【摘要】：豬卵母細胞體外受精(in vitro fertilization,IVF)技術為受精和胚胎早期發(fā)育機理等基礎理論的研究及生產(chǎn)實踐提供了重要的研究手段。雖然豬IVF的研究已經(jīng)取得了一些進展,但其囊胚發(fā)育率仍然較低,亟需建立更為穩(wěn)定、高效的體外受精方法。本試驗通過比較精子濃度,精子獲能處理,不同精卵共孵育培養(yǎng)體系以及在卵母細胞成熟過程中添加不同激素等影響豬卵母細胞體外受精胚胎發(fā)育能力的因素,以求找到最佳的豬卵母細胞體外受精體系。結果顯示:在精子濃度為1×10~5~1×10~7/mL,5×10~6/mL的精子濃度顯著提高體外受精效率(P0.05);以茶堿、咖啡及咖啡因聯(lián)合使用肝素作為獲能物質處理精子,發(fā)現(xiàn)2.5 mmol/L茶堿處理組體外受精效率顯著提高(P0.05);通過比較不同的受精體系,發(fā)現(xiàn)使用40個卵/500μL體系顯著提高體外受精效率(P0.05);在卵母細胞成熟液中添加不同激素組合,發(fā)現(xiàn)添加10IU/mL PMSG,10IU/mL HCG和2.5IU/mL FSH激素組合,體外受精效率顯著提高(P0.05)。本試驗結果表明,在M199中添加10IU/mL PMSG,10IU/mL HCG和2.5IU/mL FSH體外成熟培養(yǎng)卵母細胞,以5×10~6/mL精子濃度,2.5mmol/L茶堿作為獲能物質處理精子,40個卵/500μL共孵育的IVF體系效果最佳,其卵裂率為(61.33±0.77)%,囊胚率為(28.33±1.08)%。本試驗將為深入研究豬IVF提供理論參考。
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【作者單位】： 吉林大學動物醫(yī)學學院;吉林大學第一醫(yī)院/轉化醫(yī)學研究院/人類疾病動物模型國家地方聯(lián)合工程實驗室;
【基金】：教育部“長江學者和創(chuàng)新團隊發(fā)展計劃”資助項目(IRT1248)
【分類號】：S828

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本文編號：2489341