【摘要】：為建立一種敏感、快速的羊泰勒蟲檢測方法,本研究根據(jù)GenBank中登錄的羊泰勒蟲18S rRNA保守區(qū)設計1對特異引物,經(jīng)各反應條件的優(yōu)化,建立了羊泰勒蟲熒光定量PCR檢測方法。結(jié)果顯示該方法可以特異地檢測羊泰勒蟲,而對卵形巴貝斯蟲、雙芽巴貝斯蟲、羊巴貝斯蟲和瑟氏泰勒蟲檢測均為陰性;該方法的靈敏度可達2.08×10~1拷貝/μL,比普通PCR靈敏度高100倍。組內(nèi)及組間重復試驗變異系數(shù)均小于5%。對50份臨床樣品進行檢測,熒光定量PCR和常規(guī)PCR的陽性檢出率分別為48%和38%。本實驗建立的熒光定量PCR檢測方法適用于羊泰勒蟲定量分析和分子流行病學調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a sensitive and rapid detection method for Taylor's worm, a pair of specific primers were designed according to the 18s rRNA conservative region registered in GenBank, and a fluorescent quantitative PCR method was established for the detection of Taylor's sheep by optimizing the reaction conditions. The results showed that the method could be used to detect Taylor's worm specifically, but negative for Babes ovale, Babes double bud, Babes sheep and Taylor serovar. The sensitivity of this method can reach 2.08 脳 10 ~ (-1) copy / 渭 L, which is 100 times higher than that of ordinary PCR. The coefficient of variation of repeated tests within and between groups was less than 5. The positive rates of fluorescence quantitative PCR and routine PCR were 48% and 38% respectively. The fluorescent quantitative PCR method developed in this study is suitable for quantitative analysis and molecular epidemiological investigation of Taylor's insect in sheep.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)科技學院動物科技學院;預防獸醫(yī)學吉林省重點實驗室;延邊大學農(nóng)學院;
【基金】：吉林省科技發(fā)展計劃項目(20150623004TC) 吉林省重點學科培育項目(吉農(nóng)院合字[2015]第x030號) 吉林農(nóng)業(yè)科技學院種子基金項目(吉農(nóng)院合字[2014]第Z07號)
【分類號】：S852.7

【參考文獻】

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本文編號：2354965