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豬流行性腹瀉病毒間接ELISA檢測(cè)方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2019-05-14 18:20
【摘要】:為建立快速檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的血清學(xué)方法,本研究以原核表達(dá)的豬流行性腹瀉病毒AH2012株N蛋白為包被抗原,通過條件優(yōu)化建立了一種快速的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)方法。利用該ELISA檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒血清時(shí)為陽性,而與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、偽狂犬病病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、口蹄疫病毒,豬圓環(huán)病毒2型、豬呼吸道冠狀病毒的陽性血清均無交叉反應(yīng);批內(nèi)和批間重復(fù)性試驗(yàn)的變異系數(shù)均小于5.55%;該方法與中和試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果總符合率為88.75%。本研究建立的方法可以應(yīng)用于我國(guó)豬流行性腹瀉病毒的診斷、流行病監(jiān)測(cè)以及疫苗研發(fā)時(shí)抗體水平的檢測(cè),為該病的防控提供一種有效的檢測(cè)工具。
[Abstract]:In order to establish a serological method for rapid detection of Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), the N protein of Porcine epidemic diarrhea virus (AH2012) strain expressed in prokaryotic was used as coating antigen. A rapid (ELISA) detection method for indirect enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) was established by optimizing the conditions. The ELISA was positive for the detection of Porcine epidemic diarrhea virus, but was associated with Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus, pseudorabies virus, Porcine Infectious gastroenteritis virus, foot-and-mouth Disease virus and Porcine circovirus Type 2. There was no cross reaction in the positive serum of swine respiratory coronavirus. The coefficient of variation of intra-assay and inter-assay repeatability test was less than 5.55%, and the total coincidence rate between this method and neutralization test was 88.75%. The method established in this study can be applied to the diagnosis, epidemiological surveillance and antibody level detection of swine epidemic diarrhea virus in China, and provides an effective detection tool for the prevention and control of the disease.
【作者單位】: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所;西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【基金】:江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新基金項(xiàng)目[CX(15)1056]
【分類號(hào)】:S852.651

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4 李R,

本文編號(hào):2476939


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