β-catenin在絨山羊絨毛生長中的表達變化及作用研究
本文選題:遼寧絨山羊 + β-連環(huán)蛋白; 參考:《沈陽農業(yè)大學》2017年碩士論文
【摘要】:本研究選12只年齡相近,體況良好的遼寧絨山羊作為研究對象,分別在絨毛生長的退行期,休止期,旺盛前期和旺盛期采集皮膚樣品。采用相對熒光定量PCR的方法測定皮膚中β-catenin基因表達變化、通過免疫組化和Western Blot方法測定β-catenin蛋白的表達位置及變化;進一步采用毛囊體外培養(yǎng)方法,通過激活β-catenin,測定毛囊生長、形態(tài)及基因表達變化,探討β-catenin在絨山羊絨毛生長中的作用。結果表明:(1)β-catenin基因在絨山羊絨毛生長不同時期皮膚中均有表達,生長旺盛時期(11月份)表達量最高(5.58±0.13),休止期(4月份)表達量最低(0.89±0.25),退行期(2月份)和生長旺盛前期(8月份)的表達量分別是(3.08±0.076),介于休止期(4月份)和生長旺盛(11月份)之間。4個時期間表達水平差異極顯著(P0.01)。(2)免疫組化方法測定結果表明,β-catenin在遼寧絨山羊不同時期皮膚初、次級毛囊中均有表達,在初級毛囊毛母質,內、外根鞘都有表達;次級毛囊中β-catenin的表達部位在外根鞘,次級毛囊中β-catenin周期性表達變化與初級毛囊相同。11月份呈強表達,4月份表達最弱,8月份與2月份的表達介于11月與4月之間。(3)Western-blot檢測結果表明,β-catenin蛋白表達在休止期(4月份)最低,表達量為0.64±0.024;退行期(2月份)和生長旺盛前期(8月份)表達量介于休止期(4月份)和生長旺盛期(11月份)之間;生長旺盛期(11月份)表達量最高,表達量為2.24±0.86,顯著高于退行期(2月份)、休止期(2月份)和生長旺盛前期(11月份)(0.01P0.05)。(4)2-10 mmol·L-1LiCl組的毛囊β-catenin基因表達水平和生長長度極顯著高于對照組(P0.01),毛囊形態(tài)維持良好;LiCl濃度為20mmol·L-1組的毛囊β-catenin基因表達量及生長長度極顯著低于對照組(P0.01),體外培養(yǎng)毛囊生長受到抑制。結論:(1)絨毛的生長過程中,β-catenin基因、蛋白的表達呈周期性表達;當?shù)缴L旺盛期,表達最強,說明β-catenin的表達參與絨毛生長。(2)β-catenin蛋白在毛囊發(fā)育中表達部位主要在初級、次級毛囊的毛母質、毛乳頭、內外根鞘。(3)添加促進劑,促使β-catenin基因表達水平提高;其中添加2-10 mmol·L-1的LiCl,誘導毛囊中β-catenin基因表達,促進毛囊的生長,高劑量導致毛囊生長受阻。本試驗中5mmol·L-1為較優(yōu)濃度。
[Abstract]:The expression of 尾 - catenin in the hair of cashmere goats was determined by immunohistochemistry and Western Blot . The results showed that : ( 1 ) The expression of 尾 - catenin was the lowest in the period of rest ( April ) and the growth period ( November ) . The expression of 尾 - catenin in hair follicles was significantly lower than that in the control group ( P0.01 ) . The expression of 尾 - catenin in hair follicles was significantly lower than that in the control group ( P0.01 ) .
【學位授予單位】:沈陽農業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S827
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,本文編號:1994418
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