本文選題：豬流行性腹瀉病毒 + 野毒株�。� 參考：《中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)》2017年01期

【摘要】：為建立豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的快速鑒別檢測(cè)方法,針對(duì)PEDV基因序列設(shè)計(jì)3對(duì)特異性引物。第1對(duì)引物擴(kuò)增野毒株(經(jīng)典株、變異株)和疫苗株ORF3基因198 bp和148 bp片段;第2對(duì)引物擴(kuò)增經(jīng)典株和疫苗株S基因429 bp片段;第3對(duì)引物擴(kuò)增變異株S基因274 bp片段。經(jīng)過反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了能夠同時(shí)檢測(cè)并區(qū)分PEDV經(jīng)典株、變異株及疫苗株的多重RT-PCR檢測(cè)方法。該方法可以特異地檢測(cè)PEDV,而與豬的其他重要病原FMDV、CSFV、PRRSV、TGEV、PRo V、PCV2、PRV無交叉反應(yīng);對(duì)重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的檢出下限為2.62×10~2copies/L;重復(fù)試驗(yàn)獲得了均勻一致的結(jié)果。應(yīng)用該方法檢測(cè)336份臨床病料,PEDV陽性的120份,其中變異株96份、疫苗株21份、變異株和疫苗株混合感染3份。結(jié)果表明,本研究所建立的多重RT-PCR檢測(cè)方法特異性強(qiáng)、敏感性高、重復(fù)性好,可用于PEDV經(jīng)典株、變異株和疫苗株的快速鑒別檢測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a rapid method for identification and detection of porcine epidemic diarrhea virus (PEV), three pairs of specific primers were designed for PEDV gene sequence. The first pair of primers amplified 198bp and 148bp fragments of ORF3 gene from wild virus strain (classical strain, variant strain) and vaccine strain, the second pair of primers amplified S gene 429bp fragment of classical strain and vaccine strain, and the third pair of primers amplified S274bp fragment of mutant strain. After optimization of reaction conditions, a multiplex RT-PCR detection method was established to detect and distinguish PEDV classical strains, variant strains and vaccine strains simultaneously. This method can specifically detect PEV, but has no cross reaction with other important pathogens of swine, such as FMDV / CSFV, PRRV / TGEV / PRO / VGV _ 2 / PRV, and the detection limit of recombinant plasmid standard is 2.62 脳 10 ~ (-2) copi _ (2) / L / L, and the result of repeated test is uniform and consistent. The method was used to detect 120 cases of PEDV positive in 336 clinical samples, including 96 variant strains, 21 vaccine strains and 3 mixed infection strains. The results showed that the multiplex RT-PCR assay developed in this study was highly specific, sensitive and reproducible, and could be used for rapid identification and epidemiological investigation of classical PEDV strains, variant strains and vaccine strains.
【作者單位】： 廣西動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：廣西水產(chǎn)畜牧科技項(xiàng)目(桂漁牧科201528017) 廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(桂科轉(zhuǎn)14125004-22)
【分類號(hào)】：S852.651

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4 黃翠芬;關(guān)于腹瀉疫苗人體安全性及效果的評(píng)價(jià)問題[J];生物技術(shù)通訊;1994年01期

5 郭仁;;鑒別來自疫苗的和野型脊髓灰質(zhì)炎病毒株的參數(shù)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物制品分冊(cè);1980年01期

6 ;疫苗[J];生物技術(shù)通報(bào);1985年05期

7 ;疫苗[J];生物技術(shù)通報(bào);1993年03期

8 ;疫苗[J];生物技術(shù)通報(bào);1986年10期

9 ;疫苗[J];生物技術(shù)通報(bào);1994年06期

10 神谷 齊;劉光第;;疫苗的種類[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;1986年11期

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1 黃瑩;;中國(guó)疫苗株狂犬病毒反向遺傳系統(tǒng)的建立和初步應(yīng)用[A];第3屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

2 陳瑞愛;鄧月嫦;吳兆軍;;不同法氏囊株的免疫對(duì)比試驗(yàn)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)會(huì)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2000年

3 劉靜靜;王明麗;甘霖;陳敬賢;;水痘帶狀皰疹病毒臨床分離病毒株基因型別分析以及與Oka疫苗株的區(qū)別[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

4 潘志明;焦新安;趙霞;李小進(jìn);甘軍紀(jì);劉文博;張揚(yáng);高崧;張如寬;劉秀梵;;減毒雞沙門氏菌97A疫苗株安全性和免疫效力試驗(yàn)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)會(huì)分會(huì)第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2000年

5 王曉夏;吳清民;任婕;牛建蕊;李娜;楊羽;劉文曉;劉文娟;;牛布魯氏菌疫苗株轉(zhuǎn)座子突變文庫構(gòu)建及毒力基因的初步鑒定[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

6 施建忠;田國(guó)彬;李雁冰;陳化蘭;;遺傳重組高繁殖力疫苗株H5N2(H5/PR8)病毒的構(gòu)建和鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2004學(xué)術(shù)年會(huì)暨第五屆全國(guó)畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2004年

7 李萌;華晶忠;曹學(xué)鳳;周君;金香淑;;豬傳染性胸膜肺炎疫苗的研究進(jìn)展[A];吉林省畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2007學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2007年

8 顧萬軍;黃良宗;王淑敏;冼瓊珍;麥根沛;陳建紅;;NDV本地分離株與疫苗株(Iasota)抗原交叉性研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下）[C];2003年

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3 早報(bào)記者 陸玫;H7N9疫苗“種子”首次研發(fā)成功[N];東方早報(bào);2013年

4 記者 張樂;我科學(xué)家成功研發(fā)H7N9疫苗株[N];新華每日電訊;2013年

5 吉林大學(xué) 丁壯 教授 博士生導(dǎo)師;養(yǎng)殖者對(duì)所使用的疫苗了解幾分？[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2007年

6 特約記者 朱海洋 記者 陸健;我國(guó)成功研發(fā)H7N9病毒疫苗株[N];光明日?qǐng)?bào);2013年

7 特約記者 王其玲;人感染H7N9病毒疫苗株研發(fā)成功[N];健康報(bào);2013年

8 記者 馬波;50余載提供50億人份“小兒麻痹”疫苗[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

9 曹紅翠;協(xié)同創(chuàng)新助力H7N9疫苗株成功研發(fā)[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

10 任沁沁;中國(guó)自主研制疫苗或5月上市[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2014年

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1 陳家锃;HP-PRRSV疫苗株HuN4-F112感染PAM效率降低的分子機(jī)理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

2 童俊容;H5亞型禽流感高產(chǎn)疫苗株構(gòu)建、生物學(xué)特性及其免疫效果的研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 李彥鋒;重組鼠精子抗原疫苗株的構(gòu)建及其避孕效應(yīng)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

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1 陳靜;豬流行性腹瀉病毒變異株與經(jīng)典疫苗株S蛋白免疫原性差異分析[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 夏靜;CVI988/Rispens疫苗對(duì)MDV四川NC株的免疫保護(hù)的研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 吳秋華;吉林省水痘—帶狀皰疹病毒基因型別鑒定及疫苗株全基因組測(cè)定分析[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2016年

4 陳建飛;雞傳染性支氣管炎病毒中國(guó)主要疫苗株的分子特性[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2005年

5 劉海俠;減毒雞沙門氏菌疫苗株97A的安全性及其免疫生物學(xué)特性研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2004年

6 孫蘇靜;噴鼻重組RSV疫苗株制備及免疫效果初步評(píng)價(jià)[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2014年

7 譚鵬飛;基于PCR方法布魯菌疫苗株與野生菌株鑒別診斷方法的建立[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

8 張鋒;馬立克氏病毒“814”疫苗株全基因組序列測(cè)定及分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

9 汪舟佳;布魯氏菌基因標(biāo)記疫苗株的構(gòu)建及鑒別PCR方法研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2008年

10 吳小偉;MDCK細(xì)胞上高產(chǎn)的H5N1亞型禽流感疫苗株的構(gòu)建及初步評(píng)價(jià)[D];揚(yáng)州大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：1889816