本文選題：鴨坦布蘇病毒 + 抗原表位　； 參考：《畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年10期

【摘要】：旨在建立鴨坦布蘇病毒(DTMUV)的特異性血清學(xué)診斷方法。本研究以純化的單克隆抗體1A5為固相篩選分子,利用噬菌體展示技術(shù)鑒定DTMUV囊膜(E)蛋白的特異性抗原表位,并利用DNAStar分析抗原表位序列在DTMUV中保守性和與其他黃病毒的E蛋白相應(yīng)位點(diǎn)的氨基酸序列相似性。結(jié)果成功篩選到DTMUV E蛋白的一個(gè)線性抗原表位_(87)YAEYI_(91),該抗原表位在DTMUV中具有高度的保守性,無(wú)氨基酸位點(diǎn)差異,而與其他黃病毒E蛋白相應(yīng)位點(diǎn)的氨基酸序列不具有相似性。Dot-Blotting結(jié)果表明表位_(87)YAEYI_(91)與DTMUV陽(yáng)性血清具有良好的親和性,而與JEV、DENV、WNV等黃病毒陽(yáng)性血清間不出現(xiàn)交叉反應(yīng),可見(jiàn)抗原表位_(87)YAEYI_(91)為DTMUV所特有的抗原表位。利用DTMUV特異性抗原表位87YAEYI_(91)建立Epitope-ELISA血清學(xué)診斷方法并對(duì)126份鴨血清樣品進(jìn)行檢測(cè),以中和試驗(yàn)作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,結(jié)果顯示Epitope-ELISA檢測(cè)方法的相對(duì)特異性為100%,相對(duì)敏感度為96%,并且Epitope-ELISA與其他黃病毒血清間不出現(xiàn)交叉反應(yīng)性,表明本研究建立的Epitope-ELISA檢測(cè)方法是一種特異的、靈敏的ELISA血清學(xué)診斷方法。
[Abstract]:The aim of this study was to establish a specific serological method for the diagnosis of duck tambusuvirus (DTMUV). In this study, the purified monoclonal antibody (1A5) was used as a solid phase screening molecule to identify the specific epitopes of DTMUV cystoma protein by phage display technique. DNAStar was used to analyze the conserved antigenic epitopes in DTMUV and the amino acid sequence similarity with the corresponding sites of E protein of other yellow viruses. Results A linear epitope of DTMUV E protein was successfully screened. The results of Dot-blotting showed that the epitope of tip87YAEYII-91) had good affinity with DTMUV positive serum, but had no cross reaction with other yellow virus positive sera, such as JEV / DENVWNV. It can be seen that the epitope of DTMUV is the epitope of DTMUV. The method of Epitope-ELISA serological diagnosis was established by using the epitope of DTMUV specific antigen 87YEYI. 126 duck serum samples were detected, and the neutralization test was used as the standard. The results showed that the relative specificity of Epitope-ELISA assay was 100 and the relative sensitivity was 96. There was no cross reactivity between Epitope-ELISA and other yellow virus sera, which indicated that the Epitope-ELISA detection method established in this study was a specific and sensitive method for the diagnosis of ELISA.
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所獸醫(yī)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：十三五重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目(2016YFD0500100) 國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31670153) 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院協(xié)同創(chuàng)新項(xiàng)目(CAASXTCX2016011-04-9)
【分類(lèi)號(hào)】：S852.65

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本文編號(hào)：1888069