【摘要】：為了構(gòu)建表達(dá)禽流感病毒H9N2亞型血凝素HA2蛋白的延遲裂解型沙門氏菌載體,本試驗(yàn)首先將綠色熒光片段EGFP插入到真核表達(dá)載體p YA4545中,構(gòu)建重組質(zhì)粒p YA4545-EGFP,并轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞系RAW264.7,共聚焦顯微鏡下觀察其表達(dá)情況;再通過PCR技術(shù)擴(kuò)增HA2基因,將其克隆到沙門菌載體p YA4545中,構(gòu)建重組質(zhì)粒p YA4545-HA2,繼而轉(zhuǎn)染HEK-293T細(xì)胞,收集細(xì)胞總蛋白,通過Western-blot檢測(cè)HA2蛋白的表達(dá)情況;最后將重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)到沙門菌宿主χ11218中,檢測(cè)重組菌對(duì)阿拉伯糖的依賴性。結(jié)果,p YA4545真核表達(dá)體系能夠有效表達(dá);重組質(zhì)粒p YA4545-HA2的HA2蛋白成功表達(dá);重組菌對(duì)阿拉伯糖具有明顯依賴性。本試驗(yàn)成功獲得了以延遲裂解型沙門氏菌為載體表達(dá)禽流感病毒HA2蛋白的菌株,為后續(xù)開發(fā)以HA2為目標(biāo)抗原的新型口服疫苗奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院吉林省動(dòng)物微生態(tài)制劑工程研究中心;
【基金】：國(guó)家863計(jì)劃項(xiàng)目(2013AA102806) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272552,31272541,31672528,31602092) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20160519011JH) 吉林省工業(yè)創(chuàng)新特殊項(xiàng)目(2016C063)
【分類號(hào)】：S852.65

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7 周祖華;張敏;程禮明;徐彬;沈彩信;;禽流感流行趨勢(shì)分析[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

8 王志宇;張議文;劉桂林;;禽流感病毒的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2010年

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2 莫書瑩;世衛(wèi)警告：禽流感或大流行全球經(jīng)濟(jì)應(yīng)警惕[N];第一財(cái)經(jīng)日?qǐng)?bào);2005年

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4 本報(bào)記者　許凱;狙擊禽流感：一場(chǎng)鳥與人的戰(zhàn)爭(zhēng)[N];國(guó)際金融報(bào);2005年

5 新華社記者　楊愛國(guó);防控禽流感需要加強(qiáng)國(guó)際合作[N];光明日?qǐng)?bào);2005年

6 李楊;禽流感疫情不會(huì)長(zhǎng)期影響農(nóng)產(chǎn)品期價(jià)[N];金融時(shí)報(bào);2005年

7 羅政、夏文輝;香港強(qiáng)化防止禽流感措施[N];人民日?qǐng)?bào)海外版;2004年

8 本報(bào)記者　張向永　趙秀芹;禽流感讓全世界手牽手[N];市場(chǎng)報(bào);2005年

9 ;禽流感病毒能否絕跡？[N];中國(guó)石油報(bào);2004年

10 何源;嚴(yán)防禽流感從境外傳入我國(guó)[N];中國(guó)食品質(zhì)量報(bào);2005年

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2 趙蔚;基于磁分離和熒光量子點(diǎn)標(biāo)記的高靈敏禽流感病毒檢測(cè)[D];武漢大學(xué);2012年

3 區(qū)嘉賢;H7N9禽流感患者的臨床特征及預(yù)后分析[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 劉三紅;禽流感的數(shù)學(xué)建模及數(shù)值模擬[D];華中師范大學(xué);2015年

5 樊兆斌;野鳥源禽流感病毒(AIV)分離株的遺傳進(jìn)化及其致病性研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2014年

6 桑曉宇;H9N2亞型禽流感病毒在豚鼠模型中水平傳播的分子機(jī)制研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

7 楊文濤;靶向樹突狀細(xì)胞通用型禽流感病毒重組乳酸菌的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 石霖;北方某省主要亞型禽流感現(xiàn)地調(diào)查分析及RT-LAMP檢測(cè)方法研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 張曉劍;HA蛋白糖基化修飾對(duì)H5N1亞型禽流感病毒復(fù)制、致病性和抗原性的影響[D];揚(yáng)州大學(xué);2014年

10 朱聞斐;H7N9禽流感病毒致病與傳播機(jī)制研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2015年

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3 韓苗苗;一類人畜共患的禽流感傳染病傳播模型[D];大連理工大學(xué);2015年

4 王秋珍;H9N2禽流感病毒NS1蛋白誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激促進(jìn)DF-1細(xì)胞凋亡[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

5 梁威;5株H9N2亞型AIV血凝素結(jié)構(gòu)分析及感染A549細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 劉媛媛;MDCK細(xì)胞表達(dá)雞ST3GAL I基因?qū)9亞型禽流感病毒增殖情況的影響[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

7 孟芳;H9N2亞型禽流感HA基因演化及其內(nèi)部基因在H5N2亞型流感病毒演化中的作用[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

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9 查國(guó)飛;昆蟲細(xì)胞表達(dá)重組H5亞型禽流感HA蛋白及其免疫原性研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

10 侯群;新疆青格達(dá)湖濕地鳥類中H5、H7亞型AIV和NDV流行病學(xué)監(jiān)測(cè)[D];石河子大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：2476151