益生菌對熱應(yīng)激肉雞腸道屏障功能的影響
本文選題:肉雞 + 熱應(yīng)激; 參考:《江西農(nóng)業(yè)大學》2017年碩士論文
【摘要】:熱應(yīng)激是損害畜禽產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)的重要因素之一,易引發(fā)各種傳染性的疾病。高溫應(yīng)激導致家禽腸道屏障結(jié)構(gòu)和功能損傷,腸道菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,穩(wěn)態(tài)失衡,致使機體腸道免疫力大幅度降低,抗病力減弱,發(fā)病率提高,采食量降低,使其生長緩慢。然而,熱應(yīng)激損傷腸道黏膜屏障尤其是天然免疫作用途徑尚未鮮明。因此,開展熱應(yīng)激條件下畜禽腸道天然免疫功能變化及其機制研究對豐富熱應(yīng)激理論、有效預防和緩解熱應(yīng)激損傷具有重要理論和實踐指導意義。本試驗以AA肉仔雞作為研究對象,探討飼糧添加益生菌對熱應(yīng)激條件下肉雞生長性能、血清相關(guān)生化指標、腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)、腸道天然免疫相關(guān)基因表達和盲腸微生物結(jié)構(gòu)和多樣性的影響及其可能的作用機制。選用200只1日齡AA肉仔雞飼養(yǎng)至21日齡,選取健康、體重相近的180只,隨機分為3個處理組,每組4個重復,每個重復15只。其中一組為適溫組,飼喂基礎(chǔ)飼糧;另外兩組為熱應(yīng)激組,分別飼喂添加0 cfu/kg和1.5×108 cfu/kg益生菌的基礎(chǔ)飼糧。適溫組溫度控制在22±2℃,熱應(yīng)激組溫度按照28℃—35℃—28℃進行日循環(huán)變化,試驗期為21天。益生菌由嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌和糞腸球菌組成,總?cè)樗峋俊?×10 9cfu/g。分別于熱應(yīng)激開始后第7天(28日齡)和第21天(42日齡)翅靜脈采血,測定血清相關(guān)生化指標;于冰浴上快速剪取十二指腸、空腸、回腸中段4cm用于腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的測定。收集回腸組織用于測定緊密連接蛋白和天然免疫相關(guān)基因表達量。無菌條件下采集盲腸黏膜和內(nèi)容物,測定菌群結(jié)構(gòu)和多樣性。試驗結(jié)果如下:1.熱應(yīng)激顯著降低肉雞平均日采食量、平均日增重,提高料重比。飼糧中添加益生菌顯著提高熱應(yīng)激肉雞平均日采食量,而對平均日增重和料重比影響不顯著。熱應(yīng)激顯著提高熱應(yīng)激21天肉雞血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6),降低IL-10含量。飼糧中添加益生菌顯著降低熱應(yīng)激21天肉雞血清TNF-α和IL-6含量,提高IL-10、C-反應(yīng)蛋白(CRP)和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)含量。2.熱應(yīng)激顯著降低熱應(yīng)激第7和21天肉雞十二指腸絨毛高度、第21天十二指腸隱窩深度、第7天十二指腸絨毛高度與隱窩深度的比值,提高熱應(yīng)激21天十二指腸絨毛高度與隱窩深度的比值、熱應(yīng)激第7天回腸隱窩深度。飼糧中添加益生菌顯著升高熱應(yīng)激條件下第21天肉雞十二指腸絨毛高度,第7天十二指腸絨毛高度和回腸絨毛高度與隱窩深度的比值。熱應(yīng)激顯著降低熱應(yīng)激第7天回腸黏膜Claudin-1、ZO-1m RNA表達,損傷腸道結(jié)構(gòu),破壞腸道上皮屏障;飼糧中添加益生菌顯著提高熱應(yīng)激21天回腸黏膜Occludin m RNA表達,緩解熱應(yīng)激損傷,修復腸道屏障。熱應(yīng)激顯著提高熱應(yīng)激第7天肉雞血清D-乳酸含量,熱應(yīng)激21天血清內(nèi)毒素含量。飼糧中添加益生菌降低熱應(yīng)激第7和21天肉雞血清內(nèi)毒素含量和熱應(yīng)激第7天D-乳酸含量。3.盲腸黏膜和內(nèi)容物菌群較為相似,但黏膜特有OTU數(shù)目較多,菌群多樣性更高。熱應(yīng)激第7天,熱應(yīng)激組豐富度高于適溫組;熱應(yīng)激第21天,熱應(yīng)激組豐富度低于適溫組。熱應(yīng)激降低菌群組成相似度。結(jié)合相似度和聚類分析推測,影響盲腸菌群主要因素為熱應(yīng)激,其次為飼糧中所添加的益生菌。熱應(yīng)激不同程度降低熱應(yīng)激第7和21天肉雞盲腸黏膜和內(nèi)容物擬桿菌門和擬桿菌屬比例;降低熱應(yīng)激第7天盲腸內(nèi)容物藍菌門、Barnesiella比例以及熱應(yīng)激第21天盲腸黏膜脫硫弧菌屬比例;顯著提高熱應(yīng)激第7和21天盲腸黏膜和內(nèi)容物菌群中變形菌門和柔膜菌門的比例,熱應(yīng)激21天盲腸內(nèi)容物放線菌門比例以及盲腸黏膜Synergistetes、巨單胞菌屬和普氏菌屬比例,熱應(yīng)激第7天盲腸黏膜埃希氏桿菌屬比例。飼糧添加益生菌一定程度上提高了熱應(yīng)激條件下肉雞盲腸擬桿菌門和擬桿菌屬的含量。此外,飼糧中添加益生菌降低熱應(yīng)激第7和21天肉雞盲腸黏膜變形菌門、Synergistetes和柔膜菌門比例,提高了熱應(yīng)激第7和21天盲腸內(nèi)容物中黏膠球形菌門和盲腸黏膜乳球菌屬比例。4.熱應(yīng)激顯著降低熱應(yīng)激第21天肉雞回腸Toll樣受體2(TLR2)m RNA表達,第7和21天回腸β-防御素2(Av BD2)m RNA表達,熱應(yīng)激21天回腸Av BD12 m RNA表達。與適溫組相比,熱應(yīng)激組試驗第7天回腸Av BD4 m RNA表達顯著下降,而試驗21天Av BD4 m RNA表達顯著升高。熱應(yīng)激顯著降低回腸黏膜膠原凝集素10(COLEC10)m RNA表達。飼糧中添加益生菌顯著增加熱應(yīng)激第7天肉雞回腸Av BD2m RNA表達,有降低熱應(yīng)激肉雞回腸TLR4、TLR5 m RNA表達的趨勢,但與熱應(yīng)激組差異不顯著。綜上所述,熱應(yīng)激降低肉雞生長性能,提高血清促炎細胞因子含量,改變腸道菌群結(jié)構(gòu)和天然免疫相關(guān)基因表達,損傷腸道黏膜。飼糧中添加益生菌可改善熱應(yīng)激條件下肉雞腸道微生物組成以及天然免疫答應(yīng)相關(guān)基因的表達進而改善腸道屏障功能,降低血清內(nèi)毒素和促炎細胞因子含量。
[Abstract]:The effects of heat stress on growth performance , serum - related biochemical indexes , intestinal mucosal morphology , intestinal natural immune - related gene expression and intestinal microbial structure and diversity were studied . The effects of heat stress on the contents of serum D - lactic acid and the content of D - lactic acid in the 7th and 21st day after heat stress were significantly increased . in conclusion , that heat stress reduce the growth performance of the broiler , improve the serum pro - inflammatory cytokine content , change the expression of the intestinal flora structure and the natural immune - related gene , and damage the intestinal mucosa .
【學位授予單位】:江西農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S831.5
【參考文獻】
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,本文編號:2046646
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