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飼用混合菌的富集培養(yǎng)及凍干工藝研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-19 12:09

  本文選題:青貯飼料 + 混合菌離心分離; 參考:《新疆大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:飼用乳酸菌是一種直接能添加到青綠飼料里的青貯發(fā)酵劑,由于其含有大量的產(chǎn)酸能力比較強(qiáng)的乳酸菌,故而能迅速降低青貯飼料的p H值,有效的抑制有害菌生長(zhǎng)繁殖,提高青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì),但乳酸菌不能利用纖維素,因此提高青貯飼料消化率效果不太理想;目前為止,在國(guó)內(nèi)外提高青貯飼料消化率的主要方法是青貯飼料發(fā)酵過(guò)程中添加纖維素分解酶和乳酸菌混合液。纖維素分解酶能夠分解植物的細(xì)胞壁,從而使得植物的纖維含量下降給乳酸菌提供較多的碳水化合物,促進(jìn)青貯發(fā)酵品質(zhì),能夠改善動(dòng)物飼料的消化率和生產(chǎn)性能,有效的提高青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,還能延長(zhǎng)保藏期。但青貯飼料生產(chǎn)中發(fā)酵溫度不斷的提高達(dá)到60℃以上使纖維素酶變性失活,因此青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)和消化率受到影響,另外在青貯飼料實(shí)地生產(chǎn)中需要大量的纖維素分解酶,制備復(fù)雜,成本相對(duì)較高,重復(fù)利用率低。近幾年來(lái)本研究室進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知,篩選出的乳酸菌具有生長(zhǎng)范圍廣,耐酸和產(chǎn)酸能力比較強(qiáng)等優(yōu)勢(shì),纖維素分解菌也具有生長(zhǎng)范圍比較廣,耐酸能力和纖維素分解能力比較強(qiáng)等優(yōu)勢(shì);旌吓囵B(yǎng)得知,兩菌之間沒(méi)有相互抑制作用,這為研究與開(kāi)發(fā)混合菌飼料添加劑提供一定的科學(xué)依據(jù)。目前為止,混合菌添加劑的研究還處于液體狀態(tài),實(shí)際生產(chǎn)中需要量大的菌懸液,菌懸液的運(yùn)輸和保藏不便,因此,混合菌粉飼料添加劑的研究與開(kāi)發(fā)在降低高品質(zhì)青貯飼料生產(chǎn)成本,提高發(fā)酵品質(zhì),消化率及緩解飼料短缺等方面有一定的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。本研究選用高效乳酸菌(A4+A7)和纖維素分解菌(Nf+Y6)為實(shí)驗(yàn)菌種,探討和確立了混合菌培養(yǎng)基的優(yōu)化及混合菌體富集培養(yǎng)、混合菌凍干以及復(fù)活條件優(yōu)化等工藝,初步研究出飼料乳酸菌和纖維素分解菌混合菌體凍干菌粉制備的技術(shù)路線和工業(yè)參數(shù),為將青貯飼料凍干混合菌粉添加劑的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。1.飼用高效乳酸菌A4+A7(從玉米秸稈中分離得到)和纖維素分解菌Nf+Y6(從牛、羊瘤胃中分離得到)富集培養(yǎng)結(jié)果表明:不同處理組中兩株菌相同比例(1:1)混合培養(yǎng)在2.0%蔗糖+(尿素:鹽=2.0%:1.0%)溶液中,達(dá)到穩(wěn)定期時(shí)間最短,12h進(jìn)入穩(wěn)定期,活菌數(shù)量最高,活菌數(shù)為4.49×109cfu/ml;(混合菌在2.0%蔗糖溶液中培養(yǎng)時(shí)活菌數(shù)僅為1.62×108cfu/ml)。2.采用離心分離法進(jìn)行混合菌體離心,結(jié)果得出,在離心力為4000g、離心轉(zhuǎn)速為5000r/min、離心溫度為20℃、離心時(shí)間為15min的條件下飼用混合菌體的離心效果最好,離心存活率為88.9%,并且上清液中幾乎沒(méi)有菌體殘留。3.將通過(guò)離心分離法分離得到的混合菌沉淀物與8種保護(hù)劑單獨(dú)混合均勻,在不同的低溫條件下進(jìn)行預(yù)凍,預(yù)凍結(jié)果表明,混合菌在預(yù)凍溫度為-20℃時(shí)存活率最高;混合菌沉淀物與不同保護(hù)劑混合均勻進(jìn)行冷凍干燥,最佳復(fù)合凍干保護(hù)劑配方是脫脂乳10.0%,抗壞血酸2.0%,海藻糖6.0%,葡萄糖1.0%以及凍干厚度為0.5cm時(shí)的凍干存活率最高,可達(dá)到87.92%;凍干結(jié)束后,凍干混合菌粉和復(fù)活劑按10:1.0比例混合均勻并測(cè)出復(fù)活存活率,結(jié)果可知,凍干混合菌粉的最佳復(fù)活劑為12%脫脂乳;當(dāng)12%脫脂乳與凍干混合菌粉按1.0:10比例混合均勻,在25℃下復(fù)活15min時(shí)混合菌存活率最高,可到達(dá)88.79%。
[Abstract]:The invention provides a silage fermentation agent which can be directly added into the green feed , and has the advantages of relatively strong acid - producing ability , capability of effectively inhibiting the growth and propagation of harmful bacteria , improving the fermentation quality of the silage , and improving the digestibility and the production performance of the silage . The results showed that the best survival rate of freeze - dried mixed bacteria was 1 . 62 脳 108 cfu / ml when the mixture was cultured in 2.0 % sucrose solution .
【學(xué)位授予單位】:新疆大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S816

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本文編號(hào):2039834

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