本文選題：鎘 + 姬松茸多糖　； 參考：《東北農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：鎘(Cd)中毒后,可對(duì)人和動(dòng)物的心血管、肝、腎、生殖系統(tǒng)及免疫器官造成損傷。姬松茸多糖(ABP)是從姬松茸中提取的具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化和抗炎癥等生物學(xué)活性的一種多糖。本試驗(yàn)以7日齡海蘭白雞為研究對(duì)象,在建立雞鎘中毒模型的基礎(chǔ)上,研究ABP對(duì)鎘中毒雞外周血淋巴細(xì)胞和脾臟MDA5信號(hào)通路及抗氧化功能的影響,以期明確ABP對(duì)鎘中毒雞外周免疫損傷的干預(yù)機(jī)制。將80只7日齡海蘭白雞隨機(jī)分成四組,即對(duì)照組(Control)、鎘中毒模型組(Cd)、姬松茸多糖組(ABP)和鎘+姬松茸多糖組(Cd+ABP)。Control組,飼喂正常全價(jià)飼料,每只灌注0.2 mL生理鹽水;Cd組,飼喂混有140 mg/Kg Cd Cl2的正常全價(jià)飼料,連續(xù)飼喂2個(gè)月;ABP組,飼喂正常全價(jià)飼料,同時(shí)每天口服0.2 m L ABP(濃度為30 mg/mL);Cd+ABP組,即Control組和ABP組結(jié)合,分別在第20天、第40天和第60天取樣。首先,每組隨機(jī)抽取5只雞進(jìn)行心臟采血,用于分離淋巴細(xì)胞和收集血清;快速分離脾臟,取部分固定于4%多聚甲醛溶液中。分離的淋巴細(xì)胞與剩余的脾臟分成四部分,一部分用電感耦合等離子質(zhì)譜法檢測(cè)鎘含量;對(duì)一部分淋巴細(xì)胞和脾臟進(jìn)行總RNA的提取,反轉(zhuǎn)錄成c DNA,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)MDA5及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路銜接蛋白IPS-1、轉(zhuǎn)錄因子(IRF3、NF-κB)的m RNA水平;對(duì)另部分淋巴細(xì)胞和脾臟進(jìn)行蛋白的提取,用Western Blot法檢測(cè)MDA5蛋白表達(dá);將剩余的淋巴細(xì)胞用1640完全培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h,收集上清,剩余的脾臟用生理鹽水進(jìn)行勻漿,一同用ELISA方法分別檢測(cè)細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-β的含量;檢測(cè)淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清液和脾臟勻漿抗氧化指標(biāo)(SOD、MDA和GSH-Px);并對(duì)雞脾臟進(jìn)行病理組織學(xué)檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)Cd+ABP組雞外周血液和脾臟中鎘含量較Cd組極顯著降低(P0.01);(2)鎘中毒后雞外周血淋巴細(xì)胞和脾臟中MDA5的mRNA水平和蛋白表達(dá)均有升高,且隨著鎘中毒時(shí)間的增加MDA5的表達(dá)量也隨之增加,而灌服ABP后其表達(dá)量有明顯的下調(diào);MDA5信號(hào)通路相關(guān)分子IPS-1、IRF3、NF-κB的表達(dá)變化規(guī)律與MDA5相同;(3)Cd組雞外周血淋巴細(xì)胞和脾臟中細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-β含量升高,且均極顯著高于Control組和ABP組(P0.01),口服ABP后這些細(xì)胞因子含量均極顯著下調(diào)(P0.01);(4)Cd+ABP雞外周血淋巴細(xì)胞上清液和脾臟中MDA含量極顯著降低(P0.01),SOD和GSH-Px活性極顯著升高(P0.01);(5)鎘中毒后雞脾臟病理組織學(xué)變化表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯減少,紅髓、白髓界限不清,而Cd+ABP組雞脾臟結(jié)構(gòu)較Cd組有明顯改善,淋巴細(xì)胞數(shù)量增多,且細(xì)胞排列緊湊,紅髓、白髓界限較清晰。綜上所述,ABP能減少鎘在雞外周血液和脾臟中的蓄積,降低鎘中毒雞外周血淋巴細(xì)胞中MDA5及其下游信號(hào)分子的表達(dá)及細(xì)胞因子含量,顯著提高抗氧化酶(SOD、GSH-Px)的活性,降低MDA含量,ABP對(duì)鎘中毒造成的雞外周血淋巴細(xì)胞和脾臟的損傷有一定的保護(hù)作用。本研究為進(jìn)一步探討ABP干預(yù)鎘中毒導(dǎo)致機(jī)體損傷機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。
[Abstract]:The effects of ABP on peripheral blood lymphocytes and spleen MDA5 signaling pathway and anti - oxidation function were studied by means of real - time fluorescence quantitative polymerase chain reaction ( RT - PCR ) . The levels of IL - 1尾 , IL - 6 , TNF - 偽 and IFN - 尾 in peripheral blood and spleen of chicken were significantly lower than those in control group and ABP group ( P0.01 ) .
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：S859.8

【參考文獻(xiàn)】

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2 葉彬;陳令斌;劉融;;氯化鎘誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞凋亡的效應(yīng)及其分子機(jī)制[J];實(shí)用癌癥雜志;2016年11期

3 王倩倩;陳大偉;;鎘暴露對(duì)蛋雞卵巢的毒性損傷及酵母硒的保護(hù)效應(yīng)[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2016年10期

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本文編號(hào)：2082286