熱應(yīng)激對(duì)豬睪丸Cyt-C和Caspase-3表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-06-03 21:19
本文選題:熱應(yīng)激 + 公豬; 參考:《中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)》2017年05期
【摘要】:【目的】環(huán)境高溫影響豬精子發(fā)生和精液品質(zhì),但其分子機(jī)制尚不清楚。為此探索環(huán)境溫度升高導(dǎo)致的熱應(yīng)激對(duì)豬睪丸細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白Cyt-C和Caspase-3表達(dá)的影響!痉椒ā啃猿墒扉L(zhǎng)白公豬9頭,對(duì)照組3頭,飼養(yǎng)在20—27℃的豬舍環(huán)境;短期熱應(yīng)激處理組(heat stress 7 d,HS7d)3頭,每天置37—40℃的豬舍環(huán)境3 h,連續(xù)7 d;一個(gè)精子發(fā)生周期熱應(yīng)激處理組(heat stress 42 d,HS42d)3頭,每天置37—40℃的豬舍環(huán)境3 h,連續(xù)42 d;每天于熱應(yīng)激處理后將豬驅(qū)趕回20—27℃的豬舍。手術(shù)摘取睪丸組織,用QRT-PCR、Western blot和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Cyt-C和Caspase-3表達(dá)與定位的變化!窘Y(jié)果】QPT-PCR結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,熱應(yīng)激處理7 d組和42 d組,Cyt-C和Caspase-3m RNA的相對(duì)表達(dá)量均顯著升高;熱應(yīng)激處理7 d組Cyt-C和Caspase-3m RNA的相對(duì)表達(dá)量最高。Western blot結(jié)果顯示,熱應(yīng)激處理7 d組和42 d組Cyt-C和Caspase-3蛋白水平與對(duì)照組相比均顯著升高;熱應(yīng)激處理7 d組Cyt-C和Caspase-3的蛋白表達(dá)水平最高。免疫組織化學(xué)研究發(fā)現(xiàn),Cyt-C在豬睪丸組織中免疫反應(yīng)陽(yáng)性物定位于間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞和各個(gè)發(fā)育階段生精細(xì)胞的胞質(zhì)中,在生精細(xì)胞Cyt-C低表達(dá)于精原細(xì)胞,高表達(dá)于減數(shù)分裂后精母細(xì)胞和精子細(xì)胞。熱應(yīng)激處理導(dǎo)致Cyt-C的胞質(zhì)內(nèi)定位更加彌散,提示Cyt-C從線(xiàn)粒體到胞質(zhì)的釋放。Caspase-3在間質(zhì)細(xì)胞和精原細(xì)胞低表達(dá),大量減數(shù)分裂后的生精細(xì)胞呈Caspase-3陽(yáng)性。與對(duì)照組相比,熱應(yīng)激處理導(dǎo)致部分支持細(xì)胞Caspase-3的表達(dá),大量生精細(xì)胞的細(xì)胞核呈Caspase-3陽(yáng)性著色!窘Y(jié)論】高溫?zé)釕?yīng)激處理導(dǎo)致豬睪丸Cyt-C和Caspase-3的蛋白和m RNA表達(dá)水平升高、細(xì)胞定位改變,提示Cyt-C和Caspase-3可能與熱應(yīng)激導(dǎo)致的豬精液品質(zhì)下降存在關(guān)聯(lián)。
[Abstract]:Objective: environmental high temperature affects spermatogenesis and semen quality of pigs, but its molecular mechanism is not clear. To explore the effect of heat stress induced by elevated ambient temperature on the expression of apoptosis-regulating protein Cyt-C and Caspase-3 in pig testicular cells. [methods] 9 adult Landrace boars and 3 control groups were raised in pigsty environment at 20-27 鈩,
本文編號(hào):1974219
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