【摘要】：小反芻獸疫（Peste des petits ruminants，PPR）是由小反芻獸疫病毒（Peste despetits ruminants virus，PPRV）引起綿羊、山羊等小反芻動(dòng)物的一種急性、烈性傳染病，是嚴(yán)重威脅和危害養(yǎng)羊業(yè)的一種重要的病毒性疾病，該病目前已被我國農(nóng)業(yè)部列為一類動(dòng)物疫病。該病傳染性強(qiáng)，臨床上感染動(dòng)物主要以出現(xiàn)高熱、口炎、肺炎、腸炎為特征，具有較高的發(fā)病率和死亡率。PPR以往主要在撒哈拉以南的非洲地區(qū)、印度和中東國家流行，呈地方流行性，然而近年來該病呈現(xiàn)蔓延的趨勢(shì)，在周邊多個(gè)國家均有該病的發(fā)生和流行。自2007年我國西藏阿里地區(qū)首次發(fā)生小反芻獸疫疫情以來，我國新疆、甘肅、內(nèi)蒙古等多個(gè)省份均有該疫情的發(fā)生。 2014年4月，遼寧省錦州市北鎮(zhèn)某養(yǎng)羊戶飼養(yǎng)的57只山羊中，先后有18只山羊出現(xiàn)體溫升高（升高至41℃左右）、咳嗽、流鼻涕，且眼、鼻周圍可見膿性分泌物以及腹瀉等臨床癥狀，一些嚴(yán)重病例很快發(fā)生死亡。根據(jù)該病的流行特點(diǎn)及臨床癥狀，初步診斷為羊小反芻獸疫。為了進(jìn)一步證實(shí)，本研究利用大體病理剖檢、病理組織學(xué)觀察、細(xì)菌學(xué)檢查、電鏡負(fù)染觀察、RT-PCR等方法從病理學(xué)和病原學(xué)角度對(duì)該病的發(fā)生原因進(jìn)行系統(tǒng)深入的研究。具體研究?jī)?nèi)容如下： 1PPR的病理學(xué)診斷 對(duì)送檢病羊進(jìn)行大體病理剖檢，肺臟可見有充血、水腫，肺尖葉呈肉樣變；胃壁黏膜發(fā)生脫落。隨后，采集病羊心、肝、脾、肺、腎、腸等多個(gè)組織臟器，制作石蠟切片并進(jìn)行H.E.染色，病理組織學(xué)觀察可見，肺臟肺泡隔增寬，呈現(xiàn)典型的間質(zhì)性肺炎變化；肺泡壁毛細(xì)血管充血、淤血，肺泡壁上皮細(xì)胞增生；支氣管黏膜上皮細(xì)胞增生，部分細(xì)胞壞死、甚至脫落到管腔中；肝臟發(fā)生輕度脂肪變性；腎小管周圍毛細(xì)血管充血淤血較為嚴(yán)重。 2PPR的病原學(xué)診斷 將肺臟、脾臟等病料進(jìn)行研磨后提取RNA，利用PPRV特異性引物進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增獲得與預(yù)期目的基因片段大小一致的條帶。將經(jīng)感作處理后的病料研磨上清液接種單層Vero細(xì)胞進(jìn)行病原分離，在接種病料72h后出現(xiàn)明顯的CPE。收集細(xì)胞病變液，反復(fù)凍融3次后進(jìn)行電鏡負(fù)染觀察，可見橢圓形，有囊膜，直徑約為300nm的病毒粒子，與PPRV形態(tài)特征一致；此外，細(xì)菌學(xué)檢測(cè)排除了細(xì)菌混合感染的可能性。綜合分析以上結(jié)果，從病原學(xué)角度證實(shí)該疫情發(fā)生的原因?yàn)镻PRV感染所致。之后，在分離獲得PPRV毒株的基礎(chǔ)上，，對(duì)該分離株的M和F基因進(jìn)行擴(kuò)增、克隆及測(cè)序，并通過繪制遺傳進(jìn)化樹對(duì)其M和F基因的分子生物學(xué)特性進(jìn)行初步研究，遺傳進(jìn)化分析結(jié)果顯示，該毒株與在我國發(fā)生流行的毒株親緣性較高，屬于Ⅳ系。 該研究不僅為針對(duì)PPRV疫苗的研制提供重要的物質(zhì)基礎(chǔ)，而且將為制定針對(duì)PPR切實(shí)有效的防控措施提供一定的理論依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S855.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2489065