【摘要】:彎曲菌(Campylobacter)和沙門菌(Salmonella)是全球范圍內(nèi)重要的人獸共患病原菌,廣泛存在于人類、寵物、畜禽和各種食品原料等,對(duì)人類健康造成巨大危害。而與寵物的親密接觸被認(rèn)為是人類感染彎曲菌和沙門菌的重要來源。因此,加強(qiáng)對(duì)寵物群體彎曲菌和沙門菌的監(jiān)測和預(yù)防,明晰不同源菌株間的傳播途徑,對(duì)于人彎曲菌病和沙門菌病的防控有重要意義。本研究的主要目的為:(1)調(diào)查揚(yáng)州市寵物以及人源、禽源的彎曲菌和沙門菌的分布狀況和流行特點(diǎn),并追蹤調(diào)查部分寵物家庭,探究寵物家庭中彎曲菌和沙門菌在人和寵物間的流行。(2)對(duì)不同來源分離株進(jìn)行MLST分型研究,分析寵物與其它來源彎曲菌和沙門菌的分布特征,明晰不同宿主間的傳播規(guī)律,并結(jié)合PubMLST數(shù)據(jù)庫中國際菌株的資料,比較國內(nèi)外彎曲菌主要流行的克隆群。一、揚(yáng)州市寵物及其它來源彎曲菌和沙門菌的流行病學(xué)調(diào)查自2015年7月至2016年9月期間,于揚(yáng)州某動(dòng)物醫(yī)院隨機(jī)采集就診寵物直腸棉拭子607份,采集病禽的肝、腸樣品97份;于揚(yáng)州市A醫(yī)院收集腹瀉人群送檢糞便樣品204份;于活禽市場和3個(gè)主要的農(nóng)貿(mào)市場等采集活禽泄殖腔棉拭子樣品、肉雞胴體表面擦拭樣品和環(huán)境樣品共354份;追蹤25戶寵物家庭,采集寵物、人及環(huán)境樣品共333份。參照國標(biāo)方法,對(duì)上述1595份樣品進(jìn)行空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌,以及沙門菌的檢測和分離鑒定。彎曲菌檢測結(jié)果顯示,動(dòng)物醫(yī)院采集的寵物樣品中分離到25株空腸彎曲菌和8株結(jié)腸彎曲菌,陽性率分別為4.1%和1.3%;分類統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,本研究中臨床表現(xiàn)腹瀉癥狀的寵物彎曲菌陽性率顯著高于無腹瀉癥狀的寵物(P0.05);幼年寵物(1歲以下)彎曲菌檢出率顯著高于成年寵物(P0.05);而不同性別的寵物間的彎曲菌檢出率無明顯差異(P0.05)。醫(yī)院腹瀉人群樣品中分離到空腸彎曲菌11株,陽性率為5.4%;結(jié)腸彎曲菌5株,陽性率為2.5%。禽源樣品中,采集于動(dòng)物醫(yī)院畜禽門診的病禽內(nèi)臟樣品中共分離到16株空腸彎曲菌和29株結(jié)腸彎曲菌,陽性率分別為16.5%和29.9%,其中10份樣品為空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌混合感染,混合感染的比例為10.3%;采集于活禽市場的活禽肛拭樣品中共分離到23株空腸彎曲菌和13株結(jié)腸彎曲菌,陽性率分別為15.6%和8.8%,未發(fā)現(xiàn)混合感染現(xiàn)象;采集于農(nóng)貿(mào)市場的肉雞胴體表面擦拭樣品中共分離到37株空腸彎曲菌和48份結(jié)腸彎曲菌,陽性率分別為34.6%和44.8%,其中21份樣品為空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌混合感染,混合感染比例為19.6%。沙門菌檢測結(jié)果顯示,動(dòng)物醫(yī)院寵物樣品中共分離到15株沙門菌,陽性率為2.5%;其中503份犬肛拭樣中,13株為沙門菌陽性,陽性率為2.6%;104份貓肛拭樣中,分離到2株沙門菌,陽性率為1.9%。醫(yī)院腹瀉人群樣品中共分離到11株沙門菌,陽性率為5.4%;分類統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示女性的沙門菌陽性率高于男性,但差異不顯著(P0.05);年齡為14歲以下人群彎曲菌平均陽性率顯著高于14歲以上人群(P0.05)。采集于畜禽門診、活禽市場及農(nóng)貿(mào)市場中共計(jì)451份禽源樣品中共檢出31份沙門菌陽性,平均陽性率為6.9%。沙門菌血清型鑒定結(jié)果顯示,寵物源沙門菌分離株所包含血清型種類最多,且分布較為分散,包括鼠傷寒、腸炎、德爾卑、倫敦沙門菌等國內(nèi)常見的血清型,以及菲爾摩雷、因切帕克、達(dá)布沙門菌等國內(nèi)罕見的血清型,不同來源分離株中優(yōu)勢血清型有所不同,但部分血清型呈交叉分布。25戶寵物家庭中彎曲菌和沙門菌流行追蹤調(diào)查,共檢出彎曲菌陽性和沙門菌陽性的家庭各3戶。其中一戶寵物犬檢出為結(jié)腸彎曲菌陽性的家庭中,同時(shí)在該犬經(jīng);顒(dòng)的草地所采集的土壤樣品中也檢出結(jié)腸彎曲菌陽性。此外,1位臨床表現(xiàn)健康的寵物飼養(yǎng)者被檢出為空腸彎曲菌和鼠傷寒沙門菌混合感染。本研究所采集的共計(jì)1595份不同來源樣品中,共有5份樣品出現(xiàn)沙門菌和彎曲菌混合感染的現(xiàn)象,混合感染的比例為0.31%。結(jié)果顯示存在彎曲菌和沙門菌共感染的情況,但共感染比例不高。二、基于MLST的不同源彎曲菌和沙門菌分離株流行特征分析為了進(jìn)一步分析寵物與其它來源彎曲菌和沙門菌的流行特征,明晰寵物家庭中彎曲菌和沙門菌可能的傳播途徑,本研究選取7對(duì)管家基因aspA、glnA、gltA、glyA、pgm、tkt和uncA,對(duì)來自寵物源、人源和禽源的195株彎曲菌分離株進(jìn)行MLST分型研究;選取7對(duì)管家基因aroC、dnaN、hemD、hisD、purE、sucA、thrA,對(duì)64株沙門菌分離株進(jìn)行MLST分型研究。彎曲菌MLST分型結(jié)果顯示,195株彎曲菌分離株分屬于21種同源復(fù)合體和獨(dú)特型,共包含107種ST型。其中共出現(xiàn)16種新序列型,包含空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌各9株。具有同源復(fù)合體的細(xì)菌占總細(xì)菌的85.6%,屬于獨(dú)特型的細(xì)菌占總細(xì)菌的14.4%。空腸彎曲菌的優(yōu)勢ST型為ST-5,優(yōu)勢同源復(fù)合體為ST-353,結(jié)腸彎曲菌的優(yōu)勢ST型為ST-830,屬于ST-828同源復(fù)合體的分離株占結(jié)腸彎曲菌總數(shù)的92.6%。寵物源彎曲菌分離株共46株,被分為28種ST型,分屬于11種同源復(fù)合體和獨(dú)特型。三種來源菌株的優(yōu)勢同源復(fù)合體具有一致性,包含兩種及兩種以上來源菌株的同源復(fù)合體有11種,其中10種均含有寵物源菌株,寵物源彎曲菌與其它來源分離株所屬主要同源復(fù)合體相似,表明寵物與其它來源的彎曲菌密切相關(guān),寵物和禽肉食品源彎曲菌是人彎曲菌感染的主要來源之一。對(duì)彎曲菌陽性養(yǎng)寵家庭分離株的MLST分型結(jié)果顯示,B家庭中從寵物犬和草地土壤分離到的結(jié)腸彎曲菌均屬于序列型ST-830,犬源分離株與環(huán)境樣品分離株關(guān)系密切。結(jié)果表明,在一個(gè)家庭中,寵物犬感染彎曲菌后,可隨糞便排出至環(huán)境中,從而引起人的感染。將本研究中寵物源空腸彎曲菌MLST分型結(jié)果與PubMLST數(shù)據(jù)庫中選取的130株空腸彎曲菌國際菌株分型結(jié)果進(jìn)行比較,結(jié)果表明本研究寵物源彎曲菌分型所獲得的同源復(fù)合體與數(shù)據(jù)庫中常見的同源復(fù)合體基本相同,但其中僅有4種序列型與選取的國際菌株所屬序列型相同,即ST-22,ST-45,ST-48和ST-13,其余序列型均不同,表明空腸彎曲菌的分布還具有地域性特征。對(duì)不同年份寵物源彎曲菌STs的分布情況進(jìn)行分析,研究發(fā)現(xiàn),不同年份間彎曲菌分離株中優(yōu)勢ST型有所不同,年份相差越遠(yuǎn),屬于同一 ST型分離株越少。沙門菌MLST結(jié)果顯示,64株不同來源沙門菌分成了 21種不同的ST型,其中包含分離株數(shù)量最多的ST型為ST 314,占總數(shù)的28.1%。其余主要的ST型為ST 292(12.5%)、ST 34(12.5%)和ST 155(6.3%),其他ST型呈散在零星分布。不同來源沙門菌的ST型與血清型之間存在著密切的對(duì)應(yīng)關(guān)系,大部分的血清型與ST型間存在著一一對(duì)應(yīng)的關(guān)系。三種來源菌株中存在部分ST型呈交叉分布,如ST14,ST34,和ST155。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:S855.1
【參考文獻(xiàn)】
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