本文選題：JSRV-Env + TC-1細(xì)胞　； 參考：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：背景：綿羊肺腺瘤(OPA)是由綿羊肺腺瘤病毒(JSRV)引發(fā)的一種接觸傳染性肺臟腫瘤疾病。env基因是JSRV的癌基因,透明質(zhì)酸酶2 (Hyal-2)是JSRV的作用受體。JSRV的囊膜蛋白(Env)轉(zhuǎn)化NIH 3T3細(xì)胞是通過其胞質(zhì)尾(CT)直接激活信號(hào)通路；而Env轉(zhuǎn)化上皮細(xì)胞,是先與其受體Hyal-2結(jié)合,進(jìn)而激活下游細(xì)胞信號(hào)通路。目的：綿羊Hyal-2是JSRV Env誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的受體,研究綿羊Hyal-2與Env之間的相互作用,對(duì)于揭示JSRV致瘤機(jī)理具有重要意義。方法：1.采用綿羊Hyal-2基因真核表達(dá)質(zhì)粒pDsRed-monomer-N1-Hyal-2轉(zhuǎn)染TC-1細(xì)胞,經(jīng)G418篩選、純化,構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)綿羊Hyal-2的TC-1細(xì)胞系。在核酸水平及蛋白水平上分別利用RT-PCR方法和Western blot方法驗(yàn)證Hyal-2在TC-1細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的穩(wěn)定性,并通過激光共聚焦顯微鏡來觀察載體自帶紅色熒光來確定Hyal-2蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位。2.采用pEGFP-C1-env瞬時(shí)轉(zhuǎn)染TC-1細(xì)胞、TC-1-Hyal2細(xì)胞和NIH 3T3細(xì)胞。通過RT-PCR方法和Western blot方法驗(yàn)證Env在上述3種細(xì)胞內(nèi)的表達(dá),同樣使用激光共聚焦來觀察Env在上述3種細(xì)胞內(nèi)的定位。3.轉(zhuǎn)染pEGFP-C1-env后,通過熒光定量PCR和Western blot方法分別檢測其對(duì)細(xì)胞中AKT、ERK和TERT表達(dá)量的影響。結(jié)果及結(jié)論：1.建立了穩(wěn)定表達(dá)綿羊Hyal-2蛋白的TC-1細(xì)胞系,命名為TC-1-Hyal2。2.完成了pEGFP-C1-env真核表達(dá)質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染NIH 3T3細(xì)胞、TC-1細(xì)胞和TC-1-Hyal2細(xì)胞。3.轉(zhuǎn)染pEGFP-C1-env后,TC-1-Hyal2細(xì)胞和TC-1細(xì)胞中AKT、ERK和TERT表達(dá)量均升高,并且在TC-1-Hya12細(xì)胞中的表達(dá)量比TC-1細(xì)胞中升高更顯著。4.綿羊Hyal-2蛋白具有促進(jìn)JSRV Env誘導(dǎo)TC-1細(xì)胞轉(zhuǎn)化的作用。
[Abstract]:BACKGROUND : The env gene is the oncogene of JSRV , which is one of JSRV ' s oncogene . The envelope protein ( Env ) of JSRV is transformed into NIH 3T3 cell to directly activate signal path through its cytoplasmic tail ( CT ) ;
The results and conclusions were as follows : 1 . We established TC - 1 cell line , TC - 1 - Hyal2 cells and NIH 3T3 cells by RT - PCR and Western blot .
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S858.26

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 李順意,梁宋平;透明質(zhì)酸酶研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));1995年02期

2 曲蕾;姬勝利;;透明質(zhì)酸及透明質(zhì)酸酶與腫瘤的關(guān)系[J];中國生化藥物雜志;2007年02期

3 ，

本文編號(hào)：2111448