【摘要】：鄰苯二甲酸二乙基己酯(Di-(2-ethylhexyl) phthalate, DEHP)是一種典型的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,具有抗雄激素、擬雌激素以及抗雌激素的作用,可通過(guò)干擾性激素的分泌,導(dǎo)致生殖毒性和神經(jīng)毒性,嚴(yán)重威脅著動(dòng)物和人類的健康。圍生期和青春期是個(gè)體發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期,對(duì)外界激素環(huán)境十分敏感。青春前期是個(gè)體由兒童期步入青春期的過(guò)渡時(shí)期,此時(shí)性腺開(kāi)始發(fā)育并逐漸成熟,對(duì)大腦的發(fā)育和行為的形成及其性別分化十分重要,是情緒和認(rèn)知行為發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期。若在這一時(shí)期暴露于DEHP,極有可能干擾性激素對(duì)腦的調(diào)節(jié)作用而影響動(dòng)物的情緒和行為。社會(huì)行為是指同種動(dòng)物不同個(gè)體之間相互交流時(shí)發(fā)生的一系列行為,社會(huì)行為關(guān)系著個(gè)體的生存與繁殖。社會(huì)玩耍行為是發(fā)動(dòng)社會(huì)行為的第一步,也是開(kāi)始社會(huì)交互的關(guān)鍵,社會(huì)交互行為是個(gè)體融入社會(huì)所應(yīng)具備的能力；而社會(huì)新奇偏好是社會(huì)認(rèn)知和社會(huì)記憶的體現(xiàn),這三種社會(huì)行為是個(gè)體所應(yīng)具備的基本社會(huì)能力。社會(huì)行為的變化可能與動(dòng)物的情緒相關(guān)聯(lián)。一般來(lái)說(shuō),情緒高漲的個(gè)體有較高的社會(huì)行為,但也存在相反的例子。海馬是與認(rèn)知功能密切相關(guān)的腦區(qū),學(xué)習(xí)記憶能力隨海馬的損傷而消退。海馬的末端是杏仁核,是控制情緒行為的關(guān)鍵腦區(qū),杏仁核損傷的人常表現(xiàn)出情緒失常,不能正確的表達(dá)自己,從而導(dǎo)致社會(huì)行為異常。大腦的發(fā)育對(duì)性激素十分敏感,雌雄激素主要是通過(guò)雌雄激素受體來(lái)發(fā)揮作用,海馬和杏仁核中雌激素受體p和雄激素受體分布廣泛。分布于杏仁核區(qū)的中腦邊緣多巴胺神經(jīng)系統(tǒng)與杏仁核對(duì)情緒行為的調(diào)節(jié)有關(guān),而多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體和多巴胺受體是調(diào)節(jié)多巴胺神經(jīng)系統(tǒng)的重要組分,多巴胺受體D2與情緒和行為的發(fā)育相關(guān)。本文通過(guò)建立青春前期DEHP暴露的小鼠模型,通過(guò)多種行為模型檢測(cè)青春前期DEHP暴露對(duì)小鼠社會(huì)行為的影響,并通過(guò)檢測(cè)海馬和杏仁核雌雄激素受體、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體和多巴胺受體2的表達(dá)水平探討其作用機(jī)制。研究?jī)?nèi)容：青春前期DEHP暴露對(duì)青春期及成年后雌雄小鼠的活動(dòng)性、焦慮及社會(huì)行為的影響；青春前期DEHP暴露對(duì)小鼠血清睪酮和雌二醇含量的影響；青春前期DEHP暴露對(duì)腦內(nèi)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT),多巴胺受體D2、雌激素受體(ERβ)和雄激素受體(AR)表達(dá)的影響。研究方法：青春前期(生后28～42天,PND28-42)雌雄小鼠進(jìn)行DEHP(1、10、50、200 mg/kg/day)灌胃染毒,同時(shí)設(shè)對(duì)照組,分別在PND42和PND84時(shí)采用曠場(chǎng)模型檢測(cè)其活動(dòng)性、高架十字迷宮模型檢其測(cè)焦慮程度、社會(huì)玩耍模型檢測(cè)其社會(huì)玩耍能力,三室模型檢測(cè)其社會(huì)交互和社會(huì)新奇偏好能力。同時(shí)取PND42和PND84小鼠(未進(jìn)行行為測(cè)試)的海馬和杏仁核,Western blot檢測(cè)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT),多巴胺受體D2、雌激素受體(ERβ)和雄雌激素受體(AR)的表達(dá),放射免疫法檢測(cè)雄性小鼠血清中睪酮的含量和雌性小鼠血清中雌二醇的含量。研究結(jié)果：1.體重：與對(duì)照組相比,青春前期DEHP暴露后,在青春期：10 mg/kg/day DEHP顯著減少雌鼠的體重(p0.05),200 mg/kg/day DEHP顯著增加雄鼠的體重(p0.05)；在成年期：1 mg/kg/day DEHP顯著增加雌鼠的體重(p0.01)。2.血清激素水平和生殖器官：青春前期DEHP暴露后,在青春期：50和200mg/kg/day DEHP使雄鼠的睪丸系數(shù)顯著降低了(p0.05,p0.01)；在成年期：200mg/kg/day DEHP顯著縮短雄鼠的肛殖距(p0.01)。3.行為檢測(cè)結(jié)果：1)曠場(chǎng)行為檢測(cè)：DEHP暴露后,在青春期：與對(duì)照組相比,雄性小鼠在10～200mg/kg/day時(shí)1 min和5 min的跑格數(shù)顯著增加(p0.05,p0.01),在1和200mg/kg/day時(shí)理毛次數(shù)增加(p0.05),在200 mg/kg/day時(shí)站立次數(shù)增加(p0.05)；雌性小鼠在50和200 mg/kg/day 5 min的跑格數(shù)和站立次數(shù)顯著增加(p0.05,p0.01),200 mg/kg/day時(shí)理毛次數(shù)顯著減少(p0.05)。成年期小鼠的曠場(chǎng)行為仍受DEHP暴露的影響：雄性小鼠50和200 mg/kg/day時(shí)5 min的跑格數(shù)增加(p0.05),在200 mg/kg/day時(shí)理毛次數(shù)減少(p0.01),在10～200 mg/kg/day時(shí)站立次數(shù)減少(p0.01)；雌性小鼠在10和50 mg/kg/day時(shí)5 min的跑格數(shù)減少(p0.05,p0.01),在1和50 mg/kg/day時(shí)理毛次數(shù)增加(p0.05,p0.01),在10mg/kg/day時(shí)站立次數(shù)減少(p0.05)。結(jié)果表明,DEHP暴露在青春期可增加雄性小鼠的活動(dòng)性,但對(duì)雌性小鼠的影響存在時(shí)期差異,表現(xiàn)為青春期增加其活動(dòng)性,而成年期抑制其活動(dòng)性。2)高架十字迷宮行為：青春前期DEHP暴露可顯著影響雌雄小鼠的高架十字迷宮行為。對(duì)于青春期小鼠的影響表現(xiàn)為：1和50 mg/kg/day DEHP暴露顯著增加雄性小鼠在開(kāi)放臂的時(shí)間(p0.05, p0.01),10～200 mg/kg/day顯著增加其在中央?yún)^(qū)的探頭次數(shù)(p0.01,p0.05)；1或者10 mg/kg/day DEHP暴露顯著減少雌性小鼠進(jìn)入開(kāi)放臂的時(shí)間和次數(shù)(p0.05,p0.01),50和200 mg/kg/day顯著增加其中央?yún)^(qū)探頭次數(shù)(p0.01)。成年期表現(xiàn)為,DEHP暴露后,在1-50 mg/kg/day雄性小鼠在開(kāi)放臂的時(shí)間顯著增加(p0.05,p0.01),在200 mg/kg/day顯著減少其中央?yún)^(qū)探頭次數(shù)(p0.01),在1 mg/kg/day顯著減少其總進(jìn)入次數(shù)(p0.05)；在1～200mg/kg/day雌性小鼠進(jìn)入開(kāi)放臂的時(shí)間和次數(shù)顯著減少(p0.05)。以上結(jié)果顯示,DEHP對(duì)雌雄小鼠焦慮程度的影響有所不同,表現(xiàn)為,DEHP暴露可減弱雄性小鼠的焦慮程度,卻增加雌性小鼠的焦慮程度。3)社會(huì)玩耍行為：對(duì)于相互接觸的時(shí)間來(lái)講,青春前期DEHP暴露后,在青春期：1和50 mg/kg/day顯著減少雌鼠的社會(huì)玩耍時(shí)間(p0.05); 50 mg/kg/day顯著增加雄鼠的社會(huì)玩耍時(shí)間(p0.01)。在成年期：DEHP暴露在1和200 mg/kg/day顯著減少雄鼠的社會(huì)玩耍時(shí)間(p0.01)。對(duì)于社會(huì)探索的時(shí)間來(lái)看,青春前期DEHP暴露在1-200 mg/kg/day顯著減少青春期雌鼠社會(huì)探索時(shí)間(p0.05,p0.01)；但是在50 mg/kg/day增加青春期雄鼠的社會(huì)探索時(shí)間(p0.01)。 DEHP暴露在1,50和200 mg/kg/day顯著減少成年期雄鼠的社會(huì)探索時(shí)間(p0.01)。這些結(jié)果表明青春前期DEHP暴露抑制青春期雌鼠的玩耍行為和社會(huì)探索行為,但是,這一影響在成年期消失,然而,DEHP暴露增強(qiáng)青春期雄鼠的玩耍行為和社會(huì)探索,但是在成年期抑制雄鼠的這些行為。4)社會(huì)交互行為：青春期DEHP暴露后,在200 mg/kg/day,顯著減少青春期雌鼠與陌生鼠交流的時(shí)間(p0.01)、增加進(jìn)入左隔間的時(shí)間(p0.01)、延長(zhǎng)嗅探空滾筒的時(shí)間(p0.05); DEHP暴露在10和50 mg/kg/day顯著延長(zhǎng)青春期雄鼠與陌生鼠交流的時(shí)間(p0.05)和在右隔間的時(shí)間(p0.05),顯著減少嗅探空滾筒的時(shí)間和在左隔間的時(shí)間。DEHP暴露在1 mg/kg/day顯著減少成年期雌鼠在右隔間的時(shí)間卻增加在左隔間的時(shí)間,但是,對(duì)成年期雄鼠沒(méi)有什么影響,這些結(jié)果顯示,青春前期DEHP暴露可增加青春期雄性小鼠的社會(huì)交互,卻在高劑量組(200mg/kg/day)減少青春期雌鼠的社會(huì)交互。對(duì)成年期小鼠的影響不大,表現(xiàn)為在1mg/kg/day組抑制雌鼠的社會(huì)交互。5)社會(huì)新奇偏好行為：青春前期DEHP暴露后,與對(duì)照組相比,1-50 mg/kg/day顯著減少青春期雌鼠在右隔間的時(shí)間和與熟悉鼠交流的時(shí)間。在200 mg/kg/day顯著減少青春期雄鼠與陌生鼠交流的時(shí)間(p0.05)。在1和50 mg/kg/day顯著增加了成年期雌鼠在左隔間的時(shí)間(p0.01)和與陌生鼠(p0.01)交流的時(shí)間,但是,DEHP暴露在1 mg/kg/day顯著減少了成年期雄鼠在左隔間的時(shí)間(p0.01)和與陌生鼠交流的時(shí)間(p0.05)。這些結(jié)果表明,青春前期DEHP暴露增加雌鼠的新奇偏好卻抑制雄鼠的社會(huì)新奇偏好。4.進(jìn)一步的Western blot分析顯示,青春前期DEHP暴露后,不同劑量不同程度地顯著下調(diào)了雌雄小鼠在海馬區(qū)和杏仁核區(qū)ERβ的表達(dá)；AR的表達(dá)在青春期雄性小鼠海馬區(qū)和杏仁核區(qū)顯著增加。DEHP暴露對(duì)多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)在海馬區(qū)和杏仁核區(qū)的表達(dá)沒(méi)有顯著影響卻下調(diào)了多巴胺受體D2的表達(dá)。結(jié)論：青春前期DEHP暴露可影響雌雄小鼠青春期和成年期的焦慮和社會(huì)行為,并存在劑量、性別和年齡的差異。不同行為對(duì)DEHP暴露的敏感程度不同,并且情緒變化可能與社會(huì)行為變化有關(guān)。DEHP暴露改變小鼠社會(huì)行為的同時(shí),改變了雌、雄激素受體以及多巴胺受體的表達(dá),推測(cè)DEHP對(duì)社會(huì)行為的影響可能與其干擾性激素及其受體有關(guān),同時(shí),多巴胺神經(jīng)系統(tǒng)也可能參與社會(huì)行為的調(diào)節(jié)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：浙江師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S859.82

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2486414