奶牛源葡萄球菌tetK基因堿基及氨基酸序列差異的功能分析
本文選題:奶牛源葡萄球菌 + 四環(huán)素耐藥基因tetK。 參考:《揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)》2017年02期
【摘要】:為探究奶牛源葡萄球菌中部分四環(huán)素耐藥基因tetK不產(chǎn)生耐藥性的原因,采用平行試驗(yàn)對(duì)四環(huán)素抗性菌株(MP00159)與四環(huán)素敏感菌株(MP00109)所攜帶的tetK基因和tetK′基因的堿基及氨基酸序列差異進(jìn)行分析;隨后將兩者分別克隆至表達(dá)載體pET-32a(+)后導(dǎo)入大腸埃希菌感受態(tài)細(xì)胞BL21(DE3)內(nèi),比較轉(zhuǎn)化前后對(duì)四環(huán)素的耐藥性。結(jié)果表明:四環(huán)素敏感菌株攜帶的tetK′基因與抗性菌株的tetK基因存在5個(gè)堿基位點(diǎn)差異,對(duì)應(yīng)的氨基酸出現(xiàn)4個(gè)差異;轉(zhuǎn)入敏感菌株tetK′基因的BL21仍表現(xiàn)對(duì)四環(huán)素敏感,轉(zhuǎn)入抗性菌株tetK基因的BL21表現(xiàn)了四環(huán)素抗性。由此推測(cè)發(fā)生突變的堿基位點(diǎn)是決定tetK耐藥表型的關(guān)鍵位點(diǎn)。
[Abstract]:In order to investigate the reasons why tetk, a tetracycline resistant gene, was not resistant to antibiotics in staphylococcus from dairy cattle, The nucleotide and amino acid sequence differences of tetK gene and tetK' gene carried by tetracycline resistant strain (MP00159) and tetracycline sensitive strain (MP00109) were analyzed by parallel test. Then they were cloned into the expression vector pET-32a () and introduced into Escherichia coli competent cell BL21 (DE3) to compare the resistance of tetracycline to tetracycline before and after transformation. The results showed that the tetK' gene carried by tetracycline sensitive strain was different from that of resistant strain in 5 base loci, and the corresponding amino acid was 4 different, while BL21, which was transferred to tetK' gene, was still tetracycline sensitive. BL21, which was transformed into resistant strain tetK, showed tetracycline resistance. Therefore, it is inferred that the base site of mutation is the key site to determine tetK resistance phenotype.
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院/教育部禽類(lèi)預(yù)防醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;揚(yáng)州大學(xué)實(shí)驗(yàn)農(nóng)牧場(chǎng);常州市武進(jìn)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:江蘇省青藍(lán)工程項(xiàng)目(2012-05) 揚(yáng)州市社會(huì)發(fā)展科技攻關(guān)項(xiàng)目(YZ2011091) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項(xiàng)目[CX(14)2088] 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程項(xiàng)目(PAPD) 常州市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(CE20152006)
【分類(lèi)號(hào)】:S852.611
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):2014563
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