【摘要】：細胞自噬(Autophagy)是一種真核生物細胞內損傷的細胞器和長壽命蛋白通過雙層膜結構的自噬小泡包裹后,送入溶酶體或液泡中進行降解并得以循環(huán)利用的高度保守的分解代謝過程。本研究旨在了解細胞病變型(CEP)牛病毒性腹瀉病毒(BVDV NM)對宿主細胞MDBK細胞自噬作用的影響。實驗使用BVDV NM株感染宿主細胞MDBK,在不同時間點分別通過透射電鏡觀察自噬體形成、報告熒光GFP-LC3自噬底物檢測以及Western blot方法鑒定細胞自噬標記物LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ和P62的表達等試驗方法對自噬進行檢測。結果顯示,感染BVDV NM株的MDBK細胞出現(xiàn)了明顯的細胞病變;透射電鏡能觀察到細胞中存在大量的雙層膜結構的自噬泡;轉染GFP-LC3熒光質粒后,在感染病毒的細胞內出現(xiàn)增多的聚集綠色熒光自噬小體;此外,隨著BVDV NM株感染MDBK時間的延長可以發(fā)現(xiàn)LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的量逐漸增加以及P62蛋白的降解。試驗表明BVDV NM株感染MDBK可以促進細胞自噬的發(fā)生。

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本文編號：2565090