本文關(guān)鍵詞：傳播牛泰氏焦蟲病的白紋璃眼蜱，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2014年

酵母雙雜交篩選環(huán)形泰勒蟲P104蛋白相互作用蛋白

岑雙慶  

【摘要】：環(huán)形泰勒蟲是頂復(fù)門的一種蜱傳性血液寄生蟲，能使牛淋巴組織增生并引起牛的熱帶泰勒蟲病，給亞洲和非洲等疾病流行地區(qū)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)報(bào)道，環(huán)形泰勒蟲主要侵染巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，能轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，誘導(dǎo)宿主細(xì)胞不受控制的增生，并抵制其凋亡。環(huán)形泰勒蟲對宿主細(xì)胞的入侵是由一系列蛋白相繼介導(dǎo)的，其中，與真核生物溶酶體功能類似的棒狀體，作為頂復(fù)門寄生蟲的特異性分泌器官，分泌了棒狀體-微線體蛋白p104，該蛋白為研究環(huán)形泰勒蟲的入侵機(jī)制和對宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)化提供了突破口。 1.環(huán)形泰勒蟲p104基因全長序列的hiTAIL-PCR擴(kuò)增 本實(shí)驗(yàn)采用高效熱不對稱交互PCR（hiTAIL-PCR）方法，從TaIM細(xì)胞系的cDNA中擴(kuò)增出了p104基因的側(cè)翼序列，通過拼接得到了一個(gè)p104基因全序列。BLAST分析發(fā)現(xiàn)，與報(bào)道過的環(huán)形泰勒蟲安卡拉株具有95%的相似性。 2.環(huán)形泰勒蟲p104蛋白的原核表達(dá)和亞細(xì)胞定位分析 將環(huán)形泰勒蟲p104蛋白的470-650位殘基進(jìn)行了原核表達(dá)。將表達(dá)后的蛋白純化之后免疫家兔，制備該蛋白的多克隆抗體。利用間接免疫熒光法對p104蛋白進(jìn)行了亞細(xì)胞定位分析，結(jié)果顯示該蛋白主要分布于環(huán)形泰勒蟲裂殖體的表面。結(jié)果表明該蛋白適合用于研究與宿主淋巴細(xì)胞之間的相互作用。 3. TaIM細(xì)胞系酵母雙雜交文庫的構(gòu)建和p104誘餌質(zhì)粒的構(gòu)建 以TaIM細(xì)胞系為材料，，構(gòu)建了該細(xì)胞系的酵母cDNA文庫。文庫構(gòu)建結(jié)果顯示，該文庫庫容量達(dá)2.4×107，平均插入的長度在1000bp左右，達(dá)到試劑盒要求。通過RT-PCR從中獲得p104基因片段，構(gòu)建酵母雙雜交誘餌質(zhì)粒。結(jié)果表明誘餌質(zhì)粒構(gòu)建成功，重組蛋白對酵母Gold菌株沒有自激活性和毒性作用。 4．酵母雙雜交篩選與p104蛋白相互作用的蛋白和相互作用蛋白的驗(yàn)證 酵母雙雜交篩選出了14個(gè)存在潛在相互作用的蛋白。選取最具研究價(jià)值的半乳糖凝集素（Bostaurus lectin, galactoside-binding, soluble,1，Gal-1）、熱休克蛋白70（Bos indicus partial HSP70gene）進(jìn)行了回交驗(yàn)證，結(jié)果顯示這兩種蛋白與p104之間確實(shí)存在相互作用。經(jīng)過后期的生物信息學(xué)分析，將牛半乳糖凝集素-1的相互作用區(qū)域定位在了91-183位氨基酸殘基處，HSP70相互作用區(qū)域定位在了435-500位氨基酸殘基處。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：S852.7
【目錄】：

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【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱利軍;長孫東亭;羅素蘭;;全長cDNA文庫構(gòu)建方法及應(yīng)用研究[J];海南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年02期

2 馬素芳,王序英;傳播牛泰氏焦蟲病的白紋璃眼蜱[J];昆蟲知識;1960年01期

3 夏玉鳳;;以gfp為報(bào)告基因研究蛋白亞細(xì)胞定位[J];生物技術(shù)通報(bào);2006年02期

4 簡子健;馬素貞;黃家雨;孫其吉吉;沈炯玉;苗中秋;呂偉;;牛環(huán)形泰勒蟲GST-Tams1融合蛋白間接ELISA檢測方法的建立[J];新疆農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年03期

5 白啟,劉光遠(yuǎn),殷宏,趙啟祖,劉德考,任家信,李新;牛中華泰勒蟲新種(梨形蟲亞目:泰勒蟲科) 2.分子分類學(xué)研究[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2002年02期

6 劉愛紅;關(guān)貴全;劉軍龍;李有全;馬米玲;牛慶麗;任巧云;殷宏;羅建勛;;牛泰勒蟲18S rRNA基因序列比較研究[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2009年07期

7 毛新國;景蕊蓮;孔秀英;趙光耀;賈繼增;;幾種全長cDNA文庫構(gòu)建方法比較[J];遺傳;2006年07期

8 楊陽;萬家余;侯峰;馬永和;曹丹;郝鐲;孟軻音;劉文森;錢軍;;酵母雙雜交系統(tǒng)研究及其應(yīng)用進(jìn)展[J];中國動(dòng)物檢疫;2012年01期

9 ;環(huán)形泰勒焦蟲(Theileria annulata)裂殖體細(xì)胞培養(yǎng)的研究[J];獸醫(yī)科技資料;1973年03期

10 羅建勛,殷宏,關(guān)貴全,馬米玲,張其才,呂文順,呂文祥;殘緣璃眼蜱人工培育及對環(huán)形泰勒蟲的實(shí)驗(yàn)性傳播[J];中國獸醫(yī)科技;2002年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王承民,劉俊偉,秦建華,王麗榮,姚四新,劉麗艷,李軍民,杭柏林,何宏軒;河南省新鄉(xiāng)市畜禽寄生蟲蟲種的調(diào)查[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2005年08期

2 楊雪峰;鐘華;趙東豪;;雞球蟲病及其防治措施[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2006年20期

3 李久純;趙曉薇;;錦州地區(qū)寵物犬寄生蟲流行區(qū)系及流行病學(xué)調(diào)查研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年12期

4 唐偉;;湖南永州地區(qū)家養(yǎng)犬·貓胃腸道寄生蟲病原學(xué)調(diào)查[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年21期

5 沈巖;許應(yīng)天;李靜;欒楊;楊興;;牛瑟氏泰勒蟲18S rRNA基因的克隆及分子分類學(xué)分析[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年31期

6 宮新城;趙興華;許麗;陳福星;;中藥方劑孢囊凈對雞球蟲病的防治效果研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年22期

7 何光志;安永如;周穎;簡昌友;張?zhí)A;崔小東;;重組AS16蛋白抗原檢測豬蛔蟲抗體間接ELISA方法的建立[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年31期

8 周作勇;王芝英;聶奎;;中藥“球康”對雛雞感染柔嫩艾美爾球蟲部分血液理化指標(biāo)的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年08期

9 李婷;趙其平;董輝;韓紅玉;孔春林;姜連連;朱順海;黃兵;;堆型艾美耳球蟲早熟株和母株對8種抗球蟲藥的敏感試驗(yàn)[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年34期

10 卓麗萍;;肉雞球蟲病的防治[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2010年14期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 王天奇;董發(fā)明;張玲;郭巍;楊光忠;;結(jié)腸小袋纖毛蟲體外培養(yǎng)特性的初步觀察[A];河南省畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)第七屆理事會(huì)第二次會(huì)議暨2008年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

2 蘇旭東;王林;李寧;馬玉青;張偉;;轉(zhuǎn)基因食品的PCR檢測方法[A];2007中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會(huì)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨中國中部地區(qū)農(nóng)產(chǎn)品加工產(chǎn)學(xué)研研討會(huì)論文集[C];2007年

3 曾紀(jì)輝;楊武振;馬新武;;犬寄生蟲性皮膚病的臨床診斷與防治[A];第十一次全國養(yǎng)犬學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

4 吳世林;李明;朱慶秋;;深圳市公安局警犬基地犬腸道寄生蟲調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)養(yǎng)犬學(xué)分會(huì)第十二次全國養(yǎng)犬學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

5 李春花;蔡進(jìn)忠;;青海省牦牛和綿羊住肉孢子蟲病流行病學(xué)調(diào)查[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)成立大會(huì)暨第一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

6 藺紅玲;張繼瑜;魏小娟;李冰;;環(huán)形泰勒蟲主要膜蛋白研究進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集(上冊)[C];2010年

7 趙奎;龐全海;;胃腸道在兔豆?fàn)钅椅豺什≈械牟±碜兓芯縖A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集(下冊)[C];2010年

8 郝麗;李和平;嚴(yán)歷;;東北梅花鹿鹿茸尖端組織全長cDNA文庫的構(gòu)建[A];2010中國鹿業(yè)進(jìn)展[C];2010年

9 湯繼順;;淺談寄生蟲病在肉牛養(yǎng)殖中的危害及其處理措施[A];《第八屆中國牛業(yè)發(fā)展大會(huì)》論文集[C];2013年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李克生;禽流感H5亞型、結(jié)核分支桿菌及弓形蟲感染金標(biāo)快速檢測技術(shù)研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

2 王利霞;泰勒蟲新型診斷方法的建立和未定種生物學(xué)特性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 王舟;結(jié)縷草（Zoysia japonica）抗寒相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子ZjDREB1基因的克隆、表達(dá)模式及功能分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 張計(jì)育;湖北海棠抗病相關(guān)基因的克隆及其功能分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 寧長申;河南部分地區(qū)豬等孢球蟲流行情況調(diào)查、致病試驗(yàn)與藥物防治[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

6 高文瑞;鷹嘴豆耐旱種質(zhì)的篩選、cDNA文庫構(gòu)建、EST數(shù)據(jù)分析及耐旱相關(guān)基因克隆[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

7 劉宏高;一種魯棒有序的mRNA差異顯示新方法的建立及應(yīng)用[D];武漢大學(xué);2010年

8 羅建勛;巴貝斯蟲未定種的發(fā)現(xiàn)及牛巴貝斯蟲病的免疫診斷和藥物防治研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

9 薄新文;捻轉(zhuǎn)血矛線蟲BZ抗性等位基因多重PCR檢測及新基因Hc38的克隆、表達(dá)與特性分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

10 林青;柔嫩艾美耳球蟲cDNA文庫的構(gòu)建及其主要抗原基因的克隆與表達(dá)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 房學(xué)爽;珙桐葉片cDNA文庫構(gòu)建[D];中南林業(yè)科技大學(xué);2008年

2 李熙;長沙市生豬肺線蟲感染情況調(diào)查及線粒體cox1序列分析研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 王延延;荒漠地區(qū)優(yōu)勢地衣石果衣Endocarpon pusillum Hedwing全長cDNA文庫的構(gòu)建與初步分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 王金萍;枳根全長cDNA文庫的構(gòu)建及生物信息學(xué)研究[D];西南大學(xué);2011年

5 馮國興;山羊Toll樣受體2基因的克隆及過量表達(dá)[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2011年

6 孫亮;三角渦蟲酪蛋白激酶2α亞基和絲裂原活化蛋白激酶的cDNA文庫克隆及生物信息學(xué)分析[D];陜西師范大學(xué);2011年

7 李波;山葡萄轉(zhuǎn)色期果皮cDNA文庫的構(gòu)建與分析[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

8 鄒朗云;棉鈴蟲中腸cDNA文庫的構(gòu)建、V-ATP酶亞基B基因的克隆與功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

9 張萍;長角血蜱HL-3和HL-4功能基因的克隆及鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

10 張樂;綏農(nóng)14全長轉(zhuǎn)錄本的獲得和注釋及Glyma13g21630基因多樣性分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高健,許曉風(fēng),烏慧玲,陳學(xué)平,周家昊;特異種質(zhì)煙草全長cDNA文庫的構(gòu)建及質(zhì)量分析[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年01期

2 王藝?yán)?張子平;日本對蝦精巢和卵巢全長cDNA文庫的構(gòu)建[J];動(dòng)物學(xué)雜志;2003年02期

3 董志敏;李英慧;張寶石;關(guān)榮霞;常汝鎮(zhèn);邱麗娟;;一種獲得大片段克隆的SMART全長cDNA文庫構(gòu)建方法[J];大豆科學(xué);2006年03期

4 羅金;劉光遠(yuǎn);田占成;謝俊仁;張萍;;基于18S rRNA基因序列的我國馬梨形蟲分類學(xué)地位分析[J];動(dòng)物分類學(xué)報(bào);2011年01期

5 涂艷陽,徐如祥,楊志林,姜曉丹,吳曙光,陳一招,蔡穎謙,杜謀選,高楊;人腦膠質(zhì)瘤組織全長cDNA文庫的快速構(gòu)建與鑒定[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年09期

6 王維新,史成銀,黃倢;中國明對蝦鰓細(xì)胞全長cDNA文庫的構(gòu)建[J];海洋水產(chǎn)研究;2004年05期

7 陳亞利,王衛(wèi)萍,周枚;雙溫聚合酶鏈反應(yīng)檢測EB病毒[J];金陵醫(yī)院學(xué)報(bào);1994年03期

8 馬素芳,王序英;傳播牛泰氏焦蟲病的白紋璃眼蜱[J];昆蟲知識;1960年01期

9 蔡寧波;黃湘文;莊偉建;;花生種子全長cDNA文庫的構(gòu)建和鑒定[J];花生學(xué)報(bào);2007年02期

10 董倩;黃國強(qiáng);葉冰瑩;陳由強(qiáng);陳如凱;;二溫式PCR在特異短核酸探針合成中的應(yīng)用[J];花生學(xué)報(bào);2008年03期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 夏玉鳳;pf40基因產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位以及其功能研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張樂祥 ,張海梅;乳牛產(chǎn)后發(fā)生環(huán)形泰勒蟲病[J];中國獸醫(yī)科技;2001年10期

2 左秀峰;牛環(huán)形泰勒蟲病診治經(jīng)驗(yàn)[J];中國獸醫(yī)寄生蟲病;2001年04期

3 施存香;牛環(huán)形泰勒蟲病的診斷及防治[J];云南畜牧獸醫(yī);2003年04期

4 黨志勝,羅建勛,殷宏,蔣錫仕;環(huán)形泰勒蟲病疫苗防制的研究進(jìn)展[J];四川畜牧獸醫(yī);2004年03期

5 簡子健;黃家雨;馬素貞;王曉萍;袁江玲;蘇貴成;苗中秋;沈炯玉;張?zhí)m江;李曉軍;;牛環(huán)形泰勒蟲巢式PCR診斷方法的建立[J];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年06期

6 曹雯麗;陳亮;劉啟生;巴音查汗;;新疆牛環(huán)形泰勒蟲病的流行現(xiàn)狀和防治[J];草食家畜;2011年03期

7 沙塔爾·卡哈爾;曹雯麗;張揚(yáng);王冰潔;巴音查汗;;吐魯番部分疫區(qū)牛環(huán)形泰勒蟲病流行病學(xué)調(diào)查[J];新疆農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年06期

8 于良斌,尚學(xué)禮;牛環(huán)形泰勒蟲病的治療[J];中國獸醫(yī)雜志;1992年07期

9 呂文祥，張其才，殷宏，余豐;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷環(huán)形泰勒蟲感染牛的研究[J];中國獸醫(yī)科技;1995年03期

10 張國元,張世喜;牛環(huán)形泰勒蟲病的診治[J];中國動(dòng)物檢疫;1995年05期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 藺紅玲;張繼瑜;魏小娟;李冰;;環(huán)形泰勒蟲主要膜蛋白研究進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集(上冊)[C];2010年

2 羅建勛;殷宏;關(guān)貴全;馬米玲;孫彩琴;魯炳義;白啟;呂文順;陳溥言;;小亞璃眼蜱對牛的巴貝斯蟲未定種和環(huán)形泰勒蟲傳播能力的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第五次代表大會(huì)暨第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 林濤;牛環(huán)形泰勒蟲昆明白小鼠繁殖模型與間接熒光抗體檢測法的建立[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

2 曹雯麗;牛環(huán)形泰勒蟲表面抗原靶基因片段的篩選、鑒定及rELISA診斷方法的建立和應(yīng)用[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 黃家雨;新疆牛環(huán)形泰勒蟲Tams1基因的克隆、表達(dá)與巢式PCR診斷方法的建立[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

4 岑雙慶;酵母雙雜交篩選環(huán)形泰勒蟲P104蛋白相互作用蛋白[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 鄭進(jìn)峰;環(huán)形泰勒蟲TaSP基因的克隆、原核表達(dá)及PCR診斷方法的建立[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

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