【摘要】：本研究旨在建立一種簡便有效的豬胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞體外分離純化方法。采用胰酶DNase I酶聯合消化法消化母豬自然分娩后胎盤絨毛組織,以35%、45%2個Percoll密度梯度法進行豬胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞的分離純化,并通過觀察細胞形態(tài)、測定生長曲線、免疫熒光染色、透射電鏡等鑒定豬胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞。結果表明,分離培養(yǎng)的豬胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞呈上皮樣平鋪成片生長,形態(tài)為多角形或類圓形,培養(yǎng)48h后部分細胞開始融合成多核合胞體滋養(yǎng)層細胞。免疫熒光染色結果顯示,細胞角蛋白7染色陽性占91%以上,表明分離獲得的豬胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞純度較高。透射電鏡觀察顯示,所獲細胞具有典型滋養(yǎng)層細胞結構特征。綜上表明,采用胰酶DNase I酶聯合消化法和35%、45%2個Percoll密度梯度法進行分離純化,可簡便有效地獲得較高純度的豬胎盤絨毛滋養(yǎng)層細胞。
[Abstract]:The aim of this study was to establish a simple and effective method for isolation and purification of porcine placental villus trophoblastic cells in vitro. Placental villi of sows were digested with trypsin DNase I enzyme and digested. Two Percoll density gradient methods were used to isolate and purify placental villus trophoblastic cells from porcine placenta. Cell morphology was observed and growth curve was measured. Porcine placental villus trophoblastic cells were identified by immunofluorescence staining and transmission electron microscopy. The results showed that the cultured porcine placental villus trophoblastic cells grew as epithelioid lamina and were polygonal or round in shape. After 48 hours of culture, some of the cells began to fuse into polynuclear syncytiotrophoblastic cells. The results of immunofluorescence staining showed that cytokeratin 7 was positive in more than 91%, indicating that the purity of the isolated porcine placental villus trophoblastic cells was high. Transmission electron microscopy (TEM) showed that the cells were characterized by typical trophoblast cells. The results showed that high purity of porcine placental villus trophoblastic cells could be obtained by using trypsin DNase I enzyme digestion method and Percoll density gradient method.
【作者單位】： 南京農業(yè)大學動物科技學院;
【基金】：江蘇省自然科學基金-青年基金項目(BK20150672)
【分類號】：S828

【相似文獻】

相關期刊論文 前2條

1 王紅,張崇理,羅淑宜,莊臨之;β-內啡肽對妊娠早期人胎盤絨毛hCG與孕酮分泌功能的影響[J];動物學雜志;1988年02期

2 ;[J];;年期

相關會議論文 前3條

1 林靜;;彩色多普勒超聲在中期妊娠完全性胎盤絨毛植入診斷中的應用[A];中國醫(yī)學影像技術學術研討會論文集（下）[C];2004年

2 劉淮;黃金陽;張曉玲;;妊娠期肝內膽汁淤積癥血脂水平與胎盤體視學的關系分析[A];全國圍產醫(yī)學專題學術研討會論文匯編[C];2007年

3 呂葆真;黃威權;孫嵐;;人胎盤絨毛5-羥色胺受體亞型的顯微亞顯微定位及發(fā)育變化的研究[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

相關重要報紙文章 前1條

1 趙強；楊聲瑞;檢測TNF－α有助防治妊高征[N];中國醫(yī)藥報;2004年

相關博士學位論文 前2條

1 劉大艷;缺氧對重度子癇前期患者胎盤絨毛組織代謝足跡變化的影響[D];南方醫(yī)科大學;2011年

2 唐薇;米非司酮對孕7-9周人胎盤絨毛的影響[D];暨南大學;2009年

相關碩士學位論文 前4條

1 邰賀;苯并芘損傷胎盤絨毛組織機理及VE防護作用的研究[D];河北醫(yī)科大學;2010年

2 蔣雪梅;黑色素瘤細胞粘附分子、基質金屬蛋白酶9及基質金屬蛋白酶抑制劑2在正常胎盤絨毛和妊娠滋養(yǎng)細胞疾病中的表達及其意義[D];山東大學;2005年

3 賈建軍;人胎盤絨毛血管生成及相關調控因子表達的研究[D];暨南大學;2003年

4 陳小華;葡萄糖、胰島素及其類似物對離體胎盤絨毛組織EGFR、EGF和IGF-Ⅰ Ra表達的實驗研究[D];汕頭大學;2006年

，

本文編號：2176916