發(fā)布時間：2018-05-24 20:57

  本文選題：多重PCR + 綿羊痘病毒　； 參考：《動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2017年03期

【摘要】：為了建立鑒別綿羊痘病毒(SPPV)、山羊痘病毒(GTPV)和羊口瘡病毒(ORFV)的多重PCR檢測方法,針對GenBank中3種病毒的基因組序列,合成了3對引物,通過優(yōu)化多重PCR反應(yīng)條件,建立了鑒別檢測3種病毒的多重PCR方法。特異性試驗(yàn)表明,應(yīng)用該方法可分別擴(kuò)增出3種病毒對應(yīng)的目的片段,對大腸埃希菌、沙門菌、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)、豬細(xì)小病毒(PPV)、Vero細(xì)胞、正常羊組織的DNA和滅菌雙蒸水均無擴(kuò)增;敏感性試驗(yàn)表明,該方法最低檢測量分別為30.46pg/μL的綿羊痘病毒、28.9pg/μL的山羊痘病毒和26.94pg/μL的羊口瘡病毒基因組DNA;應(yīng)用本方法對85份臨床病料進(jìn)行檢測,結(jié)果與其他已建立的單項(xiàng)PCR檢測方法結(jié)果一致,說明該方法可以用于臨床上SPPV、GTPV和ORFV的鑒別診斷。
[Abstract]:In order to establish a multiplex PCR method for the identification of sheep poxvirus, goat pox virus and sheep mouth ulcer virus, three pairs of primers were synthesized according to the genomic sequences of three kinds of viruses in GenBank, and the conditions of multiple PCR reaction were optimized. A multiplex PCR method for the identification and detection of three viruses was established. The specific test showed that the corresponding target fragments of three kinds of viruses could be amplified by using this method. The DNA and sterilized water of normal sheep tissues were not amplified for Escherichia coli, Salmonella, porcine circovirus type 2 PCV2 and porcine parvovirus PPV-Vero cells. The sensitivity test showed that the genomic DNA of sheep pox virus (30.46pg/ 渭 L) and sheep mouth sore virus (26.94pg/ 渭 L) were detected by this method, which were 28. 9pg / 渭 L of sheep pox virus and 28. 9pg / 渭 L of 26.94pg/ 渭 L, respectively, and 85 clinical samples were detected by this method. The results were consistent with those of other established single PCR detection methods, which indicated that this method could be used in the differential diagnosis of ORFV and SPPV.
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院;
【基金】：陜西省重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新鏈項(xiàng)目(2016KTZDNY02-06) 陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與攻關(guān)項(xiàng)目(2016NY-092) 西北農(nóng)林科技大學(xué)試驗(yàn)示范站(基地)科技成果推廣項(xiàng)目(TGZX2015-32) 陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃項(xiàng)目(2016KTZDNY02-05)
【分類號】：S852.654

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本文編號：1930519