【摘要】：為向雞球蟲病三價四株活疫苗臨床試驗(yàn)提供依據(jù),依照《獸用生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)匯編》和農(nóng)業(yè)部第683公告《獸用生物制品試驗(yàn)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,以血便記分、死亡率、相對增重率(RWG)、腸道平均病變記分和病變記分減少率(RLS)為指標(biāo),進(jìn)行了檢驗(yàn)用混合強(qiáng)毒株攻毒劑量測定、疫苗組方試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)室效力測定、實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)等基礎(chǔ)性研究。結(jié)果表明：1.向14日齡SPF雞攻擊混合強(qiáng)毒株。結(jié)果表明,使用劑量為：E. acervulina (ASX)20.00＝104個/只、E. maxima (MSX/MSD各15.00x104個/只、E.tenella (TSX) 4.00×104個/只時,死亡率≥40.00%,十二指腸、空腸和盲腸的平均病變記分分別≥3.00、2.00和3.00,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中對攻毒組的要求。2.采用正交試驗(yàn)設(shè)計疫苗組方,于4、14日齡對SPF雛雞進(jìn)行一、二次免疫,二免后第14天攻毒。結(jié)果表明,隨著免疫劑量水平的提高,免疫攻毒組的RWG. RLS和卵囊抑制率增加,腸道平均病變記分降低。E. acervulina(PAsx)、E. maxima(PMSX/PMSD)和E. tenella (PTSX)的一免劑量分別≥400.00、100.00、100.00和1000.00個/只；二免劑量分別≥800.00、200.00、200.00和2000.00個/只時,免疫攻毒組的死亡率≤10.00%、相對增重率≥80%、RLS≥70.00%、卵囊減少率≥75.00%、三個腸段的平均病變記分均≤1.50,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。因此,最小免疫劑量：E. acervulina (PASX)、E. maxima (PMsx/PMSD)和E. tenella (PTSX)的一免劑量分別為400.00、100.00、100.00和1000.00個/只；二免劑量分別為800.00、200.00、200.00和2000.00個/只。推薦免疫劑量：Eacervulina (PASX)、E. maxima (PMSX/PMSD)和E. tenella (PTSX)的一免劑量分別為600.00、150.00、150.00和1500.00個/只；二免劑量分別為1200.00、300.00、300.00和3000.00 個/只。3.以最小免疫劑量,分別對2-5日齡的SPF雛雞首免,10d后二免,二免后第14天攻毒。隨著首免日齡的增大,免疫攻毒組的RWG和RLS升高,腸道平均病變記分降低。4日齡及以上首免的雛雞,攻毒后無死亡,三個腸段的平均病變記分均≤1.50,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。因此推薦4日齡為最小首免日齡。4.對4日齡SPF雛雞以最小免疫劑量首免,分別間隔7-11d二免,二免后第14天攻毒。隨著二免間隔期的延長,免疫攻毒組的RWG和RLS升高,腸道平均病變記分下降。所有免疫雛雞,攻毒后無死亡,三個腸段的平均病變記分均≤1.50,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。表明,最小二免間隔可定為7d。5.以最小免疫劑量首免后第10天和第14天分別對SPF雛雞攻毒,免疫攻毒組的死亡率≥20.00%,盲腸平均病變記分≥2.00,表明一次免疫后雛雞產(chǎn)生部分免疫力。于4、14日齡對SPF雛雞分別一、二次免疫,二免后第6、10、14、28、42和56天攻毒。免疫效力在二免后第14天到達(dá)最高峰,之后隨著免疫持續(xù)期的延長逐漸降低；但是各免疫攻毒組的死亡率均≤10.00%,三個腸段的平均病變記分均≤1.50,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。表明免疫產(chǎn)生期為二免后的第6天,免疫持續(xù)期可至二免后第56天。6.以推薦免疫劑量,分別于4和14目齡對網(wǎng)上和地面平養(yǎng)的雛雞一、二次免疫,二免后第14天攻毒。免疫攻毒組雞只無死亡,三個腸段的平均病變記分均≤1.50,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)；免疫期間(二次免疫后14d),網(wǎng)上平養(yǎng)和地面平養(yǎng)的平均增重差異不顯著(P≥0.05)。表明網(wǎng)上平養(yǎng)和地面平養(yǎng)對免疫效力和雞群的增重?zé)o明顯影響。7.分別以一次單劑量、單劑量重復(fù)和一次超劑量(20倍)接種雛雞,接種組死亡率為0.00%,三個腸段的平均病變記分均≤1.00；對免疫雛雞進(jìn)行增重檢測,免疫組與空白組相比,平均增重?zé)o顯著差異(P≥0.05),說明該疫苗的安全性符合獸用生物制品的要求。8.在保存期內(nèi)(10個月),該疫苗的性狀無變化。分別于不同的保存期(2、3、6和10個月)對4和14日齡雛雞一、二次免疫,二免后第14天攻毒。隨著保存時間的延長,免疫雛雞的RWG和RLS降低,腸道平均病變記分升高；但是各免疫攻毒組死亡率均為0.00%,三個腸段的平均病變記分均≤1.50,符合效力檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明在避光、2～8℃的2.5%的重鉻酸鉀溶液中,該疫苗的保存期為可達(dá)10個月。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S858.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2410022