本文選題：豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌 + 血清型�。� 參考：《山東農(nóng)業(yè)大學》2015年碩士論文

【摘要】：山東9個地區(qū)11個規(guī)�；i場,自2011年以來豬群陸續(xù)發(fā)病,疫情不斷,遭受了嚴重的經(jīng)濟損失。為了全面了解豬場的發(fā)病原因,從而有針對性地控制疫情,本研究對發(fā)病豬場送檢的264份病料進行病原檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn),發(fā)病豬體內(nèi)存在的主要病原及其分離率分別為:豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)占43.18%,流行性腹瀉病毒(Epidemic diarrhea virus,縮寫)占27.27%,豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus,PCV)占31.64%;豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)占58.33%,副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,HPS)占26.42%,大腸桿菌(Escherichia coli,E.coli)占32.85%,支氣管敗血波氏桿菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)占3.12%,綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)占2.51%。結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),誘發(fā)呼吸道疾病的病原(PRRSV、APP和Bb)的總分離率最高,其中原發(fā)和繼發(fā)感染的APP分離率占主導地位,這可能是山東地區(qū)規(guī)模化豬場發(fā)病的主要原因之一。為了研制一種有效的疫苗來防控APP的危害,本研究對從山東規(guī)模化豬場送檢病料中分離到的24株APP的培養(yǎng)特性、血清型、分子生物學特性進行了研究,并根據(jù)分離株毒力和免疫保護的相關(guān)結(jié)果,從中篩選出候選疫苗株。血清型鑒定結(jié)果表明,分離株的血清型分為1、2、5、7和10型,各有8、1、6、8、1株;其中血清1、5、7型分離株占總分離株的91.67%,因此,這三個血清型的菌株被用作疫苗株的參考。最終,根據(jù)致病性試驗結(jié)果,分別從血清1、5、7型分離株中篩選出免疫原性好、毒力強的APPSD1101、APPSD1207、APPSD1103株作為生產(chǎn)用疫苗株,以制備豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌三價滅活疫苗。對篩選得到的三株疫苗株的最小致死量進行了測定:每個疫苗株設(shè)置五個濃度組(2.0×109CFU/ml、5.0×108CFU/ml、2.0×108CFU/ml、5.0×107CFU/ml、2.0×107CFU/ml)和空白對照組,共6組,每組接種5頭6周齡健康易感商品豬,每頭滴鼻攻毒3 ml。結(jié)果發(fā)現(xiàn),APP血清1、5、7型的MID分別為1.5×108CFU、1.5×109CFU、6.0×108CFU。結(jié)果為疫苗的效力檢測提供了實驗依據(jù)。為了摸索該三價疫苗的生產(chǎn)工藝,本研究測定疫苗株在體外培養(yǎng)的最佳收獲時間,并通過甲醛(甲醛濃度分為0.1%、0.2%、0.3%、0.4%4組)在不同時間段滅活抗原,篩選最佳滅活條件,對疫苗的最小抗原量和最小免疫量進行測定;并對制備的疫苗進行物理性狀、安全性以及免疫效力進行了檢測。依據(jù)生長曲線的結(jié)果表明,調(diào)整種子液OD600值到0.5,然后按照3.0%的劑加入新培養(yǎng)液,37℃,160 rpm培養(yǎng)5 h-7 h時收獲抗原最佳,此時的代謝產(chǎn)物少,抗原含量高,疫苗更安全;依據(jù)抗原滅活試驗結(jié)果,制定的在實際生產(chǎn)過程中疫苗滅活條件為甲醛濃度0.3%,37℃下160 rpm攪拌15 h;通過最小抗原量試驗結(jié)果測得,疫苗中最小抗原量APP血清1、5、7型分別為為2×109 CFU/ml、4×109 CFU/ml、1×109 CFU/ml,為實際生產(chǎn)過程中確定最低的抗原含量提供了參考依據(jù);通過最小免疫量試驗(結(jié)果與最小抗原量試驗結(jié)果相符),本研究制定的免疫方式為:6周齡頸部肌肉注射1 ml/頭;經(jīng)過對制備的疫苗進行各項檢測,制備的疫苗穩(wěn)定性、安全性均符合相關(guān)標準,免疫三周后對血清1、5、7型菌株的免疫保護率可達90%~100%,效果良好。本研究為針對當前流行的傳染性胸膜肺炎三價疫苗的制備以及臨床應(yīng)用提供了理論和技術(shù)支持。
[Abstract]:In order to understand the causes of pig farm diseases and control the epidemic situation , we found that the main pathogens and their separation rate in pigs were 43.18 % , 31.64 % , 32.85 % and 2.51 % , respectively . The results showed that the serum 1 , 5 , 7 were 1.5 脳 108 CFU / ml , 5.0 脳 108 CFU / ml , 2.0 脳 108 CFU / ml , 5.0 脳 107 CFU / ml , 2.0 脳 107 CFU / ml , 5.0 脳 107 CFU / ml , 2.0 脳 107 CFU / ml and 6.0 脳 108 CFU .
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.28

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 楊楠;徐正進;周永力;;改良TRIZOL法提取高質(zhì)量稻曲病菌總RNA的方法[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2008年11期

2 楊旭夫;彭發(fā)泉;;胸膜肺炎嗜血桿菌的分離和鑒定[J];中國畜禽傳染病;1990年04期

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本文編號：1948932