維氏氣單胞菌JLL-1株外膜蛋白的原核表達(dá)及其免疫原性檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間:2018-05-14 02:42
本文選題:維氏氣單胞菌 + 外膜蛋白AⅠ; 參考:《中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年11期
【摘要】:為研究維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本試驗(yàn)對(duì)A.veronii的OmpAⅠ基因進(jìn)行克隆,構(gòu)建了原核表達(dá)質(zhì)粒pET-30a(+)-OmpAⅠ,并轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3),將其表達(dá)后純化重組蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot分析鑒定。將滅活苗、弗氏佐劑(OmpAⅠ)、純化蛋白及PBS緩沖液分別免疫鯉魚后,檢測(cè)每周各試驗(yàn)組魚體血清非特異性免疫指標(biāo)(酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力)及特異性IgM抗體水平變化情況,并于加強(qiáng)免疫2周后對(duì)鯉魚進(jìn)行攻毒保護(hù)性試驗(yàn)。結(jié)果顯示:重組蛋白免疫鯉魚后能產(chǎn)生明顯的免疫反應(yīng),保護(hù)率在77%以上;受免鯉魚血清中IgM抗體水平、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力活力較對(duì)照組有顯著提高。結(jié)果表明,重組蛋白OmpAⅠ具有較好的免疫原性和保護(hù)作用,為進(jìn)一步研究外膜蛋白基因工程疫苗的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the immunogenicity of outer membrane protein (OMP) of Aeromonas veronii, the OmpA 鈪,
本文編號(hào):1885998
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