流行性乙型腦炎病毒E蛋白多表位肽在畢赤酵母中分泌表達(dá)及其免疫原性研究
發(fā)布時(shí)間:2018-05-21 17:29
本文選題:流行性乙型腦炎病毒 + 多表位疫苗; 參考:《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年06期
【摘要】:為構(gòu)建流行性乙型腦炎病毒(JEV)E蛋白多表位疫苗,本研究將人工合成的優(yōu)化后的E蛋白多表位肽(MP)序列克隆入酵母表達(dá)載體p PICZα-A,構(gòu)建分泌型重組酵母表達(dá)質(zhì)粒p PICZ-MP,經(jīng)SacⅠ酶切線性化后電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入畢赤酵母X-33,陽(yáng)性重組子經(jīng)甲醇誘導(dǎo)表達(dá),親和層析純化重組蛋白(rMP)。通過(guò)測(cè)定rMP免疫小鼠的抗體水平、抗體亞型、中和抗體和CTL,以評(píng)價(jià)該多表位疫苗在小鼠模型上的免疫原性。結(jié)果表明:成功構(gòu)建了表達(dá)JEV E蛋白多表位抗原的重組酵母菌株X33(pPICZ-MP),能分泌表達(dá)多表位肽r MP。純化后的r MP免疫小鼠產(chǎn)生了較強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng),其中和抗體水平、CTL活性均與活病毒疫苗組差異不顯著(p0.05),且能保護(hù)小鼠免受致死量JEV的攻擊。構(gòu)建的JEV E蛋白多表位疫苗具有良好的免疫原性,能夠刺激小鼠產(chǎn)生特異性的細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答反應(yīng),為流行性乙型腦炎多表位疫苗研制提供新的思路。
[Abstract]:In order to construct a multiepitope vaccine of Japanese encephalitis virus (JEV) E protein, In this study, the optimized sequence of E protein polyepitope peptide was cloned into the yeast expression vector p PICZ 偽 -A. the secreting recombinant yeast expression plasmid pPICZ-MPA was constructed. The recombinant yeast expression plasmid pPICZ-MPA was transformed into Pichia pastoris X-33 by Sac 鈪,
本文編號(hào):1920112
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