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豬肺炎支原體PCR快速檢測方法的應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-09-11 19:38
【摘要】:為對(duì)豬場中豬肺炎支原體的感染和發(fā)病情況進(jìn)行有效地病原學(xué)監(jiān)測,本研究篩選國內(nèi)外最常用且引用率最高的靶向16S rRNA基因的引物對(duì)作為檢測豬肺炎支原體的特異性引物,通過制定臨床豬肺組織樣品、鼻拭子樣品和肺泡灌洗液樣品的標(biāo)準(zhǔn)化采集與處理方法,比較菌液樣品、肺組織樣品、鼻拭子樣品與支氣管肺泡灌洗液等不同樣品的不同DNA提取方法,驗(yàn)證PCR檢測方法適用的臨床樣本范圍。結(jié)果表明,對(duì)于菌液樣品和鼻拭子樣品可選用經(jīng)濟(jì)快速的水煮法,對(duì)于肺組織樣品和肺泡灌洗液樣品使用高效的試劑盒提取法。本研究表明,使用靶向16S rRNA基因的引物對(duì)進(jìn)行PCR檢測,可滿足臨床上對(duì)豬肺炎支原體快速檢測的要求。
[Abstract]:In order to detect the infection and pathogenesis of mycoplasma pneumoniae in pig farm, the most commonly used primers targeting 16s rRNA gene were selected as specific primers for detection of mycoplasma pneumoniae. The methods of collecting and treating the clinical samples of pig lung tissue, nasal swab and alveolar lavage fluid were established, and the samples of bacterial fluid and lung tissue were compared. Different DNA extraction methods from nasal swabs and bronchoalveolar lavage fluid were used to verify the range of clinical samples for PCR detection. The results showed that the economic and rapid water boiling method was used for the bacterial and nasal swabs samples, and the efficient kit extraction method was used for lung tissue samples and alveolar lavage fluid samples. The results showed that the use of 16s rRNA primer pairs for PCR detection could meet the requirement of rapid detection of mycoplasma pneumoniae in clinic.
【作者單位】: 江蘇徐淮地區(qū)連云港農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所;
【分類號(hào)】:S852.62

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