【摘要】：目的鑒定雞胚成纖維(CEF)細胞膜禽多殺性巴氏桿菌外膜蛋白H(OmpH)受體。方法用膜蛋白提取試劑盒制備CEF細胞的膜蛋白,通過SDS-PAGE和配體印跡檢測CEF細胞膜蛋白中的OmpH受體,采用MALDI-TOF質譜技術鑒定蛋白種類,并用配體印跡、ELISA和免疫熒光技術檢測OmpH受體在不同宿主食管黏膜細胞表面的分布情況。結果在轉印CEF細胞膜蛋白的NC膜上有一條明顯的疑似受體條帶,分子量約為49kDa。MALDI-TOF質譜鑒定結果表明該受體蛋白是ATP合成酶β亞基。在轉印雞和兔食管黏膜細胞膜蛋白的NC膜上檢測到能夠與OmpH結合的蛋白條帶,但在牛和豬食管黏膜細胞膜蛋白中未見任何印跡條帶,而OmpH與雞和兔食管黏膜細胞膜蛋白的結合力高于豬和牛食管黏膜細胞膜蛋白。結論禽多殺性巴氏桿菌OmpH受體可能是CEF細胞膜表面的ATP合成酶β亞基。
[Abstract]:Objective to identify the H (OmpH) receptor of outer membrane protein of chicken embryo fibroblast (CEF) cell membrane of Pasteurella multocida (Pasteurella multocida). Methods the membrane proteins of CEF cells were prepared by membrane protein extraction kit. The OmpH receptors in CEF cell membrane proteins were detected by SDS-PAGE and ligand blotting. The proteins were identified by MALDI-TOF mass spectrometry and ligand blotting. ELISA and immunofluorescence techniques were used to detect the distribution of OmpH receptors on the surface of esophageal mucosal cells in different hosts. Results there was an obvious suspected receptor band on the NC membrane of CEF cell membrane protein. The molecular weight of the receptor protein was identified by 49kDa.MALDI-TOF mass spectrometry. The result showed that the receptor protein was a 尾 subunit of ATP synthase. On the NC membrane of the esophageal mucosal membrane proteins of chickens and rabbits, the protein bands that could bind to OmpH were detected, but no imprinted bands were found in the membrane proteins of bovine and pig esophagus mucosa. The binding ability of OmpH to esophageal membrane protein of chicken and rabbit was higher than that of porcine and bovine esophageal mucosal membrane protein. Conclusion the OmpH receptor of Pasteurella multocida may be a ATP synthase 尾 subunit on the surface of CEF cell membrane.
【作者單位】： 伊犁師范學院生物與地理科學學院;吉首大學生物資源與環(huán)境科學學院;中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所;
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31360613)資助~~
【分類號】：S852.61

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王遠志;陳創(chuàng)夫;崔步云;曹旭東;張輝;;綿羊附睪種布魯氏菌019株外膜蛋白基因序列比較研究[J];疾病監(jiān)測;2010年09期

2 駱延波;劉霞;黃迪海;張從敬;劉曉飛;張華;徐秀榮;張再輝;;豬胸膜肺炎放線桿菌外膜蛋白型的研究[J];山東農業(yè)科學;2011年03期

3 張春華,叢顯斌,王忠惠,浦清江,呂景生,張貴彬;中國鼠疫菌外膜蛋白種類的研究[J];中國地方病防治雜志;2003年05期

4 蔡芙蓉;高媛媛;舒正玉;李力;黃建忠;;洋蔥伯克霍爾德菌外膜蛋白雙向電泳的建立與優(yōu)化[J];生物技術;2010年05期

5 秦風彥;劉燕;韋強;肖琛聞;鮑國連;季權安;姚火春;;支氣管敗血波氏桿菌外膜蛋白雙向電泳圖譜的建立[J];中國預防獸醫(yī)學報;2012年10期

6 楊磊;張建坡;王相國;許勤;靳亞平;王愛華;;布魯菌外膜蛋白16純化方法的改進[J];動物醫(yī)學進展;2013年12期

7 劉燕;韋強;鮑國連;季權安;;鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白生物學特性研究[J];生物工程學報;2008年04期

8 夏金蘭;歐陽敘東;張成桂;彭安安;王晶;;大腸桿菌外膜蛋白的分離及其雙向電泳圖譜的建立[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2009年02期

9 付景麗;董炳梅;王若;王家鑫;;布魯菌外膜蛋白的糖基化及免疫效果檢測[J];中國獸醫(yī)雜志;2011年04期

10 張斌;湯承;岳華;;副豬嗜血桿菌主要外膜蛋白基因研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2013年01期

相關會議論文 前10條

1 李曉霞;柴同杰;;腸致病性大腸桿菌外膜蛋白免疫保護性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2006學術年會論文集（下冊）[C];2006年

2 朱德康;程安春;汪銘書;;五種血清型的鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白特性比較及其免疫原性的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物微生態(tài)學分會第三屆第七次學術研討會論文集[C];2004年

3 劉曉丹;曹三杰;馮峰;黃小波;文心田;;羊目無膽甾原體外膜蛋白研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2009學術年會論文集（下冊）[C];2009年

4 高明燕;徐步;龔建森;范建華;呂曉娟;劉學賢;胡茂志;;禽多殺性巴氏桿菌血清型與外膜蛋白型相關性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十五次學術研討會論文集[C];2010年

5 張振華;程安春;汪銘書;;沙門氏菌外膜蛋白分子免疫學研究進展[A];第四屆第九次全國學術研討會暨飼料和動物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（下冊）[C];2008年

6 郭曉雅;史皆然;邵成;師長宏;趙勇;吳昌歸;;沙門菌外膜蛋白D的原核表達及多克隆抗體的制備[A];中華醫(yī)學會第七屆全國哮喘學術會議暨中國哮喘聯(lián)盟第三次大會論文匯編[C];2010年

7 邱薇;孟佩云;尹惠瓊;范泉水;李剛山;劉燕;王維祥;王雙印;;三株鉤端螺旋體外膜蛋白基因的比較[A];中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)犬學分會第十二次全國養(yǎng)犬學術研討會論文集[C];2007年

8 胡娟;李能章;周偉;夏天;彭遠義;;牛支原體外膜蛋白的提取及其免疫活性分析[A];中國奶業(yè)協(xié)會第26次繁殖學術年會暨國家肉牛牦牛/奶牛產業(yè)技術體系第3屆全國牛病防治學術研討會論文集[C];2011年

9 王斐;曹永國;丁壯;;鉤端螺旋體外膜蛋白的研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學術研討會論文集[C];2013年

10 黃琴;李梅;胡春霞;李衛(wèi)芬;;乳酸乳球菌為活載體的魚類口服外膜蛋白疫苗的研究[A];第四屆第九次全國學術研討會暨飼料和動物源食品安全戰(zhàn)略論壇論文集（上冊）[C];2008年

相關博士學位論文 前3條

1 毛芝娟;副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus主要外膜蛋白的克隆、表達和免疫原性研究[D];浙江大學;2007年

2 鄒凌云;外膜蛋白序列和結構辨識相關問題研究[D];國防科學技術大學;2008年

3 惠長野;大腸桿菌K1致病株外膜蛋白T毒力相關功能研究[D];南方醫(yī)科大學;2010年

相關碩士學位論文 前10條

1 歐陽敘東;嗜酸氧化亞鐵硫桿菌外膜蛋白的快速有效分離及雙向電泳圖譜的建立[D];中南大學;2008年

2 謝碧林;豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌外膜蛋白的克隆表達及其免疫原性分析[D];南京農業(yè)大學;2008年

3 顏艷;鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白的蛋白質組學分析及其免疫保護性研究[D];南京農業(yè)大學;2009年

4 劉兆宇;鴨疫里默氏桿菌不同血清型的外膜蛋白特性比較及免疫原性的研究[D];四川農業(yè)大學;2002年

5 朱德康;五種血清型的鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白特性比較及其免疫原性的研究[D];四川農業(yè)大學;2003年

6 劉曉丹;目無膽甾原體分離鑒定及其外膜蛋白研究[D];四川農業(yè)大學;2009年

7 張振華;鴨致病性腸炎沙門氏菌外膜蛋白組成及免疫原性研究[D];四川農業(yè)大學;2008年

8 劉霜;海水魚類主要病原弧菌致病性及外膜蛋白研究[D];中國海洋大學;2003年

9 方夏云;副豬嗜血桿菌不同血清型外膜蛋白的免疫原性的研究[D];四川農業(yè)大學;2009年

10 魚艷榮;表達兩種不同外膜蛋白的禽大腸桿菌融合株的構建及初步應用[D];西北農林科技大學;2001年

，

本文編號：2306132