【摘要】：為探究表達(dá)豬流行性腹瀉病毒(PEDV)纖突糖蛋白(S1)的重組乳酸乳球菌口服免疫動(dòng)物誘導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答,本研究從PEDV SDLY株中擴(kuò)增得到S1基因序列,構(gòu)建pMG36e-S1重組質(zhì)粒并將其電轉(zhuǎn)至乳酸乳球菌MG1363感受態(tài)細(xì)胞中,制備表達(dá)豬流行性腹瀉病毒S1蛋白的重組乳酸乳球菌。應(yīng)用SDS-PAGE、Western-blot鑒定目的蛋白的表達(dá)。將重組菌口服免疫新西蘭大白兔,中和試驗(yàn)檢測(cè)小腸黏膜和血清中的中和抗體效價(jià),間接ELISA方法測(cè)定血清中特異性IgG。結(jié)果顯示,該重組菌能夠有效引起動(dòng)物體產(chǎn)生較高水平血清IgG和一定量的黏膜免疫中和抗體,表明該重組菌表達(dá)系統(tǒng)能刺激動(dòng)物系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,具有作為口服疫苗的潛在應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:In order to investigate the specific immune response induced by oral immunization of recombinant Lactococcus lactis with (PEDV) fibrin glycoprotein (S1) of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV SDLY), the S1 gene sequence was amplified from PEDV SDLY strain. PMG36e-S1 recombinant plasmid was constructed and electroporated into MG1363 competent cells of Lactococcus lactis to prepare recombinant Lactococcus lactis expressing S1 protein of porcine epidemic diarrhea virus. The expression of the target protein was identified by SDS-PAGEN Western-blot. New Zealand white rabbits were immunized with recombinant bacteria orally. Neutralizing antibody titers in small intestinal mucosa and serum were detected by neutralization test and specific IgG in serum were determined by indirect ELISA method. The results showed that the recombinant bacteria could effectively induce the production of high levels of serum IgG and a certain amount of mucosal immune neutralizing antibodies in animals, indicating that the recombinant bacteria expression system could stimulate the immune response of the animal system. It has potential application value as oral vaccine.
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(SDAIT-06-022-08) 青島市民生科技計(jì)劃項(xiàng)目(16-6-2-42-nsh)
【分類號(hào)】：S852.651

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 向華,衛(wèi)文仲,譚華榮,郭順星;人銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆和在乳酸乳球菌中的表達(dá)[J];生物工程學(xué)報(bào);2000年01期

2 孫磊,孔文濤,孔健;乳酸乳球菌電轉(zhuǎn)化條件的研究[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版);2005年03期

3 付瑞燕;陳堅(jiān);李寅;;一株具有谷胱甘肽合成能力的乳酸乳球菌的分離與初步研究[J];微生物學(xué)通報(bào);2007年06期

4 劉懷龍;孟祥晨;;酸適應(yīng)對(duì)一株乳酸乳球菌膜脂肪酸組成和膜蛋白表達(dá)的影響[J];微生物學(xué)報(bào);2008年11期

5 付良;劉飛;霍貴成;;乳酸乳球菌抗氧化的研究進(jìn)展[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年06期

6 韓旭;霍貴成;李春;劉寧;;氣相色譜法測(cè)定乳酸乳球菌脂肪酸[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年09期

7 孫大慶;姜毓君;;乳酸乳球菌高效電轉(zhuǎn)化的方法[J];中國乳品工業(yè);2010年07期

8 曲曉軍;沙長青;李思明;孫建華;于沖;夏海華;王金英;;重組乳酸乳球菌的應(yīng)用進(jìn)展[J];黑龍江科學(xué);2013年04期

9 黃新鳳;江夢(mèng)天;邵小虎;李小華;李林;;一株抗G~-菌和酵母菌的乳酸乳球菌的分離鑒定與抗菌活性[J];微生物學(xué)通報(bào);2009年09期

10 劉佳明;孫晶;王惠寧;鐘崇洲;季鵬;洪娜;;變形鏈球菌致齲抗原基因在乳酸乳球菌的表達(dá)[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2009年12期

相關(guān)會(huì)議論文 前9條

1 張娟;傅瑞燕;李寅;陳堅(jiān);;谷胱甘肽在乳酸乳球菌酸脅迫和冷凍脅迫中的保護(hù)作用[A];中國生物工程學(xué)會(huì)第四次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2005年

2 張娟;傅瑞燕;陳堅(jiān);李寅;;谷胱甘肽在乳酸乳球菌酸脅迫中的保護(hù)作用[A];2006中國微生物學(xué)會(huì)第九次全國會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

3 孫磊;孔文濤;孔健;;乳酸乳球菌電轉(zhuǎn)化條件的研究[A];山東微生物學(xué)會(huì)第六次會(huì)員代表大會(huì)暨2004年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上）[C];2004年

4 王秀麗;任曉冬;龍才;馬博宇;韓文瑜;;乳酸乳球菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化[A];吉林省第六屆生命科學(xué)大型學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)論文集[C];2008年

5 傅瑞燕;陳堅(jiān);李寅;;外源谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶顯著提高乳酸乳球菌抗氧脅迫能力[A];中國生物工程學(xué)會(huì)第四次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2005年

6 梁小波;鐘瑾;還連棟;;納豆激酶基因在乳酸乳球菌中的誘導(dǎo)表達(dá)[A];第二屆中國青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

7 付瑞燕;陳堅(jiān);李寅;;谷胱甘肽保護(hù)乳酸乳球菌SK11抵抗氧脅迫[A];2008年中國微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

8 王迎華;陳燕;高丹丹;曹郁生;;大腸桿菌galU基因在乳酸乳球菌中的克隆及對(duì)產(chǎn)胞外多糖的影響[A];2008年中國微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

9 龔芳紅;賀松;張德純;劉明方;郭亞楠;;幽門螺桿菌熱休克蛋白A在乳酸乳球菌中的表達(dá)及免疫學(xué)活性分析[A];重慶微生物學(xué)會(huì)第九屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 宋麗;乳酸乳球菌upp基因缺陷互補(bǔ)型質(zhì)粒載體系統(tǒng)的構(gòu)建及其缺失菌生物學(xué)特性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 生舉正;透明質(zhì)酸合成途徑在乳酸乳球菌中的建立及微生物合成透明質(zhì)酸分子量調(diào)控機(jī)制的初步研究[D];山東大學(xué);2009年

3 莊重;人β-干擾素和大腸桿菌O157：H7表面抗原EspA在乳酸乳球菌食品級(jí)誘導(dǎo)表達(dá)體系中表達(dá)及相關(guān)免疫活性分析[D];山東大學(xué);2007年

4 汪川;可分泌高活性β-半乳糖苷酶的重組乳酸乳球菌株的構(gòu)建及其產(chǎn)酶特性的初步研究[D];四川大學(xué);2006年

5 徐毅;乳酸菌高效膜蛋白表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建及其自溶性質(zhì)的研究[D];山東大學(xué);2012年

6 胡春霞;大腸桿菌K88菌毛蛋白亞基FaeG重組乳酸乳球菌的構(gòu)建及其對(duì)ICR小鼠免疫保護(hù)的研究[D];浙江大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 蘇艷芳;人源金屬硫蛋白hMT-I的重組表達(dá)及其在乳酸乳球菌的表面展示[D];華南理工大學(xué);2015年

2 張躍;禽戊型肝炎病毒衣殼蛋白在乳酸乳球菌中的表達(dá)及其免疫保護(hù)作用與機(jī)理[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 衛(wèi)蘭蘭;提高發(fā)酵液pH對(duì)乳酸乳球菌有氧呼吸的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 施為家;發(fā)酵液pH對(duì)乳酸乳球菌有氧呼吸的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 連元元;乳酸乳球菌耐鎘毒性作用機(jī)理的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 房杰;一株重組乳酸乳球菌抗氧脅迫機(jī)制的初探[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

7 秦艷青;乳酸乳球菌主要分泌蛋白的鑒定及其同源整合載體的構(gòu)建研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

8 尹尉翰;海藻酸鈣微囊對(duì)乳酸乳球菌在胃腸道環(huán)境中的保護(hù)作用[D];上海交通大學(xué);2009年

9 侯宏曉;乳鏈菌肽前體基因克隆及在乳酸乳球菌中的表達(dá)研究[D];西南農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

10 馬露;豬白介素-18和干擾素γ在乳酸乳球菌中的表達(dá)及生物活性的檢測(cè)[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：2192061