ｐ＜０．０５，＊＊示Ｐ＜０．０１。下同）Ａ．ｍＲＮＡ相對(duì)表達(dá)量柱狀圖；Ｂ．輸卵管蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ圖；Ｃ．輸卵管蛋白相對(duì)表達(dá)量柱狀圖１３９６中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)２０１７年７月第３７卷第７期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪｕｌ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．７

胞中相對(duì)表達(dá)量計(jì)算。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ條帶采用ｉｍａｇｅＪ軟件分析，ＧｒａｐｈＰａｄ軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤差（ＳＥＭ）表示，應(yīng)用Ｔｕｋｅｙｔｅｓｔ檢驗(yàn)進(jìn)行分析，Ｐ＜０．０５表示差異顯著（＊／＃），Ｐ＜０．０１表示差異極顯著（＊＊／＃＃）。２結(jié)果２．１奶牛輸卵管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)鑒定培養(yǎng)得到的第４代上皮細(xì)胞呈橢圓形，邊緣清晰，排列緊密，放射狀生長(zhǎng)，匯合度達(dá)到９０％以上，少有纖維細(xì)胞（圖１）。圖１奶牛輸卵管上皮細(xì)胞免疫熒光鑒定２．２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對(duì)奶牛輸卵管上皮細(xì)胞輸卵管蛋白表達(dá)的影響與０ｈ相比，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)輸卵管蛋白的表達(dá)量幾乎無(wú)明顯差異（圖２）。因此，在后續(xù)試驗(yàn)中，采用０ｈ作為空白對(duì)照組。圖２內(nèi)源性ＰＧＥ２和ＰＧＦ２α對(duì)輸卵管蛋白的影響（＊示Ｐ＜０．０５，＊＊示Ｐ＜０．０１。下同）Ａ．ｍＲＮＡ相對(duì)表達(dá)量柱狀圖；Ｂ．輸卵管蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ圖；Ｃ．輸卵管蛋白相對(duì)表達(dá)量柱狀圖１３９６中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)２０１７年７月第３７卷第７期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪｕｌ．２０１７Ｖｏｌ．３７Ｎｏ．７


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