大片形吸蟲免疫膠體金檢測試紙條的研制及初步應(yīng)用
本文選題:大片形吸蟲 + 單克隆抗體; 參考:《中國畜牧獸醫(yī)》2017年01期
【摘要】:為建立一種快速、簡便、適應(yīng)現(xiàn)場應(yīng)用的水牛大片形吸蟲檢測方法,本試驗利用抗大片形吸蟲ES抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株7D1和7D4分別制備和純化得到單克隆抗體7D1和7D4;采用檸檬酸三鈉還原法制備顆粒大小為30nm的膠體金,再用膠體金標(biāo)記純化單克隆抗體7D1,在硝酸纖維素膜的質(zhì)控帶和檢測帶處分別包被羊抗鼠IgG二抗和單克隆抗體7D4,經(jīng)反應(yīng)條件優(yōu)化,組裝成了大片形吸蟲免疫檢測試紙條。經(jīng)測試該檢測試紙條對ES抗原的檢測下限為0.94μg/mL,與胰擴盤吸蟲、前后盤吸蟲、支原體、弓形蟲、伊氏錐蟲均無交叉反應(yīng),特異性好。采集廣西地區(qū)334份水牛新鮮糞樣并用試紙條檢測,陽性率為38.62%。結(jié)果表明,試紙條方法操作簡單、快速、易于判定,特異性好,敏感性高,適合基層大面積普查和現(xiàn)場檢測大片形吸蟲。
[Abstract]:In order to establish a rapid, simple and suitable method for the detection of buffalo fluke, In this experiment, monoclonal antibodies 7D1 and 7D4 were prepared and purified from hybridoma cell lines 7D1 and 7D4, respectively, and colloidal gold with particle size of 30nm was prepared by sodium citrate reduction method. The monoclonal antibody 7D1 was purified by colloidal gold labeling and coated with sheep anti-mouse IgG second antibody and monoclonal antibody 7D4 respectively at the quality control band and the detection band of the nitrocellulose membrane. The detection limit of es antigen in the test strip was 0.94 渭 g / mL. There was no cross reaction with Pancreatic trematorchiasis, anterior and posterior clonorchiasis, Mycoplasma, Toxoplasma and Trypanosoma evansi, and the specificity was good. 334 fresh faeces of buffalo in Guangxi were collected and tested with test strip. The positive rate was 38.62%. The results showed that the test strip method was simple, rapid, easy to judge, good specificity and high sensitivity. It was suitable for large area survey and field detection of paragonimiasis.
【作者單位】: 廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;河南省動物疫病預(yù)防控制中心;
【基金】:廣西教育廳科研項目
【分類號】:S855.9
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6 李Y,
本文編號:1991907
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