【摘要】：為提高重組質(zhì)粒的生產(chǎn)效率,利用響應(yīng)面分析中的Plackett-Burman試驗設(shè)計、最陡爬坡試驗和Box-Behnken試驗,對影響該工程菌質(zhì)粒表達的培養(yǎng)基組分進行篩選和優(yōu)化,以確定該工程菌的最佳培養(yǎng)基組分。結(jié)果顯示:蔗糖、硫酸銨分別為最佳碳源、無機氮源;酵母浸粉、蔗糖和(NH4)2SO4最佳質(zhì)量濃度分別為7.50,17.50,7.50g/L。在相同培養(yǎng)條件下,優(yōu)化后培養(yǎng)基質(zhì)粒產(chǎn)量是LB培養(yǎng)基質(zhì)粒產(chǎn)量2倍。使用100L反應(yīng)器高密度培養(yǎng)時利用優(yōu)化的培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)重組大腸桿菌,質(zhì)粒質(zhì)量濃度達到115.25mg/L,比優(yōu)化前提高88.52%,質(zhì)粒各項指標穩(wěn)定,免疫原性優(yōu)良。此試驗數(shù)據(jù)為規(guī)�；a(chǎn)提供參考數(shù)據(jù)。
[Abstract]:In order to improve the production efficiency of recombinant plasmid, the components of culture medium affecting the expression of plasmid were screened and optimized by Plackett-Burman test, steepest climbing test and Box-Behnken test in response surface analysis. In order to determine the optimum medium composition of the engineering bacteria. The results showed that sucrose and ammonium sulfate were the best carbon sources and inorganic nitrogen sources, respectively, and the optimum concentrations of yeast powder, sucrose and (NH4) 2SO4 were 7.50g 路L ~ (- 1), 7.50g 路L ~ (- 1) and 7.50g 路L ~ (- 1), respectively. Under the same culture conditions, the grain yield of the optimized culture medium was twice as much as that of LB culture. The recombinant Escherichia coli was cultured in high density culture medium in 100L reactor. The mass concentration of plasmid reached 115.25mg / L, which was 88.52% higher than that before optimization. The indexes of plasmid were stable and the immunogenicity of recombinant Escherichia coli was excellent. This test data provides reference data for large-scale production.
【作者單位】： 吉林大學動物醫(yī)學學院;天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司;
【基金】：國家國際合作專項(2014DFA31180) 國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(31372463)
【分類號】：S852.61

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本文編號：2483239