本文選題：傳染性法氏囊病病毒 + VP基因��； 參考：《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年09期

【摘要】：為研究傳染性法氏囊病(IBD)重組火雞皰疹病毒(HVT)的構(gòu)建策略,以HVT FC126基因組非必需區(qū)UL44~UL45為插入位點(diǎn),構(gòu)建帶有大腸桿菌黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸轉(zhuǎn)移酶基因序列(gpt)標(biāo)記的HVT轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒pUAB-gpt。然后構(gòu)建表達(dá)IBDVAH1株VP2嵌合法氏囊素三肽(BS10)表達(dá)盒并克隆入pUAB-gpt,獲得轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒pUAB-Pec-BS10-VP2-Egpt。將該轉(zhuǎn)移載體與HVT DNA共轉(zhuǎn)染雞胚成纖維細(xì)胞(CEF),通過間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)、IBDV抗體夾心ELISA檢測、Western-blotting分析,結(jié)果顯示,獲得了表達(dá)VP2基因的重組HVT病毒rHVT-Pec-BS10-VP2。將該重組病毒免疫1日齡SPF雞,免疫后第14天,雞群可以檢測到IBDV抗體。免疫后第21天,脾淋巴細(xì)胞增殖活性反應(yīng)顯著。證明IBD重組火雞皰疹病毒構(gòu)建成功。
[Abstract]:In order to study the construction strategy of recombinant turkey herpesvirus (HVT) from infectious bursal disease (IBD), the non-essential region UL44~UL45 of HVT FC126 was used as the insertion site. HVT transfer vector plasmid pUAB-gptwith the sequence of Escherichia coli xanthine-guanine phosphotransferase gene was constructed. Then the chimeric expression box of IBDVAH1 strain VP2 was constructed and cloned into pUAB-gpt.The transfer vector plasmid pUAB-Pec-BS10-VP2-Egptwas obtained. The transfer vector was co-transfected with HVT DNA into chicken embryo fibroblasts. The recombinant HVT virus rHVT-Pec-BS10-VP2was obtained by Western blotting analysis by indirect immunofluorescence assay and sandwich ELISA analysis. The recombinant virus was immunized with 1 day old SPF chickens. On the 14th day after immunization, IBDV antibody could be detected in chickens. On the 21st day after immunization, the proliferative activity of spleen lymphocytes was significant. It was proved that IBD recombinant turkey herpesvirus was successfully constructed.
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所農(nóng)業(yè)部獸用生物制品工程技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國家獸用生物制品工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0500800) 國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272537,31302070,31572504) 江蘇省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(BK20141381,BK20151366) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項(xiàng)目[CX(16)1052]
【分類號】：S852.65

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本文編號：1935326