【摘要】：為提取純化屎腸球菌(E.faecium)莢膜多糖(CPS)并測定其多糖含量,試驗(yàn)采用高壓法破碎菌體,加入核糖核酸酶(25μg/mL)、脫氧核糖核酸酶(0.5mg/mL)、溶菌酶(0.25mg/mL)及蛋白酶K(1.25mg/mL)等去除核酸和蛋白質(zhì),得到莢膜多糖粗提物,經(jīng)過30ku和100ku超濾離心管超濾濃縮和DEAE Sepharose Fast Flow層析柱層析后,得到純化的屎腸球菌莢膜多糖,再利用苯酚-硫酸法測定其含量。結(jié)果表明,成功從屎腸球菌中提取純化出莢膜多糖,其含量為75.21%,初步確定了屎腸球菌莢膜多糖的提取純化方法,為今后相關(guān)疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to extract and purify the capsule polysaccharide (CPS) of Enterococcus faecium (E.faecium) and determine its polysaccharide content, the bacteria were crushed by high pressure method, and the nucleic acid and protein were removed by adding ribonuclease (25 渭 g/mL), deoxyribonuclease (0.5mg/mL), lysozyme (0.25mg/mL) and protease K (1.25mg/mL). The crude extract of capsule polysaccharide was obtained. After ultrafiltration and concentration by 30ku and 100ku ultrafiltration tube and DEAE Sepharose Fast Flow chromatography column chromatography, the purified capsule polysaccharide of Enterococcus faecium was obtained and its content was determined by phenol-sulfuric acid method. The results showed that the capsule polysaccharide was extracted and purified successfully from Enterococcus faecium and its content was 75.21. The method of extracting and purifying the capsule polysaccharide of Enterococcus faecium was preliminarily determined, which laid a foundation for the development of related vaccine in the future.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)試驗(yàn)室農(nóng)業(yè)部草食動物疫病重點(diǎn)開放試驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31172335)
【分類號】：S859.797

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本文編號：2269111