發(fā)布時間：2018-10-16 11:32

【摘要】：Nesfatin-1為一種源于核組蛋白2(NucleobindinⅡ,NUCB2)的厭食肽,廣泛的分布于中樞及外周器官。研究表明,Nesfatin-1對攝食、心血管功能、生殖功能、胃腸道功能及胰島素分泌等方面具有一定的調(diào)節(jié)作用。鑒于Nesfatin-1攝食有一定程度的影響,而攝食與生長密切相關(guān),本研究旨在研究Nesfatin-1及其mRNA在大鼠生長軸上的表達(dá)與作用,為Nesfatin-1在調(diào)控動物生長方面的研究提供科學(xué)的理論依據(jù)。方法:(1)成年雌性SD大鼠(220-250g)5只,處死后取下丘腦、垂體、胰腺、肝臟、肌肉、胃及十二指腸,4%多聚甲醛固定,常規(guī)石蠟切片,厚度為5μm,采用免疫組織化學(xué)PV-9000兩步法染色,光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照,使用江蘇捷達(dá)JEDA801D軟件分析平均光密度。(2)10d,25d,42d及80d SD大鼠各5只,頸靜脈采血,處死后取下丘腦,分別采用實時熒光定量PCR方法及酶聯(lián)免疫分析方法測定下丘腦NUCB2mRNA及血清Nesfatin-1濃度。(3)25d雌性SD大鼠15只隨機分為試驗組5只和對照組10只,對照組中有5只不做任何處理飼喂至陰門開啟,記錄時間(42.67±1.83d)。1%戊巴比妥鈉0.5ml腹腔注射,麻醉后固定于大鼠腦立體定位儀,試驗組側(cè)腦室注射10μlNesfatin-1(含50pmol),對照組注射10μl的生理鹽水,飼喂至試驗組陰門開啟時(31.83±1.27d),處死試驗組所有大鼠及對照組5只大鼠,取下丘腦、垂體、肝臟、胰腺,熒光定量PCR法檢測NUCB2 mRNA及下丘腦生長激素釋放激素(Growth hormone-releasing hormone,GHRH)、生長抑素(Somatostatin,SS),垂體生長激素(Growth hormone,GH),肝臟生長激素受體(Growth hormone receptor,GHR),胰島素樣生長因子(Insulin-like growth factors,IGF-1)及胰腺胰島素(Insulin,Ins)mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:(1)Nesfatin-1主要分布于大鼠下丘腦的室旁核,背內(nèi)側(cè)核,室周核,外側(cè)區(qū),弓狀核及視上核,腺垂體,胰腺的胰島和腺泡、肝臟、肌肉、胃的粘膜腺體及十二指腸腸絨毛的結(jié)締組織和小腸腺中,平均光密度分析顯示Nesfatin-1在室周核和胰島顯著地高于其他組織(P0.05),胰腺腺泡,肝臟,肌肉及胃則顯著地低于其他組織(P0.05),下丘腦背內(nèi)側(cè)核、外側(cè)區(qū)和室旁核高于視上核、弓狀核和腺垂體(P0.05)。(2)不同發(fā)育階段大鼠下丘腦中NUCB2 mRNA水平不同,10d最低(P0.05),25d最高且顯著高于其他發(fā)育階段(P0.05),血清中Nesfatin-1濃度從10d至80d逐漸升高,但25d與42d組差異不顯著(P0.05)。(3)側(cè)腦室注射Nesfatin-1使雌性大鼠初情期顯著提前,但不影響其體重,顯著抑制了大鼠下丘腦,垂體,肝臟,胰腺中的NUCB2 mRNA水平(P0.05),降低了GHRH、GH、GHR及IGF-1 mRNA水平(P0.05),但顯著提高了胰腺中Ins mRNA水平(P0.05)。結(jié)論:(1)Nesfatin-1廣泛分布于下丘腦,垂體,胰腺、肝臟、肌肉、胃及十二指腸中。但Nesfatin-1在不同組織以及同一組織的不同區(qū)域中表達(dá)存在差異。(2)大鼠血清中Nesfatin-1濃度隨著日齡的增加而增加,但其下丘腦NUCB2 mRNA水平卻在25d達(dá)到峰值。(3)Nesfatin-1抑制大鼠生長軸中NUCB2 mRNA和下丘腦GHRH、SS mRNA,垂體GH、GHR mRNA及肝臟IGF-1 mRNA的表達(dá),促進胰腺Ins mRNA的表達(dá),提示Nesfatin-1對大鼠的生長軸具有一定的調(diào)控作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.2

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本文編號：2274228