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豬繁殖與呼吸綜合征病毒不同毒株RT-PCR鑒別檢測方法的建立及初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2019-12-04 03:19
【摘要】:豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的豬的急性或亞急性高度接觸性傳染病,主要侵害妊娠母豬和未斷奶仔豬,具有傳播速度快、死亡率高的特點,嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。PRRSV基因易發(fā)生變異,產(chǎn)生多種不同變異毒株,給疾病的防控帶來很大困難。2006年爆發(fā)的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征給我國養(yǎng)豬業(yè)造成巨大打擊。目前國內(nèi)流行的毒株均為美洲型,主要為經(jīng)典型毒株和毒力較強的高致病性毒株。由于PRRSV不同毒株感染動物后的臨床表現(xiàn)、危害程度及其疫苗交叉保護力不盡相同,及時準確鑒定出當前流行毒株對防治豬繁殖與呼吸綜合征具有積極意義。豬繁殖與呼吸綜合征經(jīng)典毒株、高致病性毒株、基因缺失弱毒疫苗株(TJM-F92)的Nsp2基因存在部分差異。高致病性毒株和基因缺失疫苗株分別存在90個和450個不連續(xù)核苷酸缺失。本研究在其缺失位點兩端設(shè)計引物,根據(jù)擴增目的片段大小不同區(qū)分三種不同毒株,建立RT-PCR鑒別檢測方法。通過實驗證明,該方法具有較好的敏感性、特異性和重復(fù)性,對三種毒株的擴增產(chǎn)物大小分別為1 332bp、1 242bp和882bp。使用此RT-PCR檢測方法檢測吉林、黑龍江等地區(qū)68份臨床疑似豬繁殖與呼吸綜合征病料,發(fā)現(xiàn)經(jīng)典毒株檢出率為13.23%,高致病性毒株檢出率為20.58%,基因缺失疫苗TJM-F92株檢出率為8.82%。本研究建立了PRRSV不同毒株RT-PCR鑒別檢測方法,能夠檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒并鑒別其毒株類型,從而區(qū)分疫苗免疫豬和野毒感染豬,以及患病豬所感染的毒株種類,為有效預(yù)防PRRS、評價疫苗免疫效果以及凈化該疫病奠定一定基礎(chǔ)。
【圖文】:

引物篩選,PCR擴增


引物篩選PCR擴增結(jié)果

大腸桿菌,重組質(zhì)粒,PCR擴增


重組質(zhì)粒鑒定PCR擴增結(jié)果
【學(xué)位授予單位】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S858.28

【參考文獻】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 侯振中;國內(nèi)外PRRSV美洲型毒株結(jié)構(gòu)基因序列分析及感染豬病理和細胞免疫變化的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

2 周鐵忠;遼寧省豬繁殖與呼吸綜合征分子流行病學(xué)調(diào)查及免疫防制研究[D];吉林大學(xué);2010年



本文編號:2569437

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