【摘要】：目的:研究新疆肉牛主產(chǎn)區(qū)健康牛群中大腸桿菌O157:H7的攜帶狀況及致病力,分離菌株建立動(dòng)物疾病模型,并用白頭翁湯及郁金散對(duì)其進(jìn)行防治。方法:1、在新疆伊犁地區(qū)、阿勒泰地區(qū)、塔城地區(qū)的牛場(chǎng)采集健康牛的423份新鮮牛糞樣本,增菌后用SMAC平板和MUG實(shí)驗(yàn)進(jìn)行篩選,再用PCR方法和生化試驗(yàn)鑒定;對(duì)分離鑒定到的E.Coli O157:H7用PCR方法檢測(cè)其Stx1、Stx2、eae A、tccp和Hly等基因攜帶情況;用鑒定到的菌株EC肉湯增菌后腹腔注射進(jìn)行動(dòng)物攻毒實(shí)驗(yàn),確定分離菌株的致病性。2、再對(duì)健康昆明系小鼠進(jìn)行分組,分別灌服不同濃度的E.Coli O157:H7菌液,按改良寇氏法計(jì)算出該菌株對(duì)小鼠的LD50,建立動(dòng)物疾病模型。3、對(duì)健康昆明系小鼠隨機(jī)進(jìn)行分組,根據(jù)小鼠的體重按照高、中、低劑量灌服中藥,觀察檢測(cè)小鼠在用藥期間臨床癥狀、脾臟系數(shù)及血清中TNF-α、IL-17水平的變化,從而確立中藥組方的安全性和對(duì)免疫作用的影響。4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染E.Coli O157:H7 12 h后用白頭翁湯、郁金散進(jìn)行治療,從臨床癥狀、脾臟系數(shù)及血清中TNF-α、IL-17水平的變化,分析中藥組方治療動(dòng)物感染E.Coli O157:H7后,其免疫作用以及抑菌和抗炎的作用。結(jié)果:1、新疆伊犁地區(qū)的85份糞樣中鑒定出1株E.coli O157:H7,檢出率為1.176%;而這株菌同時(shí)攜帶被檢測(cè)的5種毒力基因(Stx1、Stx2、eae A、tccp、Hly);新疆塔城與阿勒泰地區(qū)的檢出率為0%。攻毒實(shí)驗(yàn)所有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于24 h內(nèi)全部死亡。2、本實(shí)驗(yàn)成功建立E.coli O157:H7感染的動(dòng)物疾病模型,菌株LD50為1.0×105 cfu/m L。3、動(dòng)物在服用不同濃度的白頭翁湯及郁金散后脾臟系數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);5 d與1 d相比,郁金散低劑量組顯著降低TNF-ɑ的分泌量(P0.05),其余組極顯著地降低(P0.01);白頭翁湯高、低劑量組及郁金散高、中劑量組能顯著地降低IL-17的分泌量(P0.05);其余劑量組則極顯著降低(P0.01)。4、感染E.Coli O157:H7后灌服白頭翁湯、郁金散,5 d與1 d相比,感染小鼠的TNF-ɑ與IL-17均降低到感染前范圍內(nèi)(P0.05)。結(jié)論:新疆伊犁地區(qū)有牛群攜帶致病性大腸桿菌O157:H7,從分離到的菌株對(duì)小白鼠致病性實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),這株菌對(duì)人有很強(qiáng)的潛在致病性,并成功建立動(dòng)物疾病模型。實(shí)驗(yàn)證明白頭翁湯及郁金散無毒副作用,用兩組方進(jìn)行治療,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩組方的常規(guī)劑量組具有降低感染E.Coli O157:H7對(duì)機(jī)體損傷的作用,具有較強(qiáng)的抗炎能力。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S853.31

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本文編號(hào)：2470029