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雞煙曲霉菌SYBR GreenⅠ熒光定量PCR檢測方法的建立

發(fā)布時間:2018-11-19 20:39
【摘要】:為建立雞煙曲霉菌快速檢測方法,根據GenBank已發(fā)表的benAfum基因序列設計1對特異性引物,建立了檢測煙曲霉菌的SYBR GreenⅠ實時熒光定量PCR方法,并用該方法對煙曲霉菌分離株進行了檢測。結果顯示,該方法靈敏度高,對煙曲霉菌最低檢出量為10 copies/L;重復性好,變異系數在0.7%~0.8%之間;特異性強,與黃曲霉、土曲霉、黑曲霉、塔賓曲霉及白色念珠菌等病原菌無交叉反應;該方法操作簡單、耗時短,只需2 h即可完成整個試驗過程。上述結果表明,該方法可應用于煙曲霉菌感染的快速檢測。
[Abstract]:In order to establish a rapid detection method for Aspergillus fumigatus, a pair of specific primers were designed according to the published benAfum gene sequence of GenBank, and a real-time fluorescent quantitative PCR method for detecting Aspergillus fumigatus was established. The method was used to detect aspergillus fumigatus isolates. The results showed that the method had high sensitivity and good reproducibility for aspergillus fumigatus for 10 copies/L;, and the coefficient of variation was between 0.7% and 0.8%. There was no cross reaction with Aspergillus flavus, Aspergillus earth, Aspergillus Niger, Aspergillus Tabin and Candida albicans. The results show that this method can be used for rapid detection of aspergillus fumigatus infection.
【作者單位】: 河北工程大學農學院;河北省禽病工程研究中心;
【基金】:河北省科技廳項目(2016D15201)
【分類號】:S852.65

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本文編號:2343366

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