【摘要】：為了解第2.3.4.4分支H5亞型高致病性禽流感病毒主要抗原位點,本試驗對A/chicken/Yunnan/1/2014與Re-5的HA1蛋白進行比較,對Re-5母本病毒的差異氨基酸位點進行突變,利用反向遺傳技術(shù)構(gòu)建重組病毒。用Re-5陽性標(biāo)準(zhǔn)血清進行HI試驗,比較重組病毒與Re-5母本病毒的HI滴度,發(fā)現(xiàn)D61N、R69K、S145L、S149A、N171D、R178M、Q185R、K234Q、N256H、A279T、V281M、N289H等12個位點改變后導(dǎo)致HI滴度發(fā)生改變,是第2.3.4.4分支病毒的主要抗原位點。對2010-2012年第2.3.4.4分支的H5亞型高致病性禽流感病毒的HA序列進行分析,與Re5疫苗株HA1序列進行比對,進行點突變構(gòu)建重組病毒,HI試驗表明,Re5-2010、Re5-2011、Re5-2012、yn2014-Re5與Re5HI滴度分別相差了2,3,4,5個滴度,說明隨著時間的推移,病毒變異越來越大�；ハ嗵鎿QRe-5和yn2014的HA1或HA2,發(fā)現(xiàn)Re5-yn2014與Re5、yn2014-Re5與yn2014的HI滴度一致,說明其抗原位點主要在HA1蛋白區(qū)域。這些數(shù)據(jù)為深入了解該分支病毒的變異和對該病毒的防控提供了技術(shù)支持。
[Abstract]:In order to understand the main antigenic sites of highly pathogenic avian influenza virus (H5) in branch 2.3.4.4, the HA1 proteins of A/chicken/Yunnan/1/2014 and Re-5 were compared in this experiment. The differential amino acid sites of Re-5 female parent virus were mutated and the recombinant virus was constructed by reverse genetic technique. The HI titers of recombinant virus and Re-5 female parent virus were compared by HI test with Re-5 positive standard serum. the results showed that D61N, R69K, S145L, S149A, N171D, R178M, Q185R, K234Q, N256H, A279T, V281M, The change of N289H and other 12 loci led to the change of HI titer, which was the main antigenic site of 2.3.4.4 branch virus. The HA sequence of H5 subtype highly pathogenic avian influenza virus in 2.3.4.4 branch from 2010 to 2012 was analyzed and compared with the HA1 sequence of Re5 vaccine strain. The recombinant virus was constructed by point mutation. HI test showed that Re5-2010,Re5-2011, The titers of Re5-2012,yn2014-Re5 and Re5HI were 2, 3 and 4, respectively, indicating that the virus mutated more and more with the passage of time. HA1 or HA2, replacing Re-5 and yn2014 showed that the HI titers of Re5-yn2014 and Re5,yn2014-Re5 were the same as those of yn2014, indicating that the antigenic sites were mainly in the HA1 protein region. These data provide technical support for further understanding the variation of the branch virus and the prevention and control of the virus.
【作者單位】： 中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心;
【基金】：青島市科技計劃項目(14-2-4-105-jch) 科技基礎(chǔ)性工作專項(2012FY111000)
【分類號】：S852.65

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本文編號：2482720