牛奶及飼料中主要霉菌毒素對(duì)Caco-2細(xì)胞毒性作用的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-05-17 15:29
本文選題:黃曲霉毒素M1 + 赭曲霉毒素A; 參考:《甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:本試驗(yàn)結(jié)合我國(guó)食品及飼料中霉菌毒素的污染現(xiàn)狀,研究幾種具有代表性的霉菌毒素聯(lián)合作用對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞(Caco-2)細(xì)胞毒性和氧化損傷以及DNA損傷的影響,共分為2個(gè)試驗(yàn)。試驗(yàn)Ⅰ:黃曲霉毒素M1(AFM1),作為2B類的人類致癌物,主要存在于牛奶中并且對(duì)人類健康有危害作用。有實(shí)驗(yàn)研究AFM1和其他毒素混合在一起的毒性作用,然而,相比于其來(lái)源毒素黃曲霉毒素B1(AFB1)的毒性研究,關(guān)于AFM1的毒性研究是非常少的。本實(shí)驗(yàn)首次研究了AFM1與赭曲霉毒素A(OTA),玉米赤霉烯酮(ZEA)和α-玉米赤霉烯醇(α-ZOL)單獨(dú)和混合對(duì)人的結(jié)腸癌細(xì)胞(Caco-2)交互作用效應(yīng)。單獨(dú)毒素對(duì)細(xì)胞活性的抑制,表現(xiàn)出時(shí)間和濃度依賴性。通過(guò)MTT法檢測(cè)的結(jié)果表明AFM1在72小時(shí)與OTA有相似的細(xì)胞毒性,其IC50值為4.10μM,這比ZEA和α-ZOL毒性更強(qiáng)。所有的毒素混合毒性的效果如下所示:OTA+α-ZOLZEA+α-ZOLOTA+ZEAAFM1+ZEAAFM1+α-ZOLAFM1+OTAOTA+ZEA+α-ZOLAFM1+ZEA+OTAAFM1+ZEA+α-ZOLAFM1+OTA+α-ZOLAFM1+ZEA+OTA+α-ZOL。應(yīng)用等效應(yīng)線圖解法分析結(jié)果表明,AFM1除了與α-ZOL表現(xiàn)出拮抗作用以外,與其他幾種毒素都表現(xiàn)出加性和協(xié)同效應(yīng)。協(xié)同效應(yīng)在所有的毒素混在一起時(shí),表現(xiàn)的最強(qiáng)(CI=0.17±0.05 at IC25)。試驗(yàn)Ⅱ:本試驗(yàn)旨在研究不同劑量黃曲霉毒素(AFB1)和黃曲霉毒素(AFM1)對(duì)Caco-2細(xì)胞毒性的氧化損傷,DNA損傷及其可能機(jī)制。黃曲霉毒素B1(AFB1)和黃曲霉毒素M1(AFM1)是自然界普遍存在的霉菌毒素,并且經(jīng)常性的出現(xiàn)在食物和飼料中,對(duì)人類的健康有很大的風(fēng)險(xiǎn)。很少有文獻(xiàn)報(bào)道AFB1和AFM1對(duì)人類腸道的毒性影響作用。因此,我們的實(shí)驗(yàn)來(lái)研究這兩種毒素對(duì)Caco-2細(xì)胞的毒性作效果,尤其是與人類成熟的腸道細(xì)胞相似的分化后的Caco-2細(xì)胞。用AFB1和AFM1處理兩種不同生長(zhǎng)狀態(tài)未分化和分化后的細(xì)胞,處理時(shí)間直到72小時(shí)。檢測(cè)了細(xì)胞活性,乳酸脫氫酶(LDH)釋放,活性氧(ROS)的含量以及DNA的損傷。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明AFB1和AFM1都顯著性的將低了兩種細(xì)胞的細(xì)胞活性,顯著增加了LDH含量,活性氧的含量以及DNA的損傷,并表現(xiàn)出時(shí)間和濃度依賴性(p0.05)。與AFM1相比,AFB1對(duì)兩種細(xì)胞顯示出了更強(qiáng)的毒性作用。所有這些結(jié)果可能都與細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)量相關(guān),過(guò)多的ROS可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜及DNA鏈的損傷。此外,我們發(fā)現(xiàn)分化后的細(xì)胞對(duì)毒素更加敏感,這可能是因?yàn)樵诜只^(guò)程中酶的變化相關(guān)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果首次在體外證明了AFB1和AFM1對(duì)腸道細(xì)胞的DNA損傷,尤其是對(duì)分化后的Caco-2細(xì)胞。
[Abstract]:Based on the current situation of mycotoxin contamination in food and feed in China, the effects of several representative mycotoxins on the cytotoxicity, oxidative damage and DNA damage of human colon cancer cell line (Caco-2) were studied. Test 鈪,
本文編號(hào):1901881
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