【摘要】：為了構(gòu)建新疆多浪羊真核表達(dá)載體pc DNA3.1-IL-1β,試驗(yàn)采用重組質(zhì)粒p MD-18TIL-1βPCR和質(zhì)粒pc DNA3.1雙酶切的方法,獲得目的基因白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)和載體片段pc DNA3.1(+),通過連接、轉(zhuǎn)化宿主菌大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞,挑取陽(yáng)性克隆,再通過菌液PCR和雙酶切來驗(yàn)證陽(yáng)性克隆,并測(cè)序。結(jié)果表明:試驗(yàn)已成功構(gòu)建真核表達(dá)載體pc DNA3.1-IL-1β,完成了pc DNA3.1-IL-1β的菌液PCR和酶切鑒定。通過對(duì)IL-1β功能的了解,以及熟悉質(zhì)粒提取和質(zhì)粒連接的方法,完成重組質(zhì)粒pc DNA3.1-IL-1β的構(gòu)建。
[Abstract]:In order to construct the eukaryotic expression vector pc DNA3.1-IL-1 尾 of Xinjiang Dorang sheep, the recombinant plasmid p MD-18TIL-1 尾 PCR and plasmid pc DNA3.1 were digested to obtain the target gene interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and the vector pc DNA3.1 (), by ligation. The positive clones were obtained by transforming the host bacteria into E. coli DH5 偽 competent cells, and the positive clones were confirmed by PCR and double enzyme digestion, and sequenced. The results showed that the eukaryotic expression vector pc DNA3.1-IL-1 尾 was successfully constructed, and the pc DNA3.1-IL-1 尾 was identified by PCR and enzyme digestion. The construction of recombinant plasmid pc DNA3.1-IL-1 尾 was completed by understanding the function of IL-1 尾 and being familiar with the methods of plasmid extraction and plasmid ligation.
【作者單位】： 塔里木大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;塔里木畜牧科技兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30960277) 研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目(TDGRI201520) 南疆地區(qū)羊標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖的群發(fā)病防控及預(yù)警響應(yīng)機(jī)制研究項(xiàng)目(TDZKCX201401)
【分類號(hào)】：S826;Q78

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本文編號(hào)：2262693