【摘要】:本試驗(yàn)研究全身循環(huán)系統(tǒng)中的基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、集硅酶-1、P38絲裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及一種基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(TIMP-2)在低聚果糖誘導(dǎo)的急性蹄葉炎模型中的濃度變化趨勢(shì),試圖探討其在蹄葉炎發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用,為急性蹄葉炎早期快速診斷及預(yù)警提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。將21匹馬隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(n=12)和對(duì)照組(n=9),把10 g/kg體重的低聚果糖溶解在6 L蒸餾水中,用鼻胃管給試驗(yàn)組的馬灌服,同時(shí),給對(duì)照組灌服6 L蒸餾水。從0 h到72 h期間,每隔四個(gè)小時(shí)用抗凝采血管采集靜脈血5 ml,將收集的血液3 000 r/min離心10分鐘,分離血漿,保存在-80℃。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)量各生物指標(biāo)。每次采血后都對(duì)體況和跛行程度進(jìn)行檢查。在跛行達(dá)到三級(jí)的時(shí)候?qū)μ悴颗臄zX光片。將一匹跛行程度達(dá)到3級(jí)的馬處死,取其蹄部,從蹄部縱軸剖開(kāi),小心去掉其第三指骨,暴露蹄葉層,將蹄葉層小心剝離蹄殼,馬蹄葉層本身大約0.2 cm厚,只需將其切成2.0 cm×2.0 cm的小塊,放入福爾馬林溶液中保存。12匹試驗(yàn)組的馬,有11匹表現(xiàn)出跛行癥狀。對(duì)照組沒(méi)有馬在試驗(yàn)期間表現(xiàn)出跛行。灌服低聚果糖后8-20h,試驗(yàn)組相繼出現(xiàn)一級(jí)跛行癥狀;20-56h期間相繼出現(xiàn)二級(jí)跛行癥狀,個(gè)別表現(xiàn)出三級(jí)跛行的癥狀。另外,體溫最低在0 h,是37.6±0.2℃,最高出現(xiàn)在40 h,是39.3±0.8℃。在二級(jí)跛行出現(xiàn)期間,呼吸率從17.4±1.8次/min增加到25±2.8次/min,同時(shí),心率從49±2.1次/min增加到64±4.2次/min。所有灌服低聚果糖的馬在12-24h期間均相繼出現(xiàn)腹瀉的癥狀,臨床癥狀嚴(yán)重的馬還表現(xiàn)出羞明流淚和明顯的酸中毒癥狀。所有臨床癥狀均在60 h后緩解。實(shí)驗(yàn)組中的MMP-1、MMP-2、MMP-9、集硅酶-1、P38 MAPK和TNF-α均表現(xiàn)為先升高,而TIMP-2則變現(xiàn)出下降的趨勢(shì),各指標(biāo)在68 h后均恢復(fù)到對(duì)照組水平。MMP-1的濃度在12 h開(kāi)始顯著升高,一直持續(xù)到28 h,在24 h出現(xiàn)峰值,峰值為37.96±4.91ng/ml,與對(duì)照組相比差異性顯著(P0.05),在32 h后回落;MMP-2的濃度變化趨勢(shì)整體呈現(xiàn)波浪式,在8 h達(dá)到峰值,為21.44±3.06 ng/ml,且與對(duì)照組相比差異顯著(P0.05);MMP-9的濃度在8 h開(kāi)始顯著升高,持續(xù)到48 h,時(shí)峰值出現(xiàn)在28 h,為199.37±25.39 ng/ml,與對(duì)照組比較差異性顯著(P0.05);TIMP-2的濃度整體呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),從第8 h一直持續(xù)到64 h,并在16 h達(dá)到最低值,36.40±4.53 ng/ml,與對(duì)照組相比差異顯著(P0.05);集硅酶-1的濃度在16 h開(kāi)始顯著升高,持續(xù)到56 h,在48 h出現(xiàn)峰值,峰值為15.11±1.50 ng/ml,與對(duì)照組比較差異性顯著(P0.05);P38 MAPK的濃度變化趨勢(shì)大體上是先升高后降低,從第8 h開(kāi)始升高,一直持續(xù)到68 h,在16 h達(dá)到峰值46.44±10.36 ng/ml,與對(duì)照組比較差異性顯著(P0.05);TNF-α的濃度變化趨勢(shì)僅出現(xiàn)一個(gè)峰,從16 h一直持續(xù)到28 h,在24h處出現(xiàn)峰值150.15±13.19 ng/ml,與對(duì)照組相比差異性顯著(P0.05)。結(jié)果表明,低聚果糖誘導(dǎo)的急性蹄葉炎模型中,血液MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2、集硅酶-1、P38 MAPK和TNF-α的濃度變化趨勢(shì)符合蹄葉炎發(fā)病變化趨勢(shì);MMP-2在低聚果糖誘導(dǎo)的急性蹄葉炎模型中起到重要作用,有潛在診斷價(jià)值;在低聚果糖誘導(dǎo)的急性蹄葉炎模型中,P38 MAPK總體上起到促進(jìn)作用。
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【學(xué)位授予單位】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:S858.21
【共引文獻(xiàn)】
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