本文選題：鴨型甲肝病毒亞型 + 單克隆抗體　； 參考：《中國畜牧獸醫(yī)》2017年02期

【摘要】：為制備抗鴨1型甲肝病毒亞型(DHAV-1a)結構蛋白VP1的單克隆抗體(MAbs),本研究以pGEX-VP1重組蛋白免疫BALB/c小鼠,同時以純化濃縮的全病毒作為包被抗原,建立了篩選抗VP1蛋白陽性雜交瘤細胞株的間接ELISA方法,經融合、篩選制備雜交瘤細胞及鑒定MAbs的穩(wěn)定性、特異性、腹水效價和中和活性等生物學活性,獲得了2株持續(xù)且穩(wěn)定分泌抗體的雜交瘤細胞(1A2和5G3)。MAbs腹水ELISA效價分別為1∶3.2×104和1∶2.0×106。亞類鑒定均為IgG1/κ型。Western blotting結果顯示,2株MAbs均能與DHAV-1aVP1蛋白和DHAV-1a全病毒發(fā)生特異性反應。特異性試驗結果顯示2株MAbs能與鴨1型甲肝病毒(DHAV-1)和DHAV-1a發(fā)生交叉反應。中和試驗結果顯示5G3株具有中和活性。結果表明2株MAbs的ELISA效價高、特異性強、穩(wěn)定性好,均能與DHAV-1和DHAV-1a全病毒發(fā)生特異性反應,其中一株具有中和活性。
[Abstract]:In order to prepare the monoclonal antibody against DHAV-1a) structural protein VP1 of duck hepatitis A virus (DHAV-1a), we immunized BALB/c mice with pGEX-VP1 recombinant protein and purified concentrated whole virus as coating antigen. An indirect ELISA method for screening hybridoma cell lines with anti VP1 protein was established. After fusion, hybridoma cells were prepared, and their biological activities such as stability, specificity, ascites titer and neutralization activity were identified, including the stability, specificity, ascites titer and neutralization activity of MAbs. The ELISA titers of two hybridoma cells with persistent and stable antibody secretion were 1: 3.2 脳 10 ~ 4 and 1: 2.0 脳 10 ~ 6, respectively, and the ELISA titers of 5G3).MAbs ascites were 1: 3.2 脳 10 ~ 4 and 1: 2.0 脳 10 ~ 6, respectively. The results of IgG1/ 魏 type. Western blotting showed that the two strains of MAbs could react specifically with DHAV-1aVP1 protein and DHAV-1a virus. The results of specificity test showed that two strains of MAbs could cross react with DHAV-1 and DHAV-1a. Neutralization test showed that 5G3 strain had neutralization activity. The results showed that the two MAbs strains had high ELISA titer, strong specificity, good stability, and could react specifically with DHAV-1 and DHAV-1a viruses, and one of them had neutralizing activity.
【作者單位】： 福建省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所;福建省畜禽疫病防治工程技術研究中心;福建省禽病防治重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金(31472222) 現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項(CARS-43) 福建省公益類科研院所專項(2014R1023-3、2015R1023-3和2016R1102) 福建省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所基金(MYQJ2015-6) 福建省優(yōu)良蛋鴨品種與設施化養(yǎng)殖創(chuàng)新產業(yè)化工程項目(2014-2016)
【分類號】：S852.65

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前9條

1 傅秋玲;陳珍;黃瑜;傅光華;陳翠騰;萬春和;程龍飛;陳紅梅;施少華;林建生;;鴨1型甲肝病毒亞型的鑒定[J];中國獸醫(yī)雜志;2015年07期

2 傅光華;黃瑜;傅秋玲;程龍飛;萬春和;施少華;陳紅梅;林建生;林芳;;致胰腺泛黃鴨1型甲肝病毒全基因組分子特征[J];微生物學報;2014年09期

3 傅秋玲;傅光華;陳紅梅;施少華;陳珍;程龍飛;萬春和;林建生;黃瑜;;胰腺炎型鴨1型甲肝病毒結構蛋白VP1基因的克隆和表達[J];福建農業(yè)學報;2014年05期

4 陳珍;傅秋玲;陳紅梅;傅光華;施少華;程龍飛;萬春和;林建生;黃瑜;;胰腺型、經典型鴨1型甲肝病毒對雛鴨的致病性差異[J];福建農業(yè)學報;2013年10期

5 傅光華;陳紅梅;黃瑜;施少華;彭春香;江斌;程龍飛;萬春和;傅秋玲;林建生;林芳;;雛番鴨胰腺型鴨1型甲肝病毒分離鑒定及VP1基因分析[J];福建農業(yè)學報;2012年09期

6 李曉軍;張婷婷;孟凡依;劉明;李剛;張云;;抗Ⅰ型鴨肝炎病毒單克隆抗體的制備及其生物學特性鑒定[J];中國預防獸醫(yī)學報;2011年06期

7 周珍輝;陳萬榮;周育森;向雙云;曹金元;李玉冰;楊久仙;曹授俊;田璐;張浩;;鴨肝炎病毒現(xiàn)場分離株單克隆抗體的研制[J];湖南農業(yè)大學學報(自然科學版);2011年01期

8 施少華;程龍飛;傅光華;陳紅梅;陳珍;楊維星;蘇敬良;黃瑜;;鴨肝炎病毒新血清型基因組序列分析[J];微生物學報;2009年03期

9 楊萍萍;宋敏訓;艾武;馬秀麗;崔言順;;鴨肝炎病毒單克隆抗體的研制[J];中國預防獸醫(yī)學報;2006年02期

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 傅秋玲;劉偉;黃瑜;傅光華;萬春和;程龍飛;陳紅梅;施少華;劉榮昌;陳珍;陳翠騰;林建生;;鴨1型甲肝病毒亞型VP1蛋白單克隆抗體的研制及鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī);2017年02期

2 盧榮輝;劉小龍;肖隆華;胡小榕;祁保民;;一例雛番鴨感染鴨1型甲肝病毒的診斷[J];福建畜牧獸醫(yī);2017年01期

3 武軍元;黃忠武;康強;姚禮文;;新疆阿克蘇地區(qū)溫宿縣稻田養(yǎng)鴨肝炎病毒的分離與鑒定[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2016年24期

4 陳翠騰;程龍飛;傅光華;萬春和;劉榮昌;傅秋玲;陳珍;朱春華;陳紅梅;施少華;黃瑜;;一例鴨1型甲肝病毒和11型鴨疫里默氏桿菌混合感染的診斷及其病原的分離鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī);2016年11期

5 傅光華;程龍飛;溫名根;施少華;陳翠騰;傅秋玲;陳紅梅;萬春和;劉榮昌;林群群;黃瑜;;雛番鴨基因IX型禽1型副黏病毒分離鑒定及F基因序列分析[J];中國獸醫(yī)雜志;2016年05期

6 陳珍;祁保民;傅秋玲;陳紅梅;傅光華;施少華;程龍飛;萬春和;朱春華;劉榮昌;黃瑜;;胰腺型鴨1型甲肝病毒人工感染雛半番鴨的組織病理學觀察[J];福建農業(yè)學報;2015年12期

7 銀鳳桂;李晶;張爽;余萌;張萬林;范國兵;董秀凱;劉文軍;;鴨病毒性肝炎二價滅活疫苗(DHAV-SH和DHAV-FS株)的制備和評價[J];生物工程學報;2015年11期

8 李天芝;于新友;王金良;;鴨肝炎病毒基因CRT-PCR快速檢測型和A型一步法雙重方法的建立和應用[J];養(yǎng)禽與禽病防治;2015年11期

9 于新友;李天芝;沈志強;;分子生物學技術在鴨肝炎病毒檢測中應用研究進展[J];家禽科學;2015年09期

10 王安平;朱善元;王永娟;;鴨甲型肝炎病毒1型3C基因的原核表達與多抗的制備[J];江蘇農業(yè)科學;2015年08期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 傅光華;黃瑜;傅秋玲;程龍飛;萬春和;施少華;陳紅梅;林建生;林芳;;致胰腺泛黃鴨1型甲肝病毒全基因組分子特征[J];微生物學報;2014年09期

2 傅秋玲;傅光華;陳紅梅;施少華;陳珍;程龍飛;萬春和;林建生;黃瑜;;胰腺炎型鴨1型甲肝病毒結構蛋白VP1基因的克隆和表達[J];福建農業(yè)學報;2014年05期

3 陳珍;傅秋玲;陳紅梅;傅光華;施少華;程龍飛;萬春和;林建生;黃瑜;;胰腺型、經典型鴨1型甲肝病毒對雛鴨的致病性差異[J];福建農業(yè)學報;2013年10期

4 陳紅梅;施少華;程龍飛;傅光華;萬春和;黃瑜;;鵝源鴨1型甲肝病毒的分離與鑒定[J];福建農業(yè)學報;2012年11期

5 傅光華;陳紅梅;黃瑜;施少華;彭春香;江斌;程龍飛;萬春和;傅秋玲;林建生;林芳;;雛番鴨胰腺型鴨1型甲肝病毒分離鑒定及VP1基因分析[J];福建農業(yè)學報;2012年09期

6 任麗倩;李晶;畢玉海;陳璨;張大丙;劉文軍;;鴨甲型病毒性肝炎的研究進展[J];生物工程學報;2012年07期

7 高駿;孫鳳萍;;鴨肝炎病毒Ⅰ型基因片段的原核表達及單克隆抗體的制備[J];上海農業(yè)學報;2012年02期

8 劉友生;彭春香;傅光華;侯東軍;施少華;萬春和;程龍飛;陳紅梅;林建生;林芳;黃瑜;;2010～2011年中國部分地區(qū)禽坦布蘇病毒感染調查及分子變異分析[J];中國動物傳染病學報;2012年01期

9 張艷芳;羅薇;劉內生;劉群;;鴨肝炎病毒的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2011年07期

10 施少華;程龍飛;江斌;萬春和;傅光華;陳紅梅;林芳;林建生;蘇敬良;黃瑜;;韓國型鴨肝炎病毒福建株的分離與鑒定[J];畜牧與獸醫(yī);2010年12期

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前5條

1 韓梅;艾滋病病毒亞型分析及研究意義[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2005年12期

2 崔超英,卓瑪,曲尼,柴旦,施錦銹,惠利健;西藏地區(qū)乙型肝炎病毒亞型[J];西藏科技;2002年08期

3 王全立,馬立人,蔣豫圖;乙型肝炎病毒亞型基因分類方法及其應用[J];臨床肝膽病雜志;1992年03期

4 范子文;;制備甲型流感病毒亞型特異性抗血清的新方法[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;1982年02期

5 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數據庫 前1條

1 謝建生;李輝;傅華陽;蔡筠;耿茜;徐曉昕;吳維清;郝穎;;人類乳頭瘤病毒亞型dHPLC基因分型方法的建立[A];中國優(yōu)生優(yōu)育協(xié)會第四屆全國學術論文報告會暨基因科學高峰論壇論文專輯[C];2008年

中國重要報紙全文數據庫 前1條

1 記者 盧素仙;葛蘭素史克為宮頸癌患者送福音[N];科技日報;2007年

中國博士學位論文全文數據庫 前1條

1 童，

本文編號：1880065