【摘要】：為了對水貂阿留申病毒(ADV)進行快速、準確地鑒定,試驗根據(jù)基因庫中ADV的NS1基因核苷酸序列,設計合成了一對特異性引物,經(jīng)過反應條件的優(yōu)化,建立了水貂阿留申病的PCR檢測方法,對陽性病料進行特異性核酸擴增及產物測序,并對水貂腸炎細小病毒(MEV)、犬瘟熱病毒(CDV)等病原核酸進行擴增檢測該方法的特異性;用10倍系列稀釋的ADV進行擴增檢測敏感性;用該方法檢測臨床樣品并與對流免疫電泳法進行了比較。結果表明:ADV陽性樣品有明顯目的條帶(365 bp)出現(xiàn),MEV、CDV均無特異條帶出現(xiàn),最低能檢測到的病毒核酸量為2.53 ng/μL;臨床樣品檢測表明PCR檢出率為90%,對流免疫電泳法檢出率為83%。
[Abstract]:In order to identify the (ADV) of mink Aleutian virus quickly and accurately, a pair of specific primers were designed and synthesized according to the nucleotide sequence of NS1 gene of ADV in gene bank, and the reaction conditions were optimized. A PCR method for detection of Aleutian disease in mink was established. The specific nucleic acid amplification and product sequencing were carried out on the positive venereal materials. The specificity of the method was detected by amplification of the pathogenic nucleic acids such as mink enteritis parvovirus (MEV), canine distemper virus (CDV). A 10-fold series diluted ADV was used to detect the sensitivity, and the method was used to detect the clinical samples and compared with the convection immunoelectrophoresis method. The results showed that there were obvious target bands (365 bp) and no specific bands, the lowest detectable amount of virus nucleic acid was 2.53 ng/ 渭 L, the detection rate of PCR and convection immunoelectrophoresis was 90 ng/ 渭 L and 83%, respectively.
【作者單位】： 青島農業(yè)大學;
【基金】：青島農業(yè)大學應用型人才培養(yǎng)特色名校建設工程大學生科技創(chuàng)新基金項目 山東省高等學校優(yōu)勢學科人才團隊
【分類號】：S858.92

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本文編號：2241602