本文選題：鴨瘟病毒 + 鴨胚臍帶間充質(zhì)干細胞　； 參考：《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年09期

【摘要】：為了解鴨瘟病毒(DPV)在鴨胚臍帶間充質(zhì)干細胞上的適應(yīng)性和增殖情況。本試驗將DPV接種鴨胚臍帶間充質(zhì)干細胞,連續(xù)傳代至第10代,通過CPE觀察、病毒粒子電鏡觀察、核酸檢測、間接免疫熒光檢測等分析其生物學(xué)特性,并測定了連續(xù)10代的病毒滴度(TCID_(50))。結(jié)果顯示,第一代DPV即在鴨胚臍帶間充質(zhì)干細胞上產(chǎn)生了明顯的CPE,并且在連續(xù)傳代的過程中CPE能夠穩(wěn)定出現(xiàn)。初步提純的病毒懸浮液在電鏡下可見到結(jié)構(gòu)清晰的子代病毒。F1~F10代DPV均能擴增出大小為416 bp的UL6基因片段。間接免疫熒光又進一步證實DPV的陽性血清能夠?qū)θ径静≡町a(chǎn)生特異性熒光染色。連續(xù)測定了10代的病毒滴度(TCID_(50))均不低于10~(-6.43),且在DEUCMSC上測定的DPV TCID_(50)明顯高于DEF的。說明DPV能在鴨胚臍帶間充質(zhì)干細胞上穩(wěn)定增殖。
[Abstract]:To investigate the adaptability and proliferation of duck plague virus (DPV) on duck umbilical cord mesenchymal stem cells. In this experiment, DPV was inoculated with duck umbilical cord mesenchymal stem cells. The biological characteristics of DPV were analyzed by CPE observation, electron microscope observation of virus particles, nucleic acid detection, indirect immunofluorescence detection and so on. The virus titer (TCID _ (50).) of 10 consecutive generations was determined. The results showed that the first generation of DPV produced significant CPE on the umbilical cord mesenchymal stem cells of duck embryo, and CPE appeared stably during successive passage. The purified virus suspensions could amplify the UL6 gene fragment of 416 BP in DPV of F1 F10 generation with clear structure under electron microscope. Indirect immunofluorescence further confirmed that the positive serum of DPV could produce specific fluorescent staining on the infected lesions. The virus titers (TCID50) of 10 generations were measured continuously, and the DPV TCID50 on DEUCMSC was significantly higher than that of DEF. It indicated that DPV could proliferate steadily on the mesenchymal stem cells of duck embryo umbilical cord.
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國家重點實驗室黑龍江省實驗動物與比較醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【基金】：國家科技支撐計劃項目(2015BAI07B02-02) 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費專項(Y2016PT41) 黑龍江省自然科學(xué)基金重點項目(ZD2016006) 中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費專項(1610302016013,1610302017013)
【分類號】：S852.65

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10 黃q諛，

本文編號：2114807