【摘要】：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)是禽的兩種逆轉(zhuǎn)錄病毒,它們不僅能夠讓感染雞群發(fā)生腫瘤并引起免疫抑制,還常常因?yàn)橥ㄟ^(guò)種雞群的垂直傳播而引起種雞群和商品代雞群之間的糾紛。此外,由于這兩種病毒均可以通過(guò)種蛋垂直傳播,繼而成為禽的弱毒疫苗中報(bào)道最為頻繁的外源病毒污染物。本研通過(guò)對(duì)十種地方品系雞群中ALV和REV感染進(jìn)行了血清學(xué)調(diào)查,并利用多種方法對(duì)其所使用的多批疫苗進(jìn)行了針對(duì)REV和ALV的檢測(cè),并試圖解析不同雞群高抗體陽(yáng)性率與疫苗中ALV和REV污染之間的關(guān)系。1.分別應(yīng)用商品化的ELISA抗體檢測(cè)試劑盒和間接免疫熒光反應(yīng)(IFA)對(duì)來(lái)自于十種地方品系雞群的1500份血清樣品進(jìn)行針對(duì)REV、ALV-A/B、ALV-J抗體的檢測(cè),結(jié)果顯示不管應(yīng)用哪種方法,三種病毒的抗體陽(yáng)性率均處于相對(duì)較高的水平,針對(duì)REV、ALV-A/B、ALV-J抗體檢測(cè)陽(yáng)性率分別為17.3%—100%,8.0%—59.3%,4.0%—16.0%。IFA和ELISA兩種方法吻合性較好,總體上經(jīng)ELISA鑒定為陽(yáng)性的血清樣品經(jīng)過(guò)IFA復(fù)核檢測(cè)也均為陽(yáng)性,但是某些經(jīng)ELISA檢測(cè)其讀數(shù)的OD值在臨界值附近的血清樣品經(jīng)IFA檢測(cè)可見(jiàn)典型的綠色熒光,也可判定為REV抗體陽(yáng)性,該結(jié)果顯示IFA靈敏度更高一些,但是在進(jìn)行大批量的樣品檢測(cè)時(shí)IFA相對(duì)較為繁瑣,不適于群體的評(píng)估,但可以作為對(duì)ELISA檢測(cè)的復(fù)核檢驗(yàn)和補(bǔ)充。2.將不同種雞群使用的新城疫病毒(NDV)滅活疫苗、H9亞型禽流感病毒(AIV-H9)滅活疫苗、雞馬立克氏病毒(MDV)弱毒疫苗、禽痘病毒(FPV)弱毒疫苗、NDV弱毒疫苗、雞傳染性法氏囊病毒(IBDV)弱毒疫苗分別按照中國(guó)獸藥典要求接種SPF雞后35d和42d檢測(cè)針對(duì)REV、ALV-A/B、ALV-J的抗體,檢測(cè)結(jié)果顯示在四種弱毒疫苗中抗體均為陰性,但是在某些批次的新城疫病毒(NDV)滅活疫苗中能夠檢測(cè)到REV,該結(jié)果顯示制備該批次的疫苗所用的雞胚可能存在著REV的污染,這可能可以解釋為何在一些雞群中REV抗體陽(yáng)性率較高但不發(fā)病的原因。在每種疫苗中分別人為的污染了高劑量組和低劑量組的REV和ALV,對(duì)四種弱毒疫苗同時(shí)分別用常規(guī)RT-PCR、PCR結(jié)合核酸探針斑點(diǎn)雜交技術(shù)進(jìn)行針對(duì)REV和ALV污染的檢測(cè),結(jié)果顯示PCR結(jié)合核酸探針斑點(diǎn)雜交技術(shù)檢測(cè)可以檢測(cè)到所有人為污染低劑量的REV和ALV,而常規(guī)RT-PCR檢測(cè)僅可以檢測(cè)到高劑量組的REV和ALV。這兩種方法針對(duì)不同批次的四種疫苗檢測(cè)結(jié)果均為陰性,與接種SPF雞的檢測(cè)結(jié)果是一致的。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S858.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2534504