本文選題：鵝呼腸孤病毒 + 分離鑒定　； 參考：《西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2017年08期

【摘要】：【目的】從疑似感染鵝呼腸孤病毒的病料中分離鑒定一株鵝源呼腸孤病毒JS-01,并對病毒分離株的致病性進(jìn)行初步研究,為開展該病毒的進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)�！痉椒ā咳〔∷砾Z的肝、脾組織凍融3次后充分勻漿,8 000r/min離心15min取上清,接種10日齡鵝胚的卵黃囊,收集24~144h死亡的鵝胚尿囊液,并提取病毒RNA。根據(jù)鵝呼腸孤病毒基因的保守序列設(shè)計特異性引物,利用該引物對所提取的病毒RNA進(jìn)行RT-PCR,回收后與pMD18-T載體連接,將重組載體轉(zhuǎn)化到DH5α大腸桿菌并在AMP+/LB培養(yǎng)基中培養(yǎng),對陽性菌落測序,對測得的序列進(jìn)行核苷酸及氨基酸同源性比對,并繪制系統(tǒng)遺傳進(jìn)化樹�！窘Y(jié)果】分離病毒JS-01的RT-PCR顯示,其基因序列長度380bp,為鵝呼腸孤病毒σC基因片段;系統(tǒng)遺傳進(jìn)化分析表明,分離株JS-01與水禽源呼腸孤病毒處于同一分支,同源性為94.8%~96.5%,而與雞呼腸孤病毒的同源性僅為40.6%~52.2%;在雛鵝上進(jìn)行的動物回歸試驗表明,病毒JS-01可使雛鵝肝、脾、腎等器官發(fā)生病變�！窘Y(jié)論】分離毒株為鵝呼腸孤病毒,該分離株對雛鵝有一定致病性,應(yīng)注意本病的防控。
[Abstract]:[objective] to isolate and identify a geese origin reovirus JS-01 from the samples suspected to be infected with geese reovirus, and to study the pathogenicity of the isolated strain. [methods] the liver and spleen tissue of the dead goose were taken for 3 times, and then fully homogenized for 8 000r/min centrifuged 15min supernatant. The egg yolk sac of 10 day old goose embryo was inoculated, and the allantoic fluid of the dead goose embryo was collected. And the virus RNA was extracted. According to the conserved sequence of geese reovirus gene, a specific primer was designed, using the primer to carry out RT-PCR on the extracted virus RNA, and the recombinant vector was ligated with pMD18-T vector after recovery. The recombinant vector was transformed into DH5 偽 Escherichia coli and cultured in AMP / LB medium. The nucleotide and amino acid homology of the positive bacteria was sequenced, and the phylogenetic tree was plotted. RT-PCR of JS-01 virus showed that the length of the gene was 380 BP, which was a 蟽 C gene fragment of geese reovirus. The phylogenetic analysis showed that the isolated strain JS-01 was in the same branch as the waterfowl origin reovirus, and the homology was 94.88.96. 5, while the homology with chicken reovirus was only 40.6 and 52.2, and the animal regression test on the goslings showed that the virus JS-01 could make foie liver. [conclusion] the isolated strain is goose reovirus, which is pathogenicity to goslings, so we should pay attention to the prevention and control of this disease.
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;
【基金】：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(CARS-43-10) 山東省科技發(fā)展計劃項目(2014GNC111023)
【分類號】：S858.33

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本文編號：2022640