本文選題：禽分枝桿菌 + 亞型鑒定��； 參考：《中國獸藥雜志》2017年10期

【摘要】：為建立禽分枝桿菌多重PCR鑒定方法,根據(jù)國外報道的診斷方法設計4對特異性引物,選用我國禽結核參考菌株(CVCC 68201)基因組DNA為模板,優(yōu)化了退火溫度,測定了DNA最小檢測量,并進行了特異性檢驗。采用優(yōu)化好的多重PCR體系,對國家獸醫(yī)微生物菌種保藏中心保存的禽分枝桿菌標準菌株進行檢測和分類。實驗結果表明,禽結核參考菌株(CVCC 68201)能很好的擴增出577 bp(IS901基因片段)、385 bp(IS1245基因片段)和140 bp(dna J基因片段)三條目的條帶,基因組DNA的最小檢測量為0.38 ng/μL,目的條帶在退火溫度50℃~62℃之間均能得到有效擴增。對23株禽分枝桿菌菌株檢測,并設立牛分枝桿菌作為陰性對照,最終將禽分枝桿菌菌株分為三大類:禽亞種/森林土壤亞種、副結核亞種、人豬亞種,與國家獸醫(yī)微生物菌種保藏中心的分類結果相比不僅一致且更加詳盡而有臨床意義。因此,基于分子生物學方法建立的多重PCR方法可以對禽分枝桿菌亞型進行快速鑒定并對禽結核病的診斷提供參考。
[Abstract]:In order to establish multiple PCR identification methods for Mycobacterium avian Mycobacterium, 4 pairs of specific primers were designed according to the diagnostic methods reported abroad, and the genomic DNA of China's avian tuberculosis reference strain (CVCC 68201) was selected as the template. The annealing temperature was optimized. The minimum detection amount of DNA was measured and the specificity test was tested. The optimized multiple PCR system was used for the national veterinarian. The experimental results showed that the reference strain of avian tuberculosis (CVCC 68201) could well amplify 577 BP (IS901 gene fragment), 385 BP (IS1245 gene fragment) and 140 BP (DNA J gene fragment), and the minimum detection amount of genomic DNA was 0.38 ng/. L, the target band can be effectively amplified between the annealing temperature of 50 C ~62 C and the detection of 23 strains of Mycobacterium avian Mycobacterium and the establishment of Mycobacterium bovis as negative control. Finally, the Mycobacterium avian Mycobacterium strain is divided into three categories: avian subspecies / forest soil subspecies, subspecies subspecies, human pig subspecies, and national veterinary microorganism Preservation Center The classification results are not only consistent and more detailed but also have clinical significance. Therefore, the multiple PCR method based on molecular biological methods can be used to quickly identify the subtypes of Mycobacterium avian Mycobacterium and provide reference for the diagnosis of avian tuberculosis.
【作者單位】： 中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;山東農業(yè)大學動物科技學院;
【基金】：國家重點研發(fā)計劃(2016YFD0500902)
【分類號】：S852.618

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 劉衍芬;姜鳳麗;賈富勃;;關于構建“全程考核”模式的探索與實踐——以《獸醫(yī)微生物》課程為例[J];遼寧農業(yè)職業(yè)技術學院學報;2009年05期

2 董永軍;王麗榮;趙坤;杭柏林;胡建和;;獸醫(yī)微生物實踐技能考核與評分標準[J];實驗技術與管理;2010年12期

3 弓樹文;;全國獸醫(yī)微生物學術討論會[J];微生物學雜志;1985年01期

4 薛春梅;;獸醫(yī)微生物學實驗課教學改革[J];高師理科學刊;2008年05期

5 王婷;黃明明;閆敏鑫;張玉敏;任慧英;;獸醫(yī)微生物課程綜合性實驗的開設與思考——以葡萄球菌與鏈球菌的分離鑒定為例[J];安徽農業(yè)科學;2013年14期

6 吳賢福;基因工程在獸醫(yī)微生物方面的應用[J];中國獸藥雜志;1998年01期

7 張則斌;’98江蘇省青年獸醫(yī)微生物工作者學術交流會在寧結束[J];畜牧獸醫(yī)科技信息;1998年18期

8 溫建新;;談成人高等教育獸醫(yī)微生物課程的教學改革與創(chuàng)新[J];教書育人;2011年09期

9 曹素芳;王巖;;任務驅動教學法在獸醫(yī)微生物及免疫技術課程實驗教學中的實踐[J];鄭州牧業(yè)工程高等�？茖W校學報;2010年04期

10 ;中國獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心引進33株大腸桿菌菌種[J];中國獸藥雜志;2011年09期

相關會議論文 前1條

1 趙燕;陳鍇;范學政;徐璐;鄭然;王琴;;原位雜交技術在獸醫(yī)微生物研究中的應用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第十二次人獸共患病學術研討會暨第六屆第十四次教學專業(yè)委員會論文集[C];2012年

，

本文編號：1983606