【摘要】：肝臟是動(dòng)物脂代謝的重要器官,在脂類(lèi)的消化、吸收、分解、合成等過(guò)程中均起重要作用。目前,有關(guān)填飼高能日糧誘導(dǎo)鵝肥肝形成的機(jī)理還不完全清楚,普遍認(rèn)為肝臟合成脂肪和脂蛋白運(yùn)輸脂肪及脂肪酸β-氧化平衡的破壞是肝中脂肪異常沉積形成肥肝的主要原因。為從分子水平研究鵝肥肝形成的分子機(jī)理,本研究在克隆鵝ApoA1、CD36和DGAT2基因cDNA序列的基礎(chǔ)上,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法研究了脂肪代謝相關(guān)的ApoA1、CD36、DGAT2、Spot14、SREBP和OB等重要基因在鵝脂肪組織中的表達(dá)分布、以及在對(duì)鵝進(jìn)行一定填肥后的表達(dá)差異情況。主要研究結(jié)果如下:1.對(duì)100日齡,填飼3周的朗德鵝進(jìn)行體尺測(cè)量及體重、肝重測(cè)定,并對(duì)朗德鵝體尺指標(biāo)與體重、肝重進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明,朗德鵝活重與體斜長(zhǎng)、龍骨長(zhǎng)、半潛水長(zhǎng)呈極顯著相關(guān)(P0.01)。肝重與體斜長(zhǎng)、龍骨長(zhǎng)呈顯著相關(guān)(P0.05)。2.利用RT-PCR方法和RACE技術(shù),克隆獲得了鵝ApoA1、CD36和DGAT2基因的cDNA序列。同源性分析結(jié)果表明,這3個(gè)基因cDNA與鴨的同源性最高,達(dá)到90%以上,與雞的同源性較高,與人等哺乳動(dòng)物的同源性均較低。3.選擇同批孵化的7周齡健康朗德鵝公鵝10只,將鵝隨機(jī)分為兩組,填飼組與對(duì)照組各5只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法研究了Spot 14、Apo A1、CD36、DGAT2、SREBP和OB等基因在朗德鵝體內(nèi)表達(dá)的組織特異性,以及以上各基因在填飼組鵝和對(duì)照組鵝之間的表達(dá)差異。結(jié)果表明:1)Spot14基因在14種組織中均有表達(dá),在腹脂組織和腸組織中高度表達(dá);OB基因在14種組織中均有所表達(dá);ApoA1在脂肪組織、腸以及肝臟中的表達(dá)量明顯高于其它組織;CD36基因在脂肪和肌肉組織中表達(dá)量高于其它組織;SREBP基因在腎臟中表達(dá)最高,在肝和肺中也有一定的表達(dá)量,在其它組織中表達(dá)較低;DGAT2基因在腎、肝和肺組織中表達(dá)量高于其它組織;2)Spot 14基因和Apo A1基因在填肥鵝肝臟組織中的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P0.05)。在其它組織則未發(fā)現(xiàn)有顯著差異。鵝CD36基因中填肥鵝的肝組織中表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P0.01),在其它組織則未發(fā)現(xiàn)有顯著差異。鵝SREBP和DGAT2基因填肥鵝的脾臟組織中表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P0.05),在其它組織則未發(fā)現(xiàn)有顯著差異。
【圖文】：

１．２．３．３膜島素逡逑膜島素的主要作用之一是在碳水化合物過(guò)剩的情況下，刺激肝臟脂肪酸的合逡逑成。如圖１所示，ＡＤＤ１／ＳＲＥＢＮ是連接營(yíng)養(yǎng)狀況、膜島素水平與某些調(diào)節(jié)機(jī)體逡逑能量代謝的基因的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Ｗ。膜島素可Ｗ從兩個(gè)水平調(diào)節(jié)ＳＲＥＢＰ１。一方逡逑面，，膜島素可Ｗ增加ＳＲＥＢＰｍＲＮＡ的表達(dá)水平；另一方面，膜島素的濃度可Ｗ逡逑通過(guò)調(diào)節(jié)膜島素受體水平來(lái)執(zhí)行相關(guān)的功能。但關(guān)于族島素對(duì)ＳＲＥＢＰ調(diào)節(jié)的機(jī)逡逑理仍然存在幾個(gè)問(wèn)題尚不清楚。營(yíng)養(yǎng)狀況和族島素可很大程度上對(duì)ＳＲＥＢＰ進(jìn)逡逑行調(diào)節(jié)，可能是因?yàn)樵冢樱遥牛拢猩嫌未嬖谄渌奈粗蜃�，營(yíng)養(yǎng)狀況和膜島素水逡逑平可Ｗ對(duì)這些因子進(jìn)行轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)節(jié)。逡逑４逡逑

圖１１文中引物的標(biāo)準(zhǔn)曲線逡逑４．３．２脂肋代謝相關(guān)基因的表達(dá)逡逑
【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S835

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2535471