【摘要】：目的鑒定雞胚成纖維(CEF)細(xì)胞膜禽多殺性巴氏桿菌外膜蛋白H(OmpH)受體。方法用膜蛋白提取試劑盒制備CEF細(xì)胞的膜蛋白,通過SDS-PAGE和配體印跡檢測CEF細(xì)胞膜蛋白中的OmpH受體,采用MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)鑒定蛋白種類,并用配體印跡、ELISA和免疫熒光技術(shù)檢測OmpH受體在不同宿主食管黏膜細(xì)胞表面的分布情況。結(jié)果在轉(zhuǎn)印CEF細(xì)胞膜蛋白的NC膜上有一條明顯的疑似受體條帶,分子量約為49kDa。MALDI-TOF質(zhì)譜鑒定結(jié)果表明該受體蛋白是ATP合成酶β亞基。在轉(zhuǎn)印雞和兔食管黏膜細(xì)胞膜蛋白的NC膜上檢測到能夠與OmpH結(jié)合的蛋白條帶,但在牛和豬食管黏膜細(xì)胞膜蛋白中未見任何印跡條帶,而OmpH與雞和兔食管黏膜細(xì)胞膜蛋白的結(jié)合力高于豬和牛食管黏膜細(xì)胞膜蛋白。結(jié)論禽多殺性巴氏桿菌OmpH受體可能是CEF細(xì)胞膜表面的ATP合成酶β亞基。
[Abstract]:Objective to identify the H (OmpH) receptor of outer membrane protein of chicken embryo fibroblast (CEF) cell membrane of Pasteurella multocida (Pasteurella multocida). Methods the membrane proteins of CEF cells were prepared by membrane protein extraction kit. The OmpH receptors in CEF cell membrane proteins were detected by SDS-PAGE and ligand blotting. The proteins were identified by MALDI-TOF mass spectrometry and ligand blotting. ELISA and immunofluorescence techniques were used to detect the distribution of OmpH receptors on the surface of esophageal mucosal cells in different hosts. Results there was an obvious suspected receptor band on the NC membrane of CEF cell membrane protein. The molecular weight of the receptor protein was identified by 49kDa.MALDI-TOF mass spectrometry. The result showed that the receptor protein was a 尾 subunit of ATP synthase. On the NC membrane of the esophageal mucosal membrane proteins of chickens and rabbits, the protein bands that could bind to OmpH were detected, but no imprinted bands were found in the membrane proteins of bovine and pig esophagus mucosa. The binding ability of OmpH to esophageal membrane protein of chicken and rabbit was higher than that of porcine and bovine esophageal mucosal membrane protein. Conclusion the OmpH receptor of Pasteurella multocida may be a ATP synthase 尾 subunit on the surface of CEF cell membrane.
【作者單位】： 伊犁師范學(xué)院生物與地理科學(xué)學(xué)院;吉首大學(xué)生物資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院;中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31360613)資助~~
【分類號】：S852.61

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本文編號：2306132