本文選題：荷斯坦奶牛 + 妊娠早期��； 參考：《甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：本研究采用二維凝膠電泳(2-DE)結(jié)合MADIL-TOF-TOF串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)荷斯坦奶牛妊娠早期血漿進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析鑒定,發(fā)現(xiàn)了6種差異蛋白在妊娠后表達(dá)量上調(diào),分別是凝集素1前體、轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白前體、3,5-二碘水楊酸絡(luò)合的牛血清白蛋白的晶體結(jié)構(gòu)的A鏈、白蛋白、未命名蛋白產(chǎn)物及結(jié)合珠蛋白-25同源物1前體。凝集素1前體的表達(dá)量在發(fā)情及配種后呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì);轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白前體,白蛋白的表達(dá)量在發(fā)情及配種后呈先升高后下降再升高的趨勢(shì);3,5-二碘水楊酸絡(luò)合的牛血清白蛋白的晶體結(jié)構(gòu)的A鏈的表達(dá)量不斷增加,未命名蛋白產(chǎn)物、結(jié)合珠蛋白-25同源物1前體的含量是先升高后保持穩(wěn)定。妊娠期這6種蛋白的含量均高于妊娠前,這些蛋白在妊娠早期血漿中可能與免疫應(yīng)答、甲狀腺激素轉(zhuǎn)運(yùn)、防止淀粉樣纖維形成和碘的運(yùn)輸有關(guān)。采用相同方法對(duì)荷斯坦奶牛分娩后不同時(shí)期的血漿進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析鑒定,發(fā)現(xiàn)5種差異蛋白。結(jié)合珠蛋白前體、結(jié)合珠蛋白在分娩后表達(dá)量先升高后下降至與分娩當(dāng)天相近。免疫球蛋白γ2鏈C區(qū)(克隆32.2)在分娩后表達(dá)量先下降再升高之后保持一個(gè)平穩(wěn)的趨勢(shì)。分娩后3,5-二碘水楊酸絡(luò)合的牛血清白蛋白的晶體結(jié)構(gòu)的A鏈和B鏈表達(dá)量低于妊娠后45天的含量且在分娩后表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定。這5種蛋白可能分別與產(chǎn)后應(yīng)激、免疫應(yīng)答和物質(zhì)運(yùn)輸有關(guān)。采用二維凝膠電泳(2-DE)結(jié)合MADIL-TOF-TOF串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)荷斯坦奶牛妊娠早期乳汁進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析鑒定,發(fā)現(xiàn)5個(gè)差異蛋白點(diǎn),分別是:3,5-二碘水楊酸絡(luò)合的牛血清白蛋白的晶體結(jié)構(gòu)的A鏈、免疫球蛋白γ1重鏈恒定區(qū)、免疫球蛋白G1重鏈恒定區(qū)、白蛋白、蛋白胨成分3。3,5-二碘水楊酸絡(luò)合的牛血清白蛋白的晶體結(jié)構(gòu)的A鏈在乳汁中含量的變化趨勢(shì)為先降低再升高后降低。免疫球蛋白G1重鏈恒定區(qū)和免疫球蛋白γ1重鏈恒定區(qū)表達(dá)量顯著降低,之后基本保持穩(wěn)定的趨勢(shì)。蛋白胨3的表達(dá)量雖有波動(dòng),但是妊娠早期高于發(fā)情當(dāng)天。這些蛋白可能與物質(zhì)運(yùn)輸、免疫應(yīng)答和抗菌有關(guān)。采用相同方法對(duì)荷斯坦奶牛分娩后不同時(shí)期乳汁進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析鑒定,發(fā)現(xiàn)8種差異蛋白,分別是:α-S2酪蛋白前體、β-酪蛋白、κ-酪蛋白前體、免疫球蛋白重鏈前體、白蛋白、血清白蛋白前體、cGMP磷酸二酯酶的α亞基、角蛋白I型細(xì)胞骨架10。α-S2酪蛋白前體只在分娩當(dāng)天乳樣中檢測(cè)到,β-酪蛋白在分娩后7天和分娩后35天檢測(cè)到,且在分娩后35天的表達(dá)量比分娩后7天高,κ-酪蛋白前體在分娩當(dāng)天表達(dá)量最高,之后表達(dá)量快速下降之后保持平穩(wěn)。免疫球蛋白重鏈前體存在于分娩后7、15、28及35天的乳樣中,雖有波動(dòng),但在分娩后35天的乳樣中表達(dá)量最低。血清白蛋白前體在分娩后7天到分娩后35天表達(dá)量表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì),白蛋白在分娩后7天到分娩后35天的表達(dá)量呈先降低后升高再降低的趨勢(shì),分娩后35天的表達(dá)量最低。cGMP磷酸二酯酶的α亞基在分娩后7、15及28天的表達(dá)量呈先上升后下降的趨勢(shì)。角蛋白I型細(xì)胞骨架10在分娩當(dāng)天到分娩后28天表達(dá)量的變化趨勢(shì)平穩(wěn)。這些蛋白可能與初乳的被動(dòng)免疫、物質(zhì)運(yùn)輸和產(chǎn)奶有關(guān)。
[Abstract]:In this study, two dimensional gel electrophoresis (2-DE) combined with MADIL-TOF-TOF tandem mass spectrometry was used to identify the proteomic analysis of plasma in the early pregnancy of Holstein cows. It was found that the expression of 6 different proteins increased after pregnancy, which were the 1 agglutinin precursor, the thyroxine precursor, and the 3,5- two iodo salicylic acid complexed bovine serum albumin. The A chain of crystal structure, albumin, unnamed protein products and 1 precursors of binding globin -25 homology. The expression of the 1 agglutinin precursor showed a tendency to rise first and then decline after the estrus and mating; the expression of the HP precursor was increased first and then decreased after the oestrus and distribution; 3,5- two iodide The expression of A chain in the crystal structure of acid complex bovine serum albumin is increasing, the content of the unnamed protein product, the content of the 1 precursor of the binding globin -25 homologue is first and then stable. The content of these 6 proteins in pregnancy is higher than that before pregnancy. These proteins may be associated with the immune response and thyroid hormone transport in the plasma in the early pregnancy. To prevent the formation of amyloid fiber from the transport of iodine. The same method was used to identify the plasma of Holstein cows at different periods after childbirth. 5 differential proteins were found. Combined with globin precursor, the expression of combined globin decreased to the same day after childbirth to the day of childbirth. The 2 chain C area of immunoglobulin gamma (clone 32.2) the expression of 3,5- two iodialicylic acid complex after labor after childbirth is a stable trend. The A chain and B chain expression of the crystal structure of bovine serum albumin complex after delivery are lower than 45 days after pregnancy and are relatively stable after delivery. These 5 proteins may be respectively associated with postpartum stress and immune response, respectively. A two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) combined with MADIL-TOF-TOF tandem mass spectrometry was used to identify the proteomic analysis of the early pregnancy milk of Holstein cows. 5 differences were found: the A chain of the crystalline structure of bovine serum albumin complex with 3,5- two iodosalicylic acid, the immunoglobulin gamma 1 heavy chain constant region, and the immunoglobulin gamma. Pestis G1 heavy chain constant region, albumin, peptone composition 3.3,5- two iodosalicylic acid complexed with bovine serum albumin, the crystal structure of bovine serum albumin, the change trend of the content of A chain in milk was decreased first and then decreased. The expression of immunoglobulin G1 heavy chain constant region and immunoglobulin gamma heavy chain constant region decreased significantly, then basically maintained Stable trend. Although the expression of peptone 3 is fluctuating, but early pregnancy is higher than that on the day of estrus. These proteins may be related to material transport, immune response and antibacterial. The same method was used to identify the milk of Holstein cows at different periods after childbirth. 8 different proteins were found, respectively: alpha -S2 casein. Body, beta casein, kappa casein precursor, immunoglobulin heavy chain precursor, albumin, serum albumin precursor, cGMP phosphodiesterase alpha subunit, keratin I cytoskeleton 10. alpha -S2 casein precursor only detected in the milk sample on the day of childbirth, beta casein was detected at 7 days after delivery and 35 days after childbirth, and at 35 days after delivery The highest expression of kappa casein precursor on the day of childbirth was higher than that on the 7 day after delivery, and then the expression level remained stable after the rapid decline. The immunoglobulin heavy chain precursor existed in the 7,15,28 and 35 days of milk after delivery, although there was a fluctuation, but the lowest expression in the milk samples at 35 days after childbirth. The serum albumin precursor was 7 days after childbirth to 3 after childbirth. The expression of the 5 day expression showed a tendency to increase first and then decrease. The expression of albumin at 7 days after delivery to 35 days after childbirth decreased first and then decreased, and the expression of the lowest expression of.CGMP phosphodiesterase at 35 days after childbirth increased first and then declined at 7,15 and 28 days after delivery. The cytoskeleton of keratin I type 10 there was a steady trend in the expression of protein on the day of delivery and 28 days after delivery. These proteins may be related to passive immunity, substance transport and milk production.

【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S823

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本文編號(hào)：1869103