發(fā)布時(shí)間：2018-11-22 16:11

【摘要】：為探討脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)對(duì)動(dòng)物免疫功能的影響及其機(jī)理,以細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞株CTLL-2為材料,用不同濃度的DON(0、0.5、1、2μg/m L)處理CTLL-2細(xì)胞48h,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡率,免疫印記法檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)通路蛋白CleavedCaspase 9、Cleaved-Caspase 3、Fas L、Fas、Cleaved-Caspase8等表達(dá)情況;并用流式細(xì)胞術(shù)檢測了DON(1μg/m L)與Fas L中和抗體(10μg/m L)共處理后細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果表明,隨著DON濃度的升高,CTLL-2細(xì)胞的凋亡率呈上升趨勢,染毒組均較對(duì)照組有極顯著差異(P0.01);Bax/Bcl-2的比值升高,呈劑量-效應(yīng)關(guān)系;DON促進(jìn)細(xì)胞色素c(Cyt-c)從線粒體中釋放到胞漿中,能夠上調(diào)Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3的表達(dá),染毒組均較對(duì)照組有顯著性或極顯著差異(P0.05或P0.01);Fas L、Fas、Cleaved-Caspase 8蛋白表達(dá)量隨著DON濃度的升高逐漸增加,染毒組均較對(duì)照組有顯著性或極顯著差異(P0.05或P0.01);隨著DON濃度的升高,p38 MAPK、JNK、Erk的磷酸化水平也升高,呈劑量-效應(yīng)關(guān)系;與DON處理組相比,Fas L中和抗體與DON共同處理組細(xì)胞凋亡率明顯下降(P0.01)。結(jié)果表明,DON可以誘導(dǎo)CTLL-2細(xì)胞發(fā)生凋亡,激活CTLL-2細(xì)胞線粒體通路、MAPKs通路,DON通過死亡受體途徑誘導(dǎo)CTLL-2細(xì)胞凋亡,影響動(dòng)物的免疫機(jī)能。
[Abstract]:In order to investigate the effect of deoxynivalenol (deoxynivalenol,DON) on animal immune function and its mechanism, CTLL-2 cells were treated with different concentrations of DON (0. 5% 1 渭 g / mL) for 48 h with cytotoxic T lymphocyte line CTLL-2. The apoptosis rate was detected by flow cytometry, and the expression of Cleaved-Caspase8 was detected by immunoblotting, and the expression of Cleaved-Caspase8 was detected by CleavedCaspase _ 9 Cleaved-Caspase3, and the expression of Cleaved-Caspase8 was detected by flow cytometry. The apoptosis rate of DON (1 渭 g / mL) co-treated with Fas L neutralizing antibody (10 渭 g / mL) was determined by flow cytometry. The results showed that the apoptotic rate of CTLL-2 cells increased with the increase of DON concentration, and the ratio of Bax/Bcl-2 increased in a dose-effect relationship between the exposed group and the control group (P0.01). DON promoted the release of cytochrome c (Cyt-c) from mitochondria to cytoplasm and up-regulated the expression of Cleaved-Caspase 9 Cleaved-Caspase 3, which was significantly or extremely different from that of control group (P0.05 or P0.01). The expression of Cleaved-Caspase 8 protein increased with the increase of DON concentration, and the expression of Cleaved-Caspase 8 protein in the exposed group was significantly higher than that in the control group (P0.05 or P0.01). With the increase of DON concentration, the phosphorylation level of p38 MAPK,JNK,Erk increased in a dose-effect relationship, and the apoptosis rate of, Fas L neutralizing antibody and DON co-treated with DON decreased significantly (P0.01). The results showed that DON could induce apoptosis of CTLL-2 cells, activate mitochondrial pathway and MAPKs pathway of CTLL-2 cells, and DON could induce apoptosis of CTLL-2 cells through death receptor pathway, which affected the immune function of animals.
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：江蘇省大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201511117043Z) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目(PAPD) 江蘇省普通高校自然科學(xué)基金(08KJD230002)
【分類號(hào)】：S859.8

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本文編號(hào)：2349849