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一株裂解性奶牛乳房炎源大腸桿菌噬菌體的分離鑒定及生物學特性分析

發(fā)布時間:2019-01-30 12:48
【摘要】:【目的】從新疆石河子地區(qū)奶牛糞樣中分離裂解性大腸桿菌噬菌體(Escherichia coli phage),對其進行純化及生物學特性分析!痉椒ā坷秒p層平板法從奶牛糞樣中分離、純化噬菌體,將純化后的噬菌體濃縮液用醋酸雙氧鈾負染后通過透射電子顯微鏡觀察其形態(tài)特征。對該噬菌體進行全基因組測序和遺傳進化分析,同時測定噬菌體的宿主譜、最佳感染復數(shù)、一步生長曲線、熱穩(wěn)定性及酸堿穩(wěn)定性!窘Y果】分離并純化出一株裂解性噬菌體vB_EcoM_XJ2,噬菌斑圓形不透明,直徑0.7 mm 1.2 mm;電鏡顯示其頭部呈正多面體對稱,有可伸縮性尾部;核酸類型為雙鏈DNA,基因組大小為75.617 kb,G+C%含量為42.09%;其核酸序列與大腸桿菌噬菌體NJ01和vB_EcoP_SU10相似性高達94%。生物學特性研究顯示該噬菌體能裂解多株臨床分離的大腸桿菌;能耐受60°C左右高溫,在pH 5.0 11.0范圍內(nèi)效價穩(wěn)定;最佳感染復數(shù)為0.1,潛伏期為15 min,暴發(fā)期為95 min,裂解量約為10.6 PFU/cell!窘Y論】vB_EcoM_XJ2是一株在不同溫度、不同酸堿性環(huán)境中有較強適應能力的裂解性肌尾科大腸桿菌噬菌體。
[Abstract]:[objective] to purify lytic Escherichia coli phage (Escherichia coli phage), from cow dung samples in Shihezi area, Xinjiang, and to analyze its biological characteristics. [methods] Phage phage was isolated and purified from cow dung samples by double plate method. The purified bacteriophage concentrate was negatively stained with dioxic uranium acetate and its morphological characteristics were observed by transmission electron microscope (TEM). The whole genome of the phage was sequenced and the genetic evolution was analyzed. At the same time, the host spectrum of the phage was determined. Thermal stability and acid-base stability. [results] A lytic bacteriophage vB_EcoM_XJ2, phagocytic plaque was isolated and purified with circular opacity with a diameter of 0.7 mm / 1. 2 mm;. Electron microscope showed that its head was regular polyhedron and had scalable tail, and the nucleic acid type was 75.617 kb,G C% of double-stranded DNA, genome, and 42.09% of nucleic acid. The nucleic acid sequence was similar to that of Escherichia coli phage NJ01 and vB_EcoP_SU10. The biological characteristics of the bacteriophage showed that the bacteriophage could cleavage many clinical isolates of Escherichia coli, and could withstand high temperature of about 60 擄C, and its titer was stable in the range of pH 5.0 ~ 11.0. The best complex number of infection was 0.1, the incubation period was 15 min, and the 95 min, cleavage was about 10.6 PFU/cell. [conclusion] vB_EcoM_XJ2 was a strain at different temperatures. Lytic Escherichia coli phage with strong adaptive ability in different acid-base environments.
【作者單位】: 石河子大學動物科技學院;軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所;新疆生產(chǎn)建設兵團畜牧獸醫(yī)工作總站;
【基金】:國家自然科學基金項目(No.31560699) 新疆生產(chǎn)建設兵團應用基礎研究計劃項目(No.2015AG012)~~
【分類號】:S852.6

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